液体培养基和固体培养基对丽格海棠愈伤组织和试管苗扩繁研究

液体培养基和固体培养基对丽格海棠愈伤组织和试管苗扩繁研究

1试验的目本文在研究液体培养的基础上，选择了丽江复合培养的优势和劣势，并对丽江复合培养进行了经济有效的培养方法。2试验时间：1999年11月至2000年3月：宝县生物技术中心实验室3试验材料和方法3.1培养基动物实验室内原有的丽格海棠愈伤组织和试管苗各10组。培养基:PH=5.6~5.8蔗糖20g/L分化培养基:固体:MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L液体:MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L生根培养基:固体:MS液体:MS注:液体培养基不加琼脂或其它凝聚素,其余成分与固体培养基完全相同。3.2分化和生根培养将20组试验材料分别接种到固体培养基和液体培养基上,每瓶接种生长状态相同的愈伤组织5块(直径5~6mm)或试管苗10株。在相同的温度(22~24℃)、湿度、光照(800Lx,每天10小时)等条件下进行分化和生根培养。接种10天后开始观察各组试验材料的生长情况,完成一次分化和生根周期时调查全瓶苗体积和株高,记载周期天数,出瓶移栽后调查其成活率及长势。4结果与分析4.1液体培养的稳定性以全瓶苗体积和继代周期作为比较指标,调查结果列于表1。由表1结果可以看出,进行液体培养的丽格海棠愈伤组织完成一次分化周期时全瓶苗体积平均是固体培养的842.43%,表明丽格海棠愈伤组织进行液体培养时分化不定芽数量达固体培养的8倍以上;再由继代周期对比可以看出,丽格海棠愈伤组织采用液体培养比固体培养的继代周期短10天,说明液体培养分化的不定芽长势较快。由此可以确定,液体培养丽格海棠愈伤组织是一种较固体培养易分化、增殖迅速的培养方式。4.2液体培养的株高和茎粗以每瓶内最高一株记株高,以株高、茎粗和生根周期作为比较指标,调查结果列于表2。由表2结果可以看出,液体培养丽格海棠试管苗生根移栽时平均株高是固体培养的404.20%,茎粗是固体培养的193.3%,表明丽格海棠试管苗采用液体培养不但长势快,而且更粗壮。再由两种培养方式下丽格海棠试管苗生根周期对比来看,采用液体培养的试管苗比采用固体培养的生根时间平均短10天,表明丽格海棠试管苗进行液体培养可以早生根,早移栽。由此可以确定丽格海棠试管苗采用液体培养方式比固体培养既有利于培养壮苗,又可以加速培养周期,是一种更适宜的快繁培养方式。4.3液体培养的丽格海棠试剂苗移栽成活率分析试管苗移栽后长出新根为成活标志。调查结果列于表3。由表3结果可以看出,液体培养的丽格海棠试管苗移栽后成活率较固体培养的高10%,表明液体培养的丽格海棠试管苗移栽后更易成活。因此,大规模的扩繁丽格海棠生产中,采用液体培养方式的试管苗从生产成本上比固体培养的要低10%左右。5结论5.1液体培养的丽格海棠、种子苗的生长和移栽、栽植、栽苗的时间丽格海棠扩繁研究中采用液体培养方式可以使愈伤组织分化出不定芽数量高于固体培养的8倍,而且不定芽长势快。另外,液体培养的丽格海棠试管苗长势既快于固体培养的试管苗,而且秧苗健壮,生根早,移栽后易成活。因此可以确定,在丽格海棠的扩繁生产中,采用液体培养方式不但可行,而且可以达到比固体培养更理想的效果。5.2液体培养的时间液体培养的丽格海棠愈伤组织和试管苗继代和生根周期都较固体培养的时间短,说明丽格海棠采用液体培养时养分吸收利用快,因此,进行液体培养时,养分补充一定要及时,否则会失去液体培养的优势。5.3液体培养的成本液体培养基与固体培养基相比,成本约低70%(琼脂占培养基成本的70%),而且采