生药学教学课件：第四章 生药的安全性评价

超市买菜，“青翠欲滴”拟或“不整齐，有虫眼”的菜好？

市售茶用“菊花”真好看！“黄灿灿，整齐如一，又不会发霉或生虫”……

这是“天然、绿色”好菊花吗？食品质量安全问题国民健康问题什么是安全的？？？？？？？？潲水油与地沟油中国地沟油一年的总利润能达到15亿-20亿元（凤凰网，2010年3月17日）目前我国每年返回餐桌的地沟油有200万~300万吨。而中国人一年的动、植物油消费总量大约是2250万吨——也就是说，按照比例，你吃10顿饭，可能有1顿碰上的就是地沟油。

塑化剂的前世今生第四章

生药的安全性评价药物最基本要求—安全

一、题目

1999年在英国发现了两例因治疗“湿症”服用中药马兜铃导致肾中毒的病例，随后两年内连续在新加坡、马来西亚、日本、韩国出现了类似该中药中毒的事件，2001年1月17日，马来西亚卫生部一纸禁令：全面禁止销售含有马兜铃酸的中药，并取消17种含有该成分中成药的注册，限定所有的医院和销售公司马上停止销售和收回成药，这些中药“黑名单”包括了北京同仁堂的“止血散”与“气管炎咳喘丸”。随后其他国家如新加坡也采取了类似的处理办法，并引发国际关于中药安全性的质疑，以及关于中药安全性的大讨论，我国企业的中药企业成了“冤大头”，损失惨重！04年本科生的期末考题

请你分析造成该事件的原因、危害，并提出解决之道，或者代表SDFA局长和/或国家卫生部部长给马来西亚卫生部部长写一封信，说明中国对中药安全性之努力，请他收回成命，支持中药发展。

二、背景知识马兜铃，中药叫“关木通”，来源于东北马兜铃（Aristolochiaemanshuriensis）主产东北各地，以吉林最多。药材品种十分混乱，除马兜铃外，还有木通（三叶木通，五叶木通Akebiaquinata）与川木通Clematisarmandii），后两种植物用不含马兜铃酸。关木通性寒，味苦，有毒，现代临床主要用于肝硬化，心性与肾性水肿，尿路感染等疾病。马兜铃含有马兜铃酸A（左）与B（右），结构式如下：小柴胡汤间质性“肺炎”马兜铃酸“肾衰”活血破血中药脏器出血复方芦荟胶囊汞含量超标中药安评常忽视！从“关木通”的肾毒性事件，

到刺五加注射液、茵栀黄注射液、双黄连注射液相继出现使用致死事件，以及最近几年的鱼腥草注射液、舒血宁注射液等中药注射剂事件，中药注射液已备受质疑。科普作家方舟子也对对“川贝枇杷膏”“六味地黄丸”“安宫牛黄丸”“藿香正气水”提出了质疑

！2014年十大食品安全事件第一大事件：沃尔玛售含有“狐狸肉“的驴肉第二大事件：杭州黑心企业售过期烘焙食材第三大事件：上海福喜食品大量采用过期肉第四大事件：台湾统一19款产品涉黑心油第五大事件：“吸血鬼饮料”是三无产品第六大事件：恒天然奶粉出现食物中毒症状第七大事件：统一泡面被检出大肠杆菌超标第八大事件：无籽水果含避孕药第九大事件：昆明黑心商贩造有毒米线第十大事件：淡水鱼生鱼片含肝吸虫2012年国家食品药品监管局发布通报，提醒关注维C银翘片安全性。2004年1月1日至2010年4月30日，有关维C银翘片的病例报告数共1885例，严重病例48例，无死亡报告。严重病例的不良反应表现为：全身皮疹伴瘙痒、严重荨麻疹、重症多形红斑型药疹、大疱性表皮松解症；肝功能异常；过敏性休克、昏厥；间质性肾炎；白细胞减少等…！2013年食品安全第七大事件维C银翘片“含毒”，中成药安全引人忧

2013年4月，广药子公司广西盈康药业及其上游企业宝山堂被曝违法使用硫磺熏蒸的山银花及其枝叶生产药品，存在以山银花枝叶代替山银花的投料问题，其出产的维C银翘片可能涉“毒”！……影响生药安全性的主要因素因素1.内源性有害物质a.肝毒性成分:肝毒吡咯里西啶生物碱(HPAs)

b.肾毒性成分:马兜铃酸(AA)

2.重金属及有害元素3.农药残留：如有机氯化合物,有机磷化合物,拟除虫菊酯类等

4.其他有害物质：黄曲霉素(AF),二氧化硫

外源性有害物质第1节生药中内源性有害物质的检测与危害一、生药中主要的内源性有害物质野百合碱千里光碱肝毒性成分HPAs（肝毒吡咯里西啶生物碱）肝毒性成分？鉴别本身无毒马兜铃酸(AA)中草药肾病（马兜铃酸肾病）二、分布1.HPAs主要分布于有花植物，如紫草科(所有属)，菊科(千里光族及泽兰族)及豆科的猪屎豆属。2.AA

主要分布于马兜铃属如有马兜铃（北马兜铃的果实）、青木香（马兜铃的根部）、天仙藤（马兜铃的茎）、关木通（木通马兜铃）、寻骨风（绵毛马兜铃）、广防己和朱砂莲等。

三、检测方法HPLCHPCEHPLC-MSHPCE-MS四、限量

如德国卫生部规定，内服含HPAs的植物药制剂，每天摄取量不得超过1μg，外用时，每天摄取量不得超过100μg

。

第2节生药中重金属和有害元素的检测

生药中一类重要的外源性有害物质就是重金属(heavymetals)及有害元素(hazardouselements)。重金属系指在实验条件下能与S2-作用显色的金属杂质，如：铅、银、汞、铜、镉、锡、锑、铝等。一般在药品生产过程中遇到铅的机会较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅为代表。常见对人体有害的元素和重金属元素主要有：砷、汞、铅、镉、铜、铝等。

一、生药中重金属及有害物质的来源1.与其生长的环境条件如土壤、大气、水、化肥、农药的施用等有关。2.与植物本身的遗传特性和对该类元素的富集能力等有关。3.生产过程中引入。二、生药中重金属和有害元素的检测方法1.重金属总量a.硫代乙酰胺法b.硫化钠显色反应—比色法

砷元素a.古蔡法b.二乙基二硫代氨基甲酸银法[Ag(DDC)法]2.单个重金属和有害元素的测定方法1.原子吸收分光光度法(AAS)

2.电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)

以铅为代表（一）原子吸收分光光度法(AtomicAbsorptionSpectrophotometry,AAS)(自己看,结合分析化学）

此法适用于测定中药中重金属及有害元素铅、镉、砷、汞、铜。原子吸收分光光度法是基于蒸汽相中待测元素的基态原子对其共振辐射的吸收强度来测定试样中该元素含量的一种仪器分析方法，具有灵敏度高、干扰较少、操作简便、快速、结果准确、可靠等优点，而且可以使整个操作自动化，应用广泛。它是测定痕量和超痕量元素的有效方法。原子吸收一般遵循分光光度法的吸收定律：A=K′C也就是说，吸光度与试样中被测组分的浓度呈线性关系计算方式与紫外可见分光光度法相类似（二）电感耦合等离子体质谱法(InductivelyCoupledPlasma-massSpectrometry,ICP-MS)

电感耦合等离子体质谱法是将被测物质用电感耦合等离子体离子化后，按离子的质荷比分离，测量各种离子谱峰的强度的一种分析方法。等离子体是由自由电子、离子和中性原子或分子组成，总体上成电中性的气体，其内部温度高达几千度至一万度。样品由雾化器雾化后由载气携带从等离子体焰炬中央穿过，迅速被蒸发电离并通过离子引出接口或采样锥导入到质量分析器，样品在极高温度下完全蒸发和解离，电离的百分比高，因此几乎对所有元素均有较高的检测灵敏度。由于该条件下化合物分子结构已经被破坏，所以仅适用于元素分析和元素价态分析。

三、生药中常见重金属和有害元素的限量

重金属和有害元素

国家贮粮

东南亚国家进口中药材及中成药

砷

0.7～5.05.0铅

2020.00铜

150150汞

0.02～0.500.50表1国家贮粮和东南亚国家规定进口中药材及中成药重金属和有害元素限量（≤百万分之一）

铅

镉

砷

汞

铜

重金属总量

甘草

50.320.220

白芍

50.320.220

白矾

20玄明粉

20

20地龙

30西瓜霜

10

10冰片

2

5龟甲胶

30阿胶

3

30金银花

50.320.220

黄芪

50.320.220

鹿角胶

2

30连翘提取物

2

20松节油

10桉油

10黄芩提取物

20银杏叶提取物

20表2《中国药典（2005年版）17种生药或提取物重金属或有害元素的限量（≤百万分之一）

四、生药中农药残留的检测

生药中另一类重要的外源性有害物质就是农药残留(pesticideresidues)。生药中常见的农药残留有有机氯化合物、有机磷化合物和拟除虫菊酯类等。生药的种植、采收、包装、运输、贮藏等各个环节都有可能和农药接触，被其污染。（来源）

（一）生药中农药残留的检测方法农药残留的检测方法主要是气相色谱法(GC)。

此外还有高效液相色谱法、薄层色谱法、免疫吸附法、活体生物测定法等方法。

（二）生药中农药残留的限量药材六六六（总BHC）滴滴涕(总DDT)五氯硝基苯（PCNB）甘草221黄芪221表3《中国药典》（2005年与2010版）对药材中有机氯农药残留的限量（≤千万分之一）

外经贸部提出了适用于药用植物原料及制剂的进出口品质检验的《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》，规定药用植物及制剂的绿色品质标准，包括药用植物原料、饮片、提取物及其制剂等的农药残留量为六六六(BHC)≤0.1mg/kg，滴滴涕（DDT）≤0.1mg/kg，五氯硝基苯(PCNB)≤0.1mg/kg，艾氏剂(aldrin)≤0.02mg/kg

农药种类限量农药种类限量甲草胺(alachlor)0.02杀螟松(fenitrothion)0.5艾氏剂(aldrin)和狄氏剂(dieldrin)总量0.05氰戊菊酸(fenvalerate)1.5甲基谷硫磷(azinphos-methyl)1.0地虫磷(fonofos)0.05溴螨酯(bromopropylate)3.0七氯(heptachlor)(七氯和环氧七氯的总量)0.05氯丹(chlordane)（顺式和反式异构体及氧氯丹的总量）0.05六氯苯(hexachlorobenzene)0.1毒虫畏(chlorfenvinphos)0.5六六六(hexachlorocyclohexane)(异构体(除γ体之外)0.3毒死蜱(chlorpyrifos)0.2林丹(lindane)(γ—

六六六)0.6甲基毒死蜱(chlorpyrifos-methyl)0.1马拉硫磷(malathion)1.0氯氰菊酯(cypermethrin)(及异构体)1.0杀扑磷(methidathion)0.2滴滴涕(DDT)(p,p′—DDT、o,p′—DDT、p,p′—DDE及p,p′—TDE的总量)1.0对硫磷(parathion)0.5溴氰菊酸(deltamethrin)0.5甲基对硫磷(parathion-methyl)0.2二嗪农(diazinon)0.5苄氯菊酯(permethrin)1.0敌敌畏(dichlorcvos)1.0伏杀磷(phosalone)0.1二硫代氨基甲酸盐类(dutguicarbanates)(以CS2计)2.0胡椒基丁醚(piperonylbutoxide)3.0硫丹(endosulfan)(硫丹异构体及硫丹硫酸盐的总量)3.0虫螨磷(pirimiphos-methyl)4.0异狄氏剂(endrin)0.05除虫菊酯类(pyrethrins)(总量)3.0乙硫磷(ethion)2.0五氯硝基苯(quintozene)(五氯硝基苯、五氯苯胺及甲基五氯酚硫化物的总量)1.0表4《英国药典》（2002年版）规定的植物药农药残留限量（≤mg/kg）

五、生药中其他有害物质的检测（一）生药中常见的其他有害物质

1.黄曲霉素

1960年，英国一家农场发生了10万只雏火鸡突然死亡的事件。解剖显示，这些火鸡的肝脏已严重坏死。经过调查发现，这些雏火鸡食用了霉变的花生粉，这是造成其肝坏死和中毒死亡的主要原因。霉变的花生粉中含有一系列由黄曲霉菌产生的活性物质，这些物质就是黄曲霉素（Aflatoxin,AF），它不仅可引起剧烈的急性中毒，而且还是目前所知致癌性最强的化学物质。

黄曲霉素的结构AFB1AFG1临床表现早期有胃部不适、腹胀、厌食、呕吐、肠鸣音亢进、一过性发热及黄疸等。2～3周后出现腹水、下肢水肿、脾脏增大变硬、胃肠道出血、昏迷甚至死亡。

黄曲霉素是一类化学结构相似的二呋喃香豆素的衍生物，目前已分离鉴定出12种以上，分为AFB1

与AFG1

两大类，其基本结构都是二呋喃香豆素衍生物。在食品监测中常以AFB1

作为污染指标。溶于油、氯仿、甲醇等有机溶剂，不溶于水、乙醚、石油醚。其在紫外光下可发出蓝色或绿色荧光。黄曲霉菌是空气和土壤中存在的非常普遍的微生物，世界范围内的绝大多数食品原料和制成品均有不同程度的污染。黄曲霉菌在有氧、温度高（30～33℃）和湿润（89%～90%）的条件下容易生长，并可淘汰其拮抗菌种如青霉菌和镰刀霉菌的生长，从而造成贮存的花生、玉米、大米、小麦、大麦、棉籽和大豆等多种谷物的污染变质，其中，又以花生和玉米的污染最为严重（来源）。

2.二氧化硫

中药材在加工时，常常都会加上硫磺熏蒸作为处理程序之一，达到漂白药材及杀菌防腐的目的。在食品行业中，二氧化硫是常用的防腐剂，主要用于饮料和干果等类食物，作用在于保持食物的色泽和防止霉变。

国家食品药品监管局制订中药材及其饮片二氧化硫残留限量标