病原微生物实验室生物安全管理手册

信阳职业技术学院检查科微生物实验室生物安全手册生物安全管理体系文献目录序号名称备注一实验室人员准入制度二人员培训考核制度三人员健康监护制度四生物安全检查制度五实验室人员生物安全行为规范六事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度七实验室生物危险标记使用规定八实验室内务管理制度九实验室菌（毒）种和生物样本安全保管和档案管理制度十实验室废弃物管理制度十一实验室消毒隔离制度十二实验室应急处置预案一.实验室人员准入制度1.目的规范生物安全二级实验室的使用和管理，确保操作人员，实验对象和环境安全，确保检测成果精确可靠。2.合用范畴合用于生物安全二级实验室安全运转及在此环境下的全部检测工作。3.职责进入生物安全二级实验室从事检测工作的全部人员严格按照本规定执行。4.人员准入规定：（1）健康体检合格者（2）本实验室工作人员需获得检查资格证方可独立上岗工作（3）本实验室工作人员需定时参加医院组织的生物安全知识培训并通过考核（4）本实验室工作人员参加上级机构组织的生物安全知识培训并获得证书（5）新入人员除通过以上各项考核后还需与含有工作经验的资历人员共同工作三个月方可独立操作5.人员进入同意程序因特殊状况计划进入实验室的人员需提出书面申请，经实验室负责人同意方可进入实验室。二人员培训考核制度1.目的规范实验室有关人员的培训考核2.合用范畴合用于生物安全涉及的全部工作人员3、人员培训考核制度3.1.实验室工作人员的培训新工作人员进入实验室前，必须通过培训，获得进入实验室工作的资格。培训由实验室负责人组织进行，并指定熟悉实验室工作的人员担任辅导。培训内容涉及：（1）有关检查的国家诊疗原则、解决原则以及本手册内容。（2）实验室全部设备的使用办法。（3）个人防护办法。（4）实验室基本技术。（5）实验室消毒净化的办法。3.2.实验室工作人员的资格考试新工作人员通过培训后，由实验室负责人组织考核,以确保工作人员掌握实验室技术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能。通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作3个月，才干获得独立进行实验室操作的正式资格。三．人员健康监护制度1.目的规范实验室有关人员的健康监护2.合用范畴合用于生物安全涉及的全部工作人员3、人员健康监护制度3.1工作人员从事工作前必须进行HIV抗体和甲肝、乙肝、丙肝等肝炎病毒标记物的检测，每六个月进行一次HIV抗体复检，并保存血样一年以上。3.2工作人员应每年进行一次体检，并将可能涉及生物安全危害的体检成果存档，方便判断生物安全危害与否发生。3.3实验室应建立人员健康监护档案，档案内容涉及既往病史、检测成果、免疫接种史等，方便对从事涉及生物安全危害人员的健康状况进行跟踪。3.4实验室工作人员的适合工作状态实验室工作人员必须在身体状况良好的状况下，才干进入实验室工作。出现下列状况，不应进入实验室：身体出现开放性损伤；患发热性疾病：感冒、上呼吸道感染；其它造成抵抗力下降的状况：妊娠、在实验室内持续工作4小时以上或其它因素造成的疲劳状态。四．生物安全检查制度1.目的规范实验室生物安全，确保设备正常运行。2.合用范畴合用于生物安全涉及的仪器设备（例如生物安全柜、放置试剂的冰箱等）3、生物安全检查制度实验室内，每3个月以细菌培养的方式进行安全性检测。生物安全柜内放置平板培养基2个，放置试剂的冰箱内冷藏箱每层放置平板培养基1个，实验室4角和中间各放置1个，半污染区放置2个。将平皿敞开5分钟，然后盖上，每平板菌落数平均不得超出2个，超出原则，需要对实验室进行紫外线照射，污染部位用75%乙醇擦拭消毒。五．微生物实验室设施、设备监测、检测和维护制度1、目的为确保明验室工作人员对各类检查仪器的安全使用，维护检查工作的正常运转，确保检查工作的顺利进行。2、合用范畴合用于微生物实验室内的多个检查仪器。3、微生物实验室设施、设备监测、检测和维护制度3.1微生物实验室内多个设施要符合有关规定，所使用的全部仪器应通过安全使用认证。实验室供电线路中必须安装断路器和漏电保护器。3.2科内大型仪器、设备、精密仪器由专人负责保管、登记、建档，仪器设备的使用者，需经专业技术培训3.3科内仪器设备应在检定和校准的使用期内使用，并按照检定周期的规定进行自检或强检，对使用频率高的仪器按规定在检定周期内进行期间核查。3.4重要仪器设备应建立使用统计，有操作规程，注意事项，有关技术参数和维护统计，并置于显见易读的位置。仪器使用者必须认真恪守操作规程，并做好仪器设备使用统计，定时维护仪器设备。3.5仪器设备所用的电源，必须满足仪器设备的供电规定。用电仪器设备必须安全接地。电源插座不得超栽使用。仪器设备在使用过程中出现断路保护时，必须在查明断电因素后，再接通电源。不准使用有用电安全隐患的设备（如漏电、电源插座破损、接地不良、绝缘不好等）。3.6仪器设备在使用过程中发生异常，随时统计在仪器随机档案上，维修必须由专业人员进行，并做维修统计。3.7仪器设备使用结束后，必须按日常保养进行检查清理，保持良好状态。3.8全部仪器设备应加贴唯一性标记及准用、限用、禁用标志。3.9长久用电设备（如冰箱、培养箱）应定时检查，并统计运行状况。3.10因故障或操作失误可能产生某种危害的仪器设备，必须配备对应的安全防护装置。3.11使用直接接触污染物的仪器设备前，必须确认对应的安全防护装置能正常启用。实验工作完毕后，必须对接触污染物的仪器设备进行对应的清洗、消毒。3.12科内应指定专人对安全设备和实验设施/设备维护管理，确保其处在完好工作状态。仪器设备较长时间不使用时，应定时通电、除湿。有统计，保持设备清洁干燥。（例如每年应对生物安全柜进行一次常规检测，须特别关注高效过滤器。定时对离心机的离心桶和转子进行检查）。3.13高压灭菌器使用时，定时进行生物学批示剂检测。3.14冰箱应定时化冰、清洗，发现问题及时维修。实验区冰箱内严禁放个人物品及与实验无关的的物品。3.15全部仪器设备在维修和维护保养前运出实验室前必须进行消毒解决。六．实验室生物危险标记使用规定1.目的规范生物安全二级实验室的使用和管理。2.合用范畴合用于生物安全二级实验室。3.具体规定：3.1在含有生物安全二级实验室门口加贴专门的生物安全警示标记，以避免无关人员进入有关区域，造成感染的危险。3.2在有可能对人员造成威胁的生物标本储存处加贴生物安全警示标记，以防无关人员将危险标本带入安全区域对人员造成威胁。3.3全部微生物实验室内各项仪器设备处加贴生物安全警示标记。七.实验室内务管理制度1.目的确保生物安全二级实验室的正常运行、实验人员、物品和环境的安全2.适应范畴适应于生物安全二级实验室。3.职责进入生物安全二级实验室工作的全部工作人员严格遵照本管理制度执行。4.基本制度4.1在主实验室设立清洁区、半污染区和污染区。入口处贴有醒目的生物危险标志。4.2非实验室有关人员和物品不得进入。4.3实验室内不得进食和饮水，或者进行其它与实验无关的活动。4.4实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须通过实验室负责人的同意。4.5实验过程中，严格按有关操作程序操作，减少气溶胶的产生。4.6实验室的工作人员必须是经受过专业培训的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验室技术人员指导下进行上岗培训，达成合格原则，方可开始工作。4.7实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作。4.8实验室的工作人员必须恪守实验室的全部制度、规定和操作规程。4.9实验室的工作人员在开始工作前必须留本人血清进行有关的检测，后来定时复检。如有疫苗必须进行免疫注射。4.10全部培养物、废弃物在运出实验室前必须经可行的消毒办法进行消毒。4.11工作前应消毒，活性物质溅出后要随时消毒。4.12进行感染性实验室时，应严禁别人进入实验室，或必须经实验室负责人同意方可入内。4.13实验室事故解决：工作人员在操作过程中发生意外，如针刺和切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内、衣物污染实验台面等均视为安全事故，应视事故类型的不同状况，立刻进行紧急解决。具体方法按《实验室应急处置预案》执行。4.14填写意外状况登记与解决统计表，并按规定报告给有关部门。4.15除特殊状况外，严禁在实验室内使用锐器。4.16剩余的标本应密封后置于适宜条件下保存。4.17实验过程中应使用鉴定合格的二级生物安全柜。4.18实验设备在运出修理或维修前必须严格消毒，方可运出。九实验室菌（毒）种和生物样本安全保管和档案管理制度1.目的规范实验室菌（毒）种和生物样本的保管和档案管理2.合用范畴实验室菌（毒）种和生物样本的解决和档案管理3、实验室菌（毒）种和生物样本的保管3.1按国家规定能够保存的菌（毒）种，由指定的专人负责登记、保存和管理。按期传代、鉴定，必须在无菌室或接种罩内进行，并做好有关统计。在保存过程中发现菌（毒）种变异或死亡，应及时上报实验室负责人。3.2本区检出的地方菌（毒）株应及时上报，因工作需要临时保存的菌（毒）株也应按上级规定的时间进行销毁解决。新发现的菌（毒）株，要做好原始统计，并上报主管部门复核确认。3.3菌（毒）种必须每种设一统计卡，其内容涉及：名称、编号、来源、分离日期、鉴定成果、鉴定者、审核者、传代状况、所用培养基、保存办法、温度、使用转移及销毁状况、保存者、部门负责人等。3.4向上级主管部门申请索取菌（毒）种和向下级有关部门发放菌（毒）种时，应有2人参加办理，严格执行国家有关规定，手续要完备，并认真做好统计3.5一、二类菌（毒）种，应派专人向提供单位领取，不得邮寄；三类菌（毒）种的邮寄必须持有邮寄单位证明，并按照菌（毒）种邮寄与包装的有关规定办理。3.6未经上级同意，任何单位及个人不得以工作之便，进行国际间各类菌（毒）种交流，做好菌（毒）种安全防备工作。4、档案管理制度4.1、非实验室人员不得随意查看实验室统计4.2、实验室人员负责妥善保存多个样品登记本、报告单及实验室原始统计，不得私自修改和销毁4.3、未经领导同意不得向无关人员或单位提供任何实验室及感染者信息十实验室废弃物管理制度1.目的规范废弃物解决2.合用范畴锋利器具和其它废弃物的解决。3.具体办法：3.1锋利器具的解决3.1.1锋利器具，如针、注射器等，除特殊状况外，严禁在实验室使用，尽量用塑料器材替代玻璃器材。3.1.2注射和吸取感染性材料时，必须使用一次性注射器。用过的针头、注射器直接放入防刺破的盛废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，进行高压消毒解决。3.1.3打碎的玻璃器具，严禁用手直接清理，必须使用其它工具，如扫把、簸箕、夹子或镊子等。3.2废弃物的解决3.2.1实验样本在解决和进行实验室检测时产生的废弃物，如一次性针头、离心管、平皿等应放入适宜的容器和严格防漏的高压袋内，待实验结束后立刻就地高压消毒。3.2.2实验过程中产生的污染性液体物质、废弃的液体标本等放在盛有消毒液的严格防渗漏的专用容器中，并及时加盖。3.2.4以上全部盛装废弃物的容器，在每次实验结束后，就地高压消毒。3.2.5高压锅应有专人负责，严格按使用阐明操作，确保在121℃条件下，高压30分钟，以达成消毒规定。3.2.6全部实验产生的废弃物，必须经严格高压消毒后方能运出实验区，并送至指定地点集中焚烧解决。十一、实验室消毒隔离制度1.目的规范微生物实验室和生物安全二级实验室的消毒隔离工作。2.合用范畴微生物实验室和生物安全二级实验室。3.职责全部工作人员都必须遵从本规程。4.具体环节4.1实验室基本规定4.1.1实验室相对独立，实验室核心区涉及实验间及缓冲间，明确划分清洁区、半污染区和污染区，并有明显标记。4.1.2实验人员进入实验室应穿戴好个人防护用品，如隔离衣、防护眼睛、口罩、一次性手套等。实验过程中注意本身防护，并避免操纵过程中的交叉污染。4.1.3培养基、组织、体液等必须放在防漏密闭的容器中储运。4.1.4血清学实验、样品的解决和分装应在BSL-2安全柜内进行。4.1.5样品离心使用密封的离心杯，以防溅出。4.1.6实验过程中使用的器材、实验废弃物均应按废弃物解决程序进行消毒解决。4.1.7实验完毕，先消毒物体表面，再按规定程序脱下个人防护用品放入包装袋内就地高压消毒，并进行空气消毒。4.1.8离开实验室前，必须按有关规定消毒双手。4.2消毒办法4.2.1仪器等表面消毒：工作结束后，用含有效氯1000的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。4.2.2工作台等物体表面消毒：工作完毕，用含有效氯mg/L的消毒液或75％乙醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。4.2.3个人防护用品消毒：实验结束，将隔离衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121℃高压消毒30分钟。防护镜浸泡在75％乙醇或有效氯为1000mg/L的含氯消毒剂中，作用30-60分钟。4.2.4手的消毒：用典伏或75％的乙醇擦拭，作用1-3分钟。4.2.5空气消毒：每次实验前后用紫外灯照射消毒，每次不少于1小时，每立方米空间安装紫外灯瓦数≥1.5W，距紫外灯1米处照射强度≥70W/㎡。4.2.7地面消毒：工作结束，应用含有有效mg/L的消毒液喷洒拖地。十二、实验室应急处置预案1．目的规范紧急状况的解决工作。2．合用范畴微生物实验室和微生物安全二级实验室。3．职责遇有紧急状况全部工作人员严格按此规程解决。4．具体规定：4.1造成或可能造成实验室污染，但未造成人身伤害的实验室事故，由实验室负责人解决。例如实验过程中，由于标本、试剂溢出溅落造成操作台或地面的污染等，应立刻喷洒消毒液并覆盖浸透消毒液的纸巾，等消毒液彻底浸泡30分钟后，对污染的物品进行解决。清理后的物品高压灭菌。并填写生物安全二级实验室意外状况登记与解决统计表，实验室负责人应指导这些解决行动，并检查解决效果。4.2在没有强毒微生物时，在实验室内受到意外伤害，例如割伤、烧伤、烫伤等，由实验室负责人解决。令受到伤害的人员立刻停止工作，用消毒液清洗未破损的皮肤表面，伤口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器重复冲洗。有在同一实验室内工作人员或派人快速着装进入实验室，去除造成伤害的因素，清理实验材料，协助受伤人员紧急解决并撤离实验室。受到伤害的人员应立刻就医，并将受伤因素及接触微生物的状况通报负责人。对其进行恰当而完整的病史统计。在其身体状况未恢复之前，不得重新进入实验室工作。实验室在通过整顿，消除了造成伤害的故障之后，方可重新使用。4.3伤害事故可能造成被强毒微生物感染，例如针头刺破、锐器割伤、粘膜暴露等途径接触到感染性液体，首先进行局部解决，用肥皂和水清洗污染的皮肤，挤压伤口尽量挤出损伤处的血液，用肥皂或清水冲洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。在操作过程中发生培养物、污染材料溅落身体表面等状况，首先使用喷淋装置，尽快将污染物冲洗掉，然后再进行局部解决。暴露的粘膜应尽快用生理盐