黄体酮阴道凝胶的处方研究

黄体酮阴道凝胶的处方研究

黄酮是女性生殖期甾醇的重要组成部分。这是许多其他激素转化为生物的重要前体，在子宫内膜的分泌、转化、过渡周期等发挥着重要作用。黄体酮用于黄体期缺乏、子宫内膜异位、子宫内膜癌等临床病症的治疗。黄体酮口服迅速经肝脏代谢,一般以注射方式给药。黄体酮的黏膜给药具有很多优点,尤其是阴道黏膜表面积大、血流丰富、对多种药物(如激素类、多肽类药物)透过性好。普通的阴道给药制剂局部滞留时间短,而采用生物黏附性聚合物(如:卡波普、聚卡波菲)作为阴道黏膜黏附性药物传递的载体,可显著延长药物的滞留时间,经阴道黏膜给药的黄体酮缓释凝胶可控制较低的黄体酮血药浓度,降低不良反应和避免子宫内膜癌的发生。凝胶制剂的黏度和体外药物释放性质对控制产品质量、方便给药和合理用药有重要意义。本研究制备了间隔48h给药的缓释黄体酮阴道凝胶制剂,考察了处方组成和工艺因素对药物释放性质和黏度的影响。材料和方法1zrd6-b-b-b-b-b-b-b溶出度仪100-2型胶体磨(温州市江南机械厂),BH-200型高速搅碎机(江苏江阴科研器械厂),微孔滤膜(0.8μm,MilliporeCo.,Bedford,MA),ZRD6-B药物溶出度仪(上海黄海药检仪器厂),聚四氟乙烯样品池(自制),高效液相色谱仪(日本岛津)。黄体酮对照品(中国药品生物制品检定所),微粉化黄体酮(湖北制药厂),聚卡波菲、卡波普934P(BFGoodrichCo.),混合酸甘油酯(黑龙江铁力制药厂),液状石蜡(药用,哈尔滨化工化学试剂厂),十二烷基硫酸钠(分析纯,沈阳化学试剂厂),其他为分析纯试剂。2混合酸甘油酯法将聚卡波菲、卡波普934P均匀分散在适量去离子水中,水化适当时间,加入液状石蜡、适量甘油、混合酸甘油酯和山梨酸,搅拌,加入微粉化黄体酮,补加水至处方量,用胶体磨或高速搅碎机混合均匀。用NDJ-1型旋转黏度计分别测定201℃和37℃时凝胶的动态黏度。4黄体酮缓释凝胶参照《中华人民共和国药典》2000年版,采用高效液相色谱法测定。色谱柱:YWGC18(Diamonsil,200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水(75:25);流速:1.mL·min-1;进样20μL。柱效以黄体酮峰计算不低于2500。参照文献,采用自制的聚四氟乙烯样品池对黄体酮缓释凝胶的体外药物释放性质进行研究。测定方法如下:称取黄体酮凝胶(约1.125g)置于样品池中间的圆槽(直径40mm、深0.9mm),凝胶上覆盖0.8μm滤膜,再依次放置硅橡胶密封圈和聚四氟乙烯垫圈,并用螺栓固定。将上述装置放入溶出杯中,用500mL质量分数0.5%的十二烷基硫酸钠溶液(溶解在pH4.0枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液中)为释放介质,采用桨法装置测定药物释放度,转速50r·min-1,释放溶剂温度为(37±0.5)℃,释放度数据用一级速率方程拟合。结果1胶体磨和水化时间的影响黄体酮凝胶处方组成及其动态黏度值见表1。可见,聚卡波菲和液体石蜡的质量分数对凝胶的黏度有明显影响。聚卡波菲质量分数增加,凝胶的黏度增大;少量液体石蜡以油状液滴分散在凝胶中能降低体系的黏度,增加液状石蜡的质量分数(相应地减少水的量),即凝胶相中聚合物的浓度增大,因此凝胶的黏度增大。水化时间对凝胶的黏度影响不大;用胶体磨混合的产品黏度相对较低,这可能是胶体磨的剪切力使大分子链断裂,导致凝胶黏度降低。从制剂的外观看,采用胶体磨混合,凝胶的均匀性和细腻性较好。图1是黄体酮含量分别为8%(处方2)和4%(处方9)的凝胶在不同转速(6,12,30,60r·min-1)和不同温度(25℃,37℃)条件下测定的黏度值。由图1可知,凝胶的黏度随着转速增加而下降,具有剪切变稀的流变学性质;温度升高,凝胶的黏度增大。2聚卡波菲、液体石蜡的用量和最佳配方的确定黄体酮缓释凝胶的累积药物释放度曲线见图2～5。累积释放度数据为至少重复3次测定的结果,相对标准偏差<5%。聚卡波菲和液体石蜡的用量以及凝胶制备的工艺条件(混合方法、水合时间)对药物释放无明显影响。经过相同时间,药物含量高的凝胶的累积释放度相对较低。药物释放均符合一级动力学过程。3稳定性考察指标不同规格(4%和8%)黄体酮缓释凝胶各3批样品经稳定性加速试验(40℃,RH75%)6个月,外观均为乳白色。含量、释放度、黏度等稳定性考察指标无明显变化,表明本品稳定性良好。8%黄体酮缓释凝胶(批号:001106)的稳定性试验结果见表2。黄体酮阴道凝胶的流变学能力本品为阴道用凝胶制剂,处方中聚卡波菲为主要的黏膜黏附材料。与大多数以卡波普为基质的凝胶剂不同,本品中卡波普和聚卡波菲未加碱中和,凝胶的pH值在3～4之间,与正常生理状态下阴道黏液的pH值一致。在此pH条件下,卡波普和聚卡波菲的羧基为非解离状态,具有更强的黏膜黏附作用,能够延长药物在给药部位的滞留时间。药物体外释放和流变学性质是评价黏膜给药的凝胶剂的重要参数。对于半固体凝胶制剂,黏度低则流动性强,相应地在给药部位的滞留时间较短;而黏度过大则会导致生产和用药不便。实验表明,调节聚卡波菲和液体石蜡的含量可以获得具有适宜流变学性质的凝胶。此外,黄体酮缓释凝胶的剪切变稀的流变学特征也有利于凝胶的生产和使用。黄体酮的释放符合一级动力学方程(相关系数r2>0.99),可能是因为药物释放速率是由微粉化黄体酮的溶解速率所控制,而不是通常的扩散控制过程(符合Higuchi方程)。体外药物释放研究不仅对制剂开发和质量控制有重要意义,也为合理临床用药提供了依据。实验表明,黄体酮阴道凝胶能在较长时间内按一级速率过程持续释放活性药物,即药物的累积释放度与凝胶的初始含药量有关(如图5所示),如果凝胶的初始含药量高,则经过相同时间药物释放百分率相对较低。如果临床中需要每天给药1次或频繁给药,为了能维持一定量