有机溶剂萃取红曲色素的分离与分析

有机溶剂萃取红曲色素的分离与分析

红景天是红景天产生的色素。由于其强度高、耐光性好、耐酸性好等优点，这种天然色素对氨基酸、活性剂和还原剂非常稳定，不受ca2、mg2、fe2、cu2等金属离子的影响。它是中国古代用来染色的。到目前为止，它已经被广泛应用于食品、纸浆、糖、果汁和其他食品中。据文献报导,红曲色素为混合物,均不溶于水,可溶于乙醇、氯仿等有机溶剂,其主要成分为:红曲素、黄红曲素、红斑红曲素、红曲玉红素、红斑红曲胺和红曲玉红胺。为了进一步开发红曲色素在食品加工工业中的应用,有必要进一步搞清楚红曲色素混合物中的各组分及它们的溶解性能、稳定性等,本实验应用高效液相色谱仪分析经各种有机溶剂萃取的样品溶液,分离得到20余种组分,证明除存在上述6种脂溶性色素组分外,还存在水溶性色素成分(呈红色),且成分较多,并对其进行了红外分析,初步对其结构进行探讨。1即是单一纳米颗粒,作为造林对象,制备出以白色素为原料的变色实验样品在水中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得紫红色素溶液;在己烷、庚烷或苯中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得橙黄色素溶液;以氯仿萃取上述除去橙黄色素的沉淀,可得紫红色溶液;在乙醇或丙酮中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得紫红色素溶液。2分辨率色度分析2.1材料表面试剂均为分析纯,红曲产自福建古田。2.2xs色谱数据高效液相色谱仪(Waters公司产),包括U6K进样器,一个M441固定波长紫外检测器,一个M590自动梯度控制仪和两台M510泵,数据处理采用杭星电脑有限公司的XS色谱数据工作站。2.3样品处理红曲米经粉碎后,用不同溶剂萃取,萃取液用0.45μm的膜过滤后,再进行HPLC分析。2.4检测波长a流速:1ml/min;A液:50%甲醇水溶液;B液:80%甲醇水溶液。梯度洗脱程序:A液5min,从5min至30min由100%A线性变至100%B(6#曲线)。检测波长:360nm。色谱柱:μ-BondapakPhenyl和μ-BondapakC18柱,(10μm,300×3.9mmi.d.)(日本Waters公司产)。2.5色度分析的结果2.5.1基不同时分离的基不同时分由于红曲色素各脂溶性组分分子结构的差别,在C18和Pheny1柱上的选择性有所不同,见图1和图2。Pheny1柱对共轭双键有差别的物质分离较好,但如仅R—取代基不同时,分离不很好,图2中后面可看到四个较大的峰,收集的前两个馏分(1,2)为紫红色,后两个(3,4和5,6)为黄色,其中前两个峰在C18柱上分离仍为两个峰,而后两个峰在C18上分离为后面的四个峰。由于C18柱对R-基不同的异构体分离度较好,因此Pheny1柱(图2)上的后两个峰应各是两种异构体,根据其颜色、分子结构中共轭情况、相对分子质量和色谱选择性,可判断3号峰为红曲素、4号峰为黄红曲素、5号峰为红斑红曲素和6号为红曲玉红素,而前两个峰(1,2)为红斑红曲胺和红曲玉红胺。2.5.2苯萃取物和丙烷酸酯的色谱图色谱图中前10min所出峰对应于红曲米的水溶性色素成分,这可以从水萃取物的分析得到证实,见图3。这一点与色谱的选择性一致,而非水溶性色素成分均在10min之后出峰,见庚烷、石油醚和苯萃取物的色谱图(图4～6)。庚烷、石油醚和苯均只能萃取出后两组黄色素(4种),余下的主要非水溶性色素成分为色谱峰1和2,从颜色、分子结构中共轭情况、相对分子质量和色谱选择性来看,1号峰是红斑红曲胺,2号峰为红曲玉红胺。3红外光谱分析3.1仪器IR-435,日本岛津公司产。3.2水溶性色素的红外光谱表征红曲米样品用研钵碾成粉末,干燥,用正己烷多次萃取至溶液无色,再用氯仿多次萃取至溶液基本无色,得不含非水溶性色素的固体残渣,再用无水乙醇萃取得红色水溶性色素溶液,将此溶液离心后,取上层清液,加到溴化钾盐片上,冷风吹干成薄膜,将此盐片进行红外分析,得到水溶性色素的红外光谱图(图7),在3400cm-1有一宽展吸收峰,表明可能存在缔合的羟基,在2900cm-1为C-H伸缩动峰,在1640cm-1的吸收峰为共轭的C=