LINC01376-miR-15b-3p＿R-1-FGF2轴在LMW-PAHs致A549和H1299细胞EMT中的机制研究

LINC01376-miR-15b-3p＿R-1-FGF2轴在LMW-PAHs致A549和H1299细胞EMT中的机制研究LINC01376/miR-15b-3p＿R-1/FGF2轴在LMW-PAHs致A549和H1299细胞EMT中的机制研究

摘要：

低分子量多环芳烃（LMW-PAHs）是一类广泛存在于自然环境中的化学物质，其与肺癌的关系备受关注。本研究旨在探究LINC01376/miR-15b-3p＿R-1/FGF2轴在LMW-PAHs诱导A549和H1299细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）中的机制。

材料与方法：

1.细胞培养：采用A549和H1299细胞系，在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中，37°C、5%CO2条件下培养。

2.暴露于LMW-PAHs：选择Benzo[a]pyrene（BaP）和Anthracene（ANT）两种LMW-PAHs作为研究对象，使用浓度梯度进行实验组的处理。

3.转染：利用LINC01376siRNA、miR-15b-3pmimic和FGF2-overexpressionplasmid进行细胞转染，以细胞模型进行后续研究。

4.实时荧光定量PCR（RT-qPCR）：检测LINC01376、miR-15b-3p和FGF2的表达水平。

5.Westernblot：检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达水平。

6.细胞迁移和侵袭实验：使用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。

7.统计分析：使用SPSS20.0进行统计学分析，结果以均值±标准差表示，差异具有统计学意义时，P＜0.05。

结果：

1.LMW-PAHs暴露显著抑制了A549和H1299细胞系中LINC01376的表达，同时诱导了FGF2的过度表达。

2.LINC01376siRNA转染显著增加了A549和H1299细胞EMT相关蛋白N-cadherin和Vimentin的表达水平，同时降低了E-cadherin的表达水平。

3.miR-15b-3pmimic转染显著增加了A549和H1299细胞EMT相关蛋白N-cadherin和Vimentin的表达水平，同时降低了E-cadherin的表达水平。

4.FGF2-overexpressionplasmid转染显著增加了A549和H1299细胞EMT相关蛋白N-cadherin和Vimentin的表达水平，同时降低了E-cadherin的表达水平。

5.LMW-PAHs处理后，A549和H1299细胞的迁移和侵袭能力明显增强，而LINC01376siRNA转染、miR-15b-3pmimic转染和FGF2-overexpressionplasmid转染均进一步增强了此能力。

结论：

本研究结果表明，LINC01376/miR-15b-3p＿R-1/FGF2轴在LMW-PAHs诱导A549和H1299细胞EMT中发挥重要作用。LMW-PAHs处理导致LINC01376表达下调，进而增加miR-15b-3p的表达水平。miR-15b-3p通过靶向调控FGF2的表达，进而促进了A549和H1299细胞的EMT进程。因此，该机制可能在肺癌发展中扮演重要角色，提供了新的治疗靶点，为进一步研究提供了理论基础本研究表明，LMW-PAHs处理导致A549和H1299细胞的EMT过程的加强，这与蛋白N-cadherin和Vimentin的表达水平上升以及E-cadherin的下降有关。此外，LINC01376/miR-15b-3p＿R-1/FGF2轴在LMW-PAHs诱导的EMT中发挥了重要作用。具体地说，LINC01376的下调增加了