土壤中27种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱

土壤中27种农药及其代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法范围本文件规定了土壤中27种农药及其代谢物残留量的液相色谱-串联质谱法测定的原理、试剂和材料、仪器、试样制备、分析步骤、结果计算、精密度及定量限。本文件适用于土壤中27种农药及其代谢物残留量的测定。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样经乙腈提取，提取液盐析离心后，取上清液，经分散固相萃取净化，液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水应为GB/T6682规定的一级水。试剂乙腈（CH3CN，CAS号：75-05-8）：色谱纯。甲醇（CH3OH，CAS号：67-56-1）：色谱纯。乙酸铵（CH3COONH4，CAS号：631-61-8）：优级纯。氯化钠（NaCl，CAS号：7647-14-5）。无水硫酸镁（MgSO4，CAS号：7487-88-9）。甲酸（HCOOH，CAS号：64-18-6）：色谱纯。溶液配制乙酸铵-甲酸水溶液（2mmol/L）：称取0.154g乙酸铵，用0.1%甲酸水溶液溶解并稀释至1 000mL，摇匀。标准品27种农药及其代谢物标准品，见附录A，纯度应不小于96 %。标准溶液配制标准储备溶液（1 000 mg/L）：准确称取10 mg（精确至0.01 mg）各农药标准品，用甲醇溶解并分别定容至10 mL，以不高于-18 ℃的温度条件避光保存，有效期1年。混合标准储备溶液（20 mg/L）：准确吸取1 mL标准储备溶液（5.4.1）于50 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，以不高于-18 ℃的温度条件避光保存，有效期6个月。材料乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径40 μm～60 μm。石墨化炭黑（GCB）：粒径40 μm～120 μm。微孔滤膜（有机相）：0.22 μm。仪器液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。分析天平：感量0.01 mg和感量0.01 g。冷冻干燥机。恒温水浴振荡器（往复式）。涡旋混合器。超声波清洗器：超声功率500 W～700 W。离心机：转速不低于5 000 r/min。土壤筛：孔径2 mm。试样制备取0 cm～10 cm深的地表土1 kg，除去其中的异物（枝棒、叶片、石子、动植物残体等），碾碎后混匀，用四分法留样250 g。将样品置于冷冻干燥机中冻干24 h，并过2 mm孔径的土壤筛。将筛过的细土装入洁净容器，密封避光，粘贴唯一性标识，于不高于-18 ℃的温度条件保存。分析步骤提取称取10 g试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞刻度离心管中，加入10 mL水浸泡1 h，加入10.0 mL乙腈，于50 ℃水浴振荡器上振荡提取30 min，于50 ℃水浴超声提取10 min，加入5 g氯化钠，剧烈振荡1 min，4

500 r/min离心5 min，待净化。净化吸取上清液5 mL至内含700 mg无水硫酸镁、100 mgPSA的刻度离心管中，若试样为黑土可另加入12

mgGCB。涡旋混匀1 min，4 000 r/min离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜，待测定。液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下：色谱柱：C18，2.0 mmi.d.（内径）×75 mm，粒径1.6 μm，或相当者；柱温：40 ℃；流速：0.2 mL/min；进样量：1.0 μL；流动相组成：A相为乙酸铵-甲酸水溶液（5.2），B相为甲醇，流动相梯度条件见表1。流动相及其梯度条件（VA+VB）时间minVAVB0.090101.090103.050506.025758.059510.059511.09010质谱参考条件质谱参考条件如下：离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：正离子和负离子同时扫描；加热模块温度：400 ℃；DL管温度：250 ℃；碰撞气（氩气）压力：230 kPa；干燥气（氮气）流速：15 L/min；多反应监测（MRM）：每种农药分别选择一对定量离子和定性离子，按照出峰顺序，分时段分别检测，每种农药的离子对质谱参数和保留时间参见附录B。基质匹配标准工作曲线选择空白土壤样品按照8.1、8.2进行前处理，得到空白基质提取液。定量吸取混合标准储备溶液（5.4.2），用空白基质提取液逐级稀释成质量浓度为0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L的系列基质匹配标准工作溶液，供液相色谱-串联质谱仪测定。以测得定量离子峰面积为纵坐标、对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。定性及定量保留时间被测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5 %之内。离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在目标化合物。本方法中标准物质多反应监测质量色谱图参见附录C。定性时离子丰度比的最大允许偏差离子丰度比%＞50＞20～50＞10～20≤10允许相对偏差%±20±25±30±50定量外标法定量。试样溶液的测定将基质匹配标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱-串联质谱仪中，以保留时间和离子丰度比定性，测得定量离子质量色谱图峰面积。待测样液中目标化合物的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，否则应使用空白基质提取液将其按照一定倍数稀释至线性范围内，再进行分析。平行试验按8.1～8.6步骤对同一试样进行平行试验测定。空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。结果计算试样中待测物的残留量，按公式（1）计算： （AUTONUM）式中：ω——试样中待测物残留量的数值，单位为毫克每千克（mg/kg）；ρ——从标准工作曲线中得到的待测物质量浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L）；V——提取液体积的数值，单位为毫升（mL）；m——试样质量的数值，单位为克（g）；n——测定浓度超出线性范围时，使用空白基质提取液稀释的倍数。计算结果以重复性条件下获得的2次独立测XX果的算术平均值表示，保留2位有效数字，含量超过1 mg/kg时，保留3位有效数字。精密度在重复性条件下，获得的2次独立测XX果的绝对差值不应超过重复性限（r），参见附录D。在再现性条件下，获得的2次独立测XX果的绝对差值不应超过再现性限（R），参见附录D。定量限本文件方法对各种化合物的定量限为0.005 mg/kg。

（资料性）

27种农药及其代谢物中英文名称、CAS号和分子式27种农药及其代谢物中英文名称、CAS号和分子式，见表A.1。27种农药及其代谢物中英文名称、CAS号和分子式农药中文名称农药英文名称CAS号分子式速灭威Metolcarb1129-41-5\o"Findallcompoundsthathavethisformula"C9H11NO2扑草净Prometryn7287-19-6C10H19N5S三环唑Tricyclazole41814-78-2C9H7N3S三唑酮Triadimefon43121-43-3C14H16ClN3O2多菌灵Carbendazim10605-21-7C9H9N3O2吡虫啉Imidacloprid105827-78-9C9H10ClN5O23-羟基克百威Carbofuran-3-hydroxy16655-82-6C12H15NO4戊唑醇Tebuconazole107534-96-3C16H22ClN3O克百威Carbofuran1563-66-2C12H15NO3噻嗪酮Buprofezin69327-76-0C16H23N3OS苯醚甲环唑Difenoconazole119446-68-3C19H17Cl2N3O3氯虫苯甲酰胺Chloantraniliprole500008-45-7C18H14BrCl2N5O2烯酰吗啉Dimethomorph110488-70-5C21H22ClNO4甲氨基阿维菌素苯甲酸盐Emamectinbenzoate137512-74-4C49H77NO13多效唑Paclobutrazol76738-62-0C15H20ClN3O精异丙甲草胺（S）-Metolachlor87392-12-9C15H22ClNO2抗蚜威Pirimicarb23103-98-2C11H18N4O2莠去XAtrazine102029-43-6C8H14ClN5乙草胺Acetochlor34256-82-1C14H20ClNO2哒螨灵Pyridaben96489-71-3C19H25ClN2OS阿维菌素Abamectin71751-41-2C49H74O14咯菌腈Fludioxonil131341-86-1C12H6F2N2O2氟虫腈Fipronil120068-37-3C12H4Cl2F6N4OS氟甲腈Fipronil-desulfinyl205650-65-3C12H4Cl2F6N4氟虫腈砜Fipronil-sulfone120068-36-2C12H4Cl2F6N4O2S氟虫腈亚砜Fipronil-sulfide120067-83-6C12H4Cl2F6N4S嘧霉胺Pyrimethanil53112-28-0C12H13N3

（资料性）

27种农药及其代谢物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数27种农药及其代谢物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见表B.1。27种农药及其代谢物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数中文名称保留时间min定量离子对碰撞能V定性离子对碰撞能V速灭威6.62166.0/108.912166.0/94.031扑草净8.32241.8/157.925241.8/200.018三环唑6.16189.7/136.029189.7/162.923三唑酮8.46293.7/68.922293.7/197.116多菌灵4.51192.1/160.117192.1/132.130吡虫啉5.30256.1/175.118256.1/209.1153-羟基克百威5.56238.1/163.114238.1/181.111戊唑醇9.04308.1/70.035308.1/124.939克百威6.92222.1/165.112222.1/123.122噻嗪酮9.69306.0/116.218306.0/106.329苯醚甲环唑9.32406.0/251.028406.0/110.955氯虫苯甲酰胺7.87484.0/453.118484.0/286.116烯酰吗啉8.37388.2/301.121388.2/165.134甲氨基阿维菌素苯甲酸盐8.35886.7/158.140886.7/126.147多效唑8.37294.1/70.021294.1/125.040精异丙甲草胺8.81283.7/252.118283.7/176.126抗蚜威6.55239.1/72.124239.1/182.115莠去X7.67215.7/174.118215.7/96.125乙草胺8.79269.9/224.19269.9/148.121哒螨灵10.51365.2/309.113365.2/147.125阿维菌素10.60891.3/305.226891.3/567.315咯菌腈8.29246.7/179.8-27246.7/125.9-33氟虫腈8.79434.8/329.8-16434.8/249.9-27氟甲腈8.68386.6/350.9-13386.6/281.9-31氟虫腈砜8.96450.4/414.9-16450.4/281.9-27氟虫腈亚砜8.86418.5/261.9-28418.5/382.9-13嘧霉胺8.12200.1/107.025200.1/168.129

（资料性）

27种农药及其代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图27种农药及其代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图，见图C.1～图C.27。速灭威扑草净三环唑三唑酮多菌灵吡虫啉3-羟基克百威戊唑醇克百威噻嗪酮苯醚甲环唑氯虫苯甲酰胺烯酰吗啉甲氨基阿维菌素苯甲酸盐多效唑精异丙甲草胺抗蚜威莠去X乙草胺哒螨灵阿维菌素咯菌腈氟虫腈氟甲腈氟虫腈砜氟虫腈亚砜嘧霉胺

（资料性）

精密度的表示和计算重复性限（r）要求见表D.1，再现性限（R）要求见表D.2。重复性限（r）名称含量mg/kg重复性限r含量mg/kg重复性限r含量mg/kg重复性限r速灭威0.0050.000520.050.00400.50.043扑草净0.0050.000420.050.00410.50.038三环唑0.0050.000360.050.00320.50.031三唑酮0.0050.000360.050.00380.50.025多菌灵0.0050.000490.050.00230.50.024吡虫啉0.0050.000440.050.00320.50.0343-羟基克百威0.0050.000410.050.00370.50.019戊唑醇0.0050.000430.050.00340.50.027克百威0.0050.000370.050.00320.50.031噻嗪酮0.0050.000400.050.00290.50.023苯醚甲环唑0.0050.000420.050.00360.50.034氯虫苯甲酰胺0.0050.000390.050.00340.50.026烯酰吗啉0.0050.000460.050.00380.50.029甲氨基阿维菌素苯甲酸盐0.0050.000570.050.00400.50.048多效唑0.0050.000630.050.00420.50.034精异丙甲草胺0.0050.000420.050.00350.50.033抗蚜威0.0050.000430.050.00290.50.044莠去X0.0050.000540.050.00380.50.034乙草胺0.0050.000370.050.00310.50.032哒螨灵0.0050.000440.050.00460.50.034阿维菌素0.0050.000580.050.00400.50.040咯菌腈0.0050.000610.050.00470.50.033氟虫腈0.0050.000560.050.00600.50.039氟甲腈0.0050.000500.050.00360.50.037氟虫腈砜0.0050.000490.050.00340.50.036氟虫腈亚砜0.0050.000530.050.00380.50.032嘧霉胺0.0050.000380.050.00400.50.032再现性限（R）名称含量mg/kg再现性限R含量mg/kg再现性限R含量mg/kg再现性限R速灭威0.0050.00140.050.00880.50.066扑草净0.0050.00140.050.00710.50.042三环唑0.0050.000510.050.00760.50.062三唑酮0.0050.000630.050.00400.50.038多菌灵0.0050.000700.050.00570.50.065吡虫啉0.0050.000650.050.00410.50.0443-羟基克百威0.0050.00130.050.00420.50.038戊唑醇0.0050.000910