注射用喜炎平对小鼠、犬睡眠的影响

注射用喜炎平对小鼠、犬睡眠的影响

注射用心炎平是一种新型的中药制剂。从蕨类植物中提取的水生莲皮磺酸具有清热解毒、抗菌消炎、止咳等功效。本文通过对小鼠自发活动的影响试验、对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠的影响试验、小鼠转杆试验及对心血管、呼吸系统的影响试验,研究了注射用喜炎平对动物中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统等的影响,研究了受试物在治疗范围内或治疗范围以上的剂量时,潜在的不期望出现的对生理功能的不良影响,即观察受试物对中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的影响。根据需要可能进行追加和/或补充的安全药理学研究。1实验材料1.1测试对象注射用喜炎平,规格:125mg,批号20040112,哈尔滨三元阳普医药科技有限责任公司提供。1.2天津金耀氨基酸有限公司苯巴比妥钠注射液:规格:1mL/支,批号:01601291,1mL:0.1g,天津金耀氨基酸有限公司。戊巴比妥钠:规格:25g,批号:F20021216,生产单位:中国医药(集团)上海化学试剂公司。氯化钠注射液:规格:100mL:0.9g,批号:03010703,生产单位:沈阳志鹰制药厂。1.3雄各半或雄各半小鼠:昆明种,体重18～22g,雌雄各半由辽宁省药品检验所动物室提供。实验动物犬:体重10～20kg,雌雄兼用,沈阳市东陵区龙元经济动物养殖厂提供。1.4小鼠转棒仪的测定ZIL-2程控自主活动箱(医科院药研所);BIOPAC十六道生理仪(BIOPACSYSTEMSINC.美国);DXP-2大小鼠转棒仪(医科院药研所);CP124S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);JJ1100电子天平(美国双杰兄弟(集团)有限公司常熟双杰测试仪器厂);DGXG1小型电热灭菌器(上海医用核子仪器厂)。1.5统计方法数据用Excel统计,结果用t检验比较。1.6实验室条件温度18℃～24℃,湿度40%～65%。2实验方法2.1影响中枢神经系统的因素2.1.1zil-2小鼠自主活动箱及条件选择取上述健康小鼠60只,按体重随机分为4组,前3组分别尾静脉注射给予注射用喜炎平400、200、100mg/kg,给药体积0.2mL/10g小鼠体重,对照组同法给予同体积氯化钠注射液,给药顺序按拉丁方设计,给药后10min,将小鼠放入ZIL-2程控自主活动箱中,每箱放1只动物,先适应5min,记录10min内小鼠活动数,计算每组的平均值及标准差,给药组与对照组进行t检验,结果见表1。2.1.2对小鼠的影响取上述健康小鼠52只,按体重随机分为4组,前3组分别尾静脉注射给予注射用喜炎平400、200、100mg/kg,给药体积0.2mL/10g小鼠体重,对照组同法给予同体积氯化钠注射液,给药后10min腹腔注射戊巴比妥钠(50mg/kg),以翻正反射消失为入睡时间,从翻正反射消失至恢复时间为睡眠持续时间。记录小鼠入睡时间、睡眠持续时间,计算每组的平均值及标准差,给药组与对照组进行t检验,结果见表2。2.1.3尾静脉注射用喜炎平单次给药后小鼠在转杆上停留时间测定DXP-2大小鼠转棒仪,调节转速为18r/min。试验前1天,筛选能够停留在转杆上至少1min的小鼠。取上述健康小鼠60只,按体重随机分为4组,前3组分别尾静脉注射给予注射用喜炎平400mg/kg、200mg/kg、100mg/kg,给药体积0.2mL/10g小鼠体重,对照组同法给予同体积氯化钠注射液,给药15min后,将小鼠放于转杆上,记录小鼠在转杆上停留的时间,超过60s以60s计。计算每组的平均值及标准差,给药组与对照组进行t检验,结果见表3。2.2生理仪记录取健康犬6只,以苯巴比妥钠腹腔注射麻醉,剂量为170mg/kg,背位固定,分离一侧颈动脉,动脉插管,连接于压力传感器,用BIOPAC十六道生理仪记录分析系统同步记录Ⅱ导联心电图、收缩压、舒张压。经静脉注射分别给予注射用喜炎平144、72、18mg/kg各剂量,给药体积2mL/kg,对照组同法给予同体积氯化钠注射液,每只犬给4次药(每个剂量各1次),给药次序按拉丁方设计,记录给药前及给药后10、30、45、60min的心电、血压曲线,并计算每组的心率、QRS波时间、PR间期、QT间期、ST波电压和血压的平均值及标准差,给药组与对照组进行t检验。2.3给药前后呼吸频率和深度相关性研究试验动物与麻醉方法同试验2,背位固定,于胸骨剑突部位穿线,打结并悬挂于肌张力换能器,连接于BIOPAC十六道生理仪,给药方法同试验2,同步记录给药前后动物的呼吸频率和呼吸深度的变化,测量给药前0min,给药后10、30、45、60min的呼吸频率及呼吸深度,计算每组的平均值及标准差,给药组与对照组进行t检验,结果见表4、表5。3结果3.1影响中枢神经系统的因素3.1.1小鼠自主活动次数对小鼠自主活动次数的影响结果表明,注射用喜炎平400、200mg/kg剂量组对小鼠自主活动次数有增加趋势,与对照组相比差别无显著意义(P>0.05)。100mg/kg剂量组对小鼠自主活动的影响与对照组相比差别无显著意义(P>0.05)。3.1.2对巴比妥钠所致小鼠睡眠的影响结果表明,注射用喜炎平400mg/kg剂量组对戊巴比妥钠所致小鼠的入睡时间与对照组相比有缩短趋势,睡眠时间与对照组相比有明显的延长作用(P<0.05),其它剂量组无明显影响(P>0.05)。3.1.3对小鼠转杆预留时间的影响结果表明,注射用喜炎平400、200、100mg/kg各剂量组对小鼠在转杆上停留的时间与对照组相比差别无显著意义(P>0.05)。3.2对大鼠心率、血压、t波电位的影响结果表明,注射用喜炎平144、72、18mg/kg各剂量静脉注射给药,给药后10、30、45、60min,犬的心率、血压、QRS间期、T波电位与给药前比较差别无显著意义(P>0.05),ST段无明显位移,无心律失常发生。144mg/kg剂量组对犬血压有一过性的降压作用,给药后3min即恢复。各剂量组均有减慢心率的趋势,随剂量增加而作用愈明显,给药10min内作用最强。对照组各时间点的各项指标与给药前相比无显著性差别(P>0.05)。3.3注射用喜炎平对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠的影响见表4。结果表明,注射用喜炎平144、72、18mg/kg静脉注射给药,对犬的呼吸频率及深度影响与给药前比较差别无显著意义(P>0.05),但144、72mg/kg剂量组在给药后有加大呼吸深度,减慢呼吸频率的趋势,其作用随剂量加大而越明显,给药10min内作用最强,随时间的增加而减弱。对照组各时间点的各项指标与给药前相比无显著性差别(P>0.05)。注射用喜炎平400、200mg/kg剂量组对小鼠的中枢神经系统无明显的影响,仅有自主活动增加的趋势;各剂量组对小鼠运动神经系统及协调性无明显影响,400mg/kg对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠有明显的协同作用。分别以144、72、18mg/kg静脉注射给药,对动物心血管系统、呼吸系统均无显著性影响。4对小鼠自主活动的影响根据资料显示,喜炎平与戊巴比妥钠有协同作用,所以在本试验中注射用喜炎平高剂量(400mg/kg)对戊巴比妥钠所致小鼠的睡眠时间有显著的延长作用。在考察心血管系统的影响试验中,144mg/kg剂量组对犬血压有一过性的降压作用,给药后3min即恢复。各剂量组均有减慢心率的趋势,随剂量增加而作用愈明显,给药10min内作用最强。由于犬的个体差异较大,动物数量较少而未有显著性差别。在考察呼吸系统的影响试验中,144、72mg/kg剂量组在给药后有加大呼吸深度,减慢呼吸频率的趋势,其作用随剂量加大而越明显,给药10min内作用最强,其中有2只犬此作用很明显。这可能与喜炎平具有与戊巴比妥钠的协同作用有关。