2010年第一次全国临床微生物室间质评活动总结

2010年第一次全国临床微生物实验室间质评回报总结PAGEPAGE5卫生部临床检验中心微生物室2010.4.222010年第一次全国临床微生物室间质评活动总结2010年第一次全国临床微生物室间质评活动共有885个单位参加，有852个实验室按照规定时间结果报告,现对按时上报结果进行总结。表1.分离鉴定结果统计菌号正确结果正确实验室数目正确百分率（%）1001未检出致病菌(20分)金黄色葡萄球菌（不扣分）12071314.284.31002小肠结肠炎耶尔森菌(20分)耶尔森菌属内其他种(非高致病菌)(10分)833598.10.61003杜克雷嗜血杆菌(20分)嗜血杆菌属及属内其他种（10分）7201484.91.61004坂崎肠杆菌(20分)阴沟肠杆菌（10分）839398.90.41005嗜水气单胞菌(10分)气单胞菌属内其他菌（5分）833698.20.71005-1化脓性链球菌或A群链球菌(10分)β-溶血链球菌其他血清群(5分)链球菌属及草绿色链球菌群(5分)7815898.00.61.0表2.1004号坂崎肠杆菌药敏结果统计序号抗生素名称参考结果各实验室结果分布MIC(g/ml)抑菌环直径(mm)敏感度SIR1庆大霉素0.12525S751112头孢他啶头孢曲松头孢噻肟0.12532SSS7323675794022023头孢吡肟0.12531S758114亚胺培南0.09431S77701表3.1005号嗜水气单胞菌药敏结果统计序号抗生素名称参考结果各实验室结果分布MIC(g/ml)抑菌环直径(mm)敏感度SIR5头孢吡肟/头孢曲松0.12534SS72533933106复方新诺明0.09429S6497137左氧氟沙星环丙沙星0.0030.0044040SS6256540210表4.1005-1号A群链球菌（化脓链球菌）药敏结果统计序号抗生素名称参考结果各实验室结果分布MIC(g/ml)抑菌环直径(mm)敏感度SIR8青霉素G/氨苄西林0.0080.0163840SS66340121959红霉素/克林霉素0.0230.0323128SS6846686915610万古霉素0.524S73312鉴定结果分析1001号咽试子标本咽部肿痛青年患者，分离出金黄色葡萄球菌和副流感嗜血杆菌。有84.3%（713/846）实验室报告金黄色葡萄球菌，9个实验室报告嗜血杆菌。多数咽部感染患者都是由于呼吸道病毒引起，由细菌引起感染占5-40%。A群β-溶血链球菌（化脓链球菌）是引起咽峡炎最常见的致病菌。其他C群和G群β-溶血链球菌也可以经食源性引起咽峡炎爆发，但不像A群链球菌那样引起严重的免疫系统疾病。肺炎链球菌和嗜血杆菌属有时可在咽部标本中分离到，但这些菌不大可能是引起普通咽峡炎的病原菌，如副流感嗜血杆菌。嗜血杆菌定植在健康人的上呼吸道，在咽部标本培养分离到时，实验室不应常规报告嗜血杆菌，这样会引起混淆和导致临床医生不必要的治疗。咽试子细菌培养常规只检测化脓链球菌，除非医生特殊需要，如在诊断白喉时。溶血隐秘杆菌（Arcanobacteriumhaemolyticum）也可引起咽炎和扁桃体化脓。b型流感嗜血杆菌和偶尔由金黄色葡萄球菌或肺炎链球菌引起的会厌软骨炎可迅速发展为蜂窝织炎，可造成气道阻塞。咽试子培养对确定此类感染的病原菌有意义。1004号标本应报告“未检出致病菌”。只有122个实验室正确报告。金黄色葡萄球菌在下呼吸道感染中有临床意义，因标本操作和报告流程尚未统一，这次咽试子培养报告“金黄色葡萄球菌”不扣分。1002号腹泻患者便标本培养分离出小肠结肠炎耶尔森菌和大肠埃希菌，报告有临床意义的小肠结肠炎耶尔森菌，有5个实验室种鉴定错误，报告耶尔森菌属内其他种(非高致病菌)。1003号阴茎溃疡试子标本分离出杜克雷嗜血杆菌（Haemophilusducreyi）和表皮葡萄球菌，后者是皮肤污染菌。84.9%（720/848）实验室正确分离、鉴定和报告杜克雷嗜血杆菌，有14个实验室报告其他嗜血杆菌，5个实验室报告淋病奈瑟菌，87个实验室报告表皮葡萄球菌，10个实验室报告其他葡萄球菌，21个实验室报告“未检出致病菌”。淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和杜克雷嗜血杆菌肯定是生殖系统的致病菌，而肠杆菌科、金黄色葡萄球菌和B群链球菌只在某些临床情况下作为致病菌（条件致病菌）。杜克雷嗜血杆菌是革兰阴性小杆菌，引起性传播疾病外生殖器软下疳。杜克雷嗜血杆菌分离条件：5%CO2气体培养，最适生长温度33℃培养3-4天，血平板上可生长，巧克力平板生长更好。与其他嗜血杆菌区别：生长需X因子，不需要V因子，其他嗜血杆菌生长需要V因子，不需X因子，流感嗜血杆菌和埃及嗜血杆菌生长需要X+V因子；不溶血与溶血嗜血杆菌区别；杜克雷嗜血杆菌氧化酶阳性，触酶阴性，吲哚阴性，SPS敏感，碱性磷酸酶阳性；而阴道加德纳菌是氧化酶阴性，触酶阴性。此外，标本来源也作为判断报告杜克雷嗜血杆菌的重要依据。很多实验室培养分离不到杜克雷嗜血杆菌，可能与培养基质量、培养温度及培养环境气体等因素有关。1004号婴儿菌血症标本，血培养阳性，生长坂崎肠杆菌（Enterobactersakazakii）。98.9%（839/848）实验室正确分离和鉴定。临床意义：坂崎肠杆菌是条件致病菌，食源性传播，引起新生儿脑膜炎、坏死性小肠结肠炎、败血症、脑脓肿、脑梗塞等散发和爆发病例，特别是早产儿，免疫系统弱的新生儿，新生儿死亡率为40-80%。坂崎肠杆菌对常规灭菌方法耐受，如不易穿透、耐热、耐干燥压力。在婴儿配方奶粉中可长期存活，还可在4℃冷藏冰箱中繁殖；可形成生物膜(biofilms)可抵御消毒剂(CatherineJ.Hunter.Enterobactersakazakii:AnEmergingPathogeninInfantsandNeonates.SurgInfect(Larchmt).2008October;9(5):533–539.)。坂崎肠杆菌生化反应与阴沟肠杆菌非常相似，可通过菌落产黄色区分。1005号标本伤口试子，分离出化脓链球菌和嗜血气单胞菌，这两种菌都是引起伤口感染的病原菌。气单胞菌属有14个种，只有豚鼠气单胞菌、嗜水气单胞菌、简氏气单胞菌(A.jandaei）、舒氏气单胞菌(A.schubertii)和维氏气单胞菌(A.veronii)五种目前认为可引起人类各种感染，包括：胃肠炎、蜂窝织炎和菌血症。还有溶血尿毒症、烧伤相关败血症和各种呼吸道感染，包括会厌软骨炎。临床标本中有3种菌呈分离优势菌：嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌和维氏气单胞温和生物型(A.veroniibiotypesobria)。嗜水气单胞菌V-P试验和赖氨酸脱氢酶阳性，水解七叶苷阳性可与豚鼠气单胞菌和其他气单胞菌区别。化脓链球菌正确分离和鉴定实验室占上报实验室的92.5%(788/852),有些分离到的实验室鉴定为无乳链球菌或不能血清分群，还有实验室报告草绿色链球菌群。首先血平板的质量影响到化脓链球菌的生长，羊血质量关系到是否产生透明溶血环，确定是β-溶血链球菌后，用杆菌肽纸片敏感判断是化脓链球菌，还可用β-溶血链球菌分型血清确认，CAMP试验阳性是无乳链球菌，鉴别并不困难。血平板所用羊血如果贫血，则看不到典型的透明溶血环，可能是草绿色溶血，就会导致错误的判断。纠正措施：应该用肺炎链球菌和化脓链球菌做每批次的血平板质控，如果能生长并有典型菌落和溶血性，血平板才合格，可用于接种临床标本。药敏评价1004号标本坂崎肠杆菌典型的坂崎肠杆菌治疗用氨苄西林和庆大霉素。为了防止可能的坂崎肠杆菌耐药性增加，医生也会考虑用卡巴配能类和头孢吡肟与氨基糖苷类联合治疗，但标准推荐最小使用广谱抗生素原则，还是要依据培养和药敏结果用药。研究者通过对各种坂崎肠杆菌株的抗菌谱调查，发现野生群坂崎肠杆菌株没有对头孢菌素天然耐药，并且这些菌株缺少β-内酰胺酶。象其他肠杆菌科菌株一样，坂崎肠杆菌对林可霉素类,糖肽类、链阳霉素(streptogramins)、梭链孢酸(fusidicacids)天然耐药。因此，这株菌是典型的敏感菌株。很多使用专家系统的实验室依据系统对氨苄西林、第一、二代头孢菌素敏感结果进行了修正，可能是依据通常肠杆菌属细菌的耐药谱特征。这次活动对氨苄西林、第一、二代头孢菌素结果不计分。1005号混合感染标本嗜水气单胞菌，依据CLSI“不常见和苛养菌药敏标准(M45-A)”,初级试验和报告：阿莫西林/棒酸，氟喹诺酮类、复方新诺明、第三、四代头孢菌素。嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌和维氏气单胞温和生物型是临床标本中最常分离的气单胞菌，大多数文献的药敏试验都是局限在这3种菌。邻单胞菌属只有一个种：类志贺邻单胞菌，药敏结果解释原来是归在肠杆菌科，因其表型与气单胞菌属相似，致病谱也相似，因此药敏折点判断归在气单胞菌指南。肠道外分离的气单胞菌需要做药敏试验。气单胞菌药敏解释标准见附表。1005-1号标本化脓链球菌药敏结果解释在CLSI需氧菌药敏折点判断标准中(M100-S20)的β-溶血链球菌群，药敏用5%羊血MH平板，质控菌株为ATCC49619肺炎链球菌。青霉素或氨苄西林、头孢吡肟或头孢噻肟或头孢曲松、万古霉素有纸片扩散法和MIC法折点标准，厄他培南、美罗培南、达普托霉素只有MIC法折点标准，因尚未发现或极少出现对这些抗生素耐药的β-溶血链球菌，因此只有敏感判断折点。注意：1.纸片法检测肉眼观察完全抑制的抑菌环，没有明显可见的受试菌生长的边缘为抑菌环端点。用反射光读取抑菌环结果，光源在平皿上方。若用放大镜观察抑菌环，忽略边缘生长非常微弱的菌落。2.CLSI/M100-S20文件中β-溶血链球菌群包括大菌落的A群（化脓链球菌）、C群、G群和B群（无乳链球菌），小菌落β-溶血链球菌的A群、C群、F群或G群抗原（咽峡炎链球菌群，之前也称米勒链球菌,即S.mil