高效芝麻检测方法的改进

高效芝麻检测方法的改进

在中国消费者的蔬菜中，芝麻是许多消费者喜爱的品种。中国的芝麻总面积约为70万吨，主要用于食用和挤油。每年芝麻油消费量达到20万吨以上。芝麻制油历史悠久,经历了原始的人力挤压、水代法到动力机榨的过程,一般不精炼。芝麻油具有浓郁、显著的香味,可用于做汤、凉拌、调馅及风味小吃,能促进人们的食欲,有利于食物的消化吸收,同时芝麻油营养价值和经济价值很高,很受老百姓的欢迎。芝麻油掺伪现象历来就存在。由于芝麻油的市场价格高于其它植物油,不法商贩利用芝麻油特殊而浓厚的香味,在芝麻油中添加其它植物油冒充纯正芝麻油,从中牟取暴利,严重损害了消费者的利益。为了打击芝麻油掺假事件,有助于加强流通领域监督管理,维护消费者身体健康,有必要提高芝麻油检测方法的实用性。本方法是针对芝麻油纯度检验,对原来的吉林省标准做了修改,目的是使原来的方法经过修改后,对操作者更加安全,操作更加简便,最重要的是实用性更好。1新方法的应用本文方法与DB22/T72-1992主要技术差异:1.1修改了定性步骤中样品的用量。原方法试样量10mL;新方法改为0.5g,增加了石油醚作溶剂。修改原因:第一,油脂样品和蔗糖盐酸溶液混合后分层时间大大缩短:原来方法是30min,增加石油醚作为溶剂,溶液粘度降低,分层时间缩短为2min。第二,10mL的量取不方便,因为油脂试样粘度较大,无论用量筒还是移液管都不能快速的移取;新方法使用称量的方法,可以快速的完成量取,不仅节省了时间,而且,用小烧杯和玻璃棒代替了量筒或移液管(使用的玻璃仪器小型化),很明显新方法所用的玻璃仪器更加容易刷洗。虽然样品用量减少了,但是,定性分析的时候,显色是非常明显的,0.5g样品量足够了。第三,新方法对含有芝麻油质量分数1%的各个品种植物油(大豆油、葵花油、菜籽油、棉籽油、花生油),均出现明显的显色反应,即可以定性检出。新定性方法采用0.50g试样,若增加试样用量,油脂中芝麻油质量分数<1%的也可以检出。1.2新方法补充了芝麻油参比液的制备方法,原来方法没有叙述,不方便方法的实际运用。1.3定量步骤中,以盐酸(7+2)代替了浓硫酸;消除了原来方法先加入浓硫酸再加入水产生热导致的不安全因素。1.4新方法的定量步骤:为了在振荡混合时,使反应充分进行,增加了石油醚的用量。同时也为了保证比色用液体体积的足够,考虑到1cm比色池的容积,和比色池需要润洗,原来的5mL显得不足,所以,将比色用的溶液量提高到10mL。1.5原方法使用比色管,分层后的溶液,用来比色分析的是下层溶液,原方法没有提供移取下层溶液的用具和方法,使操作者选取玻璃仪器不一定合适,比色用溶液带有少量油脂,粘附在比色池上,不易清洗。新方法使用分液漏斗分离出下层溶液,使分层清晰,比色用溶液不带油脂不会污染比色池。1.6确定了吸光值采集时间:以纯芝麻油为试验样品,取质量浓度为5mg/mL的纯芝麻油参比液5.00mL,按着新方法操作。从振荡开始计时,振荡5min,再经过分层转移静置,到15min开始时间扫描,每10s采集吸光值一次,扫描95min,对时间扫描获得的吸光值数据汇总(见表1～表3和图1)。从开始振荡计时,15min～60min这段时间内,吸光值的变化较大;60min～90min这段时间内,吸光值的变化很小,此时间段之前,会增大定量误差,此时间段之后,会使分析时间偏长。故确定吸光值采集时间为振荡60min～90min。1.7方法回收率的测定:以李锦记芝麻油为纯芝麻油参比样品,称取1.00g,以大豆油稀释至10.00g,得到纯度为10.0%的芝麻油;再以纯度为10.0%的芝麻油稀释得到纯度分别为3.00%和5.00%的芝麻油。用本方法测定纯度并计算回收率,见表4。实验表明:本法测定的未知样品纯度具有较高的准确性,回收率在98.4%～106.7%,满足测定需求。2方法内容2.1标准磨口瓶2.2%可见分光光度计,比色池10mm。梨形分液漏斗:100mL或者150mL。天平:感量0.1mg,感量10mg。容量瓶:50mL和100mL。比色管:25mL。自动移液器:500μL。标准磨口具塞三角瓶:100mL。具塞试管或者比色管:10mL。往复式振荡器。刻度吸管:5mL和10mL。移液管:10mL。2.2油气成分配盐试验本检验方法中所用试剂如不特别注明,均为分析纯。具体试验剂有:浓盐酸;茴香醛;无水乙醇;石油醚:60℃～90℃;蔗糖;纯芝麻油;盐酸(7+2):70mL浓盐酸,加入20mL水,混匀;水:符合GB/T6682中三级水要求。2.3复配液、水液水质蔗糖盐酸溶液:称取1.00g蔗糖放在研钵中,加入10mL浓盐酸,研磨使之溶解,倒出上层清液;再加入浓盐酸10mL,继续研磨和溶解,上述溶液皆转入100mL容量瓶中;以浓盐酸定容。需要注意的是:此溶液配制后,通常要求在1h内使用;配制后若溶液颜色较深,不能够区别芝麻油质量分数为1%的样品与空白,则应该重新配制。称取0.50g未知芝麻油试样于25mL比色管中,加入5mL石油醚使其溶解,加入5mL蔗糖盐酸溶液,加塞,沿着比色管长度方向振荡30次,静置20min;在静置期间,观察下层溶液,与不加油脂的空白试验比较,有红色出现,表示未知试样中有纯芝麻油存在。2.4定性方法2.4.1石油醚标准磨口具塞液、c、l的分光光度计算方法20g/L茴香醛乙醇溶液:2.0g茴香醛溶解于100mL无水乙醇,储存于棕色试剂瓶中(可以储存6个月)。芝麻油参比液:称取2.50g纯芝麻油,加入石油醚溶解,定容于50mL容量瓶中;再移取10.00mL,定容至100mL容量瓶中,得到纯芝麻油质量浓度为5mg/mL的参比液。准确吸取质量浓度为5mg/mL的纯芝麻油参比液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL于100mL标准磨口具塞三角瓶中,分别加入石油醚使得加入后的液体总量量均为10.00mL,各瓶均加入盐酸(7+2)10mL、20g/L的茴香醛乙醇溶液500,于频率为150次每分钟的振荡器上混匀5min,转入分液漏斗,静置10min,放出下层溶液于10mL试管内、加塞。试管依次编号为0、1、2、3、4、5,以0号试管中样液,于525nm波长调节分光光度计零点;从振荡结束开始计时,过60min,开始测定1号～5号试管样液吸光值,要求在30min内完成吸光值测定。2.4.2测试量的测定称取2.50g未知油脂试样,按照绘制标线方法进行测定吸光度值。按2.50g油脂试样量计算,10mL试管内溶液代表未知芝麻油试样质量m为5mg。从振荡结束开始计时,过60min,开始测定样液在525nm波长下的吸光值A样,要求在30min内完成吸光值测定。同时做两次平行试验。2.5测试结果的绝对差值着色函数建立线性回归方程,计算试管内未知芝麻油试样所含纯芝麻油质量m1。以标准系列中纯芝麻油质量M为横坐标、吸光值A为纵坐标,建立线性回归方程:A=aM+b。依据此方程和未知芝麻油试样溶液的吸光值,计算试管中纯芝麻油质量m1。未知芝麻油的纯度以未知试样中纯芝麻油质量分数表示,按照公式(1)计算:ω=m1m×100%(1)ω=m1m×100%(1)式中:ω——未知试样中纯芝麻油质量分数,%;m1——试管中纯芝麻油质量,mg;m——试管中未知芝麻油样品质量,mg。两次平行试验的平均值保留一位小数。重复性:在同一实验室,同一操作者使用相同仪器,对同一份样品连续进行两次测定,获得两个测定结果。当纯芝麻油质量分数小于10%,两次测定结果的绝对差值应该不大于平均值的20%;当纯芝麻油质量分数大于等于10%,两次测定结果的绝对差值应该不大于平均值的10%。当未知芝麻油试样中纯芝麻油质量分数小于10%或者试样溶液吸光值小于0.1,需要增加10mL试管内未知芝麻油试样质量,以便做进一步的确认。3是否掺假比检测关于“定性、定量方法”的适用范围,我们认为:当怀疑某一份芝麻油样品仿冒某品牌产品时,可以对该样品和相对应的芝麻