【血小板检测现状及在各类疾病中的应用研究6200字（论文）】

血小板检测现状及在各类疾病中的应用研究TOC\o"1-3"\h\u1前言 42血小板检测现状 42.1血小板聚集功能检测 42.1.1比浊法检测 42.1.2全血法检测 52.1.3其他检测方法 52.2血小板活化功能检测 63血小板检测在各类疾病中的应用 63.1血小板检测在糖尿病中的应用 63.2血小板检测在免疫炎症反应中的应用 73.3血小板检测在心血管疾病中的应用 73.4血小板检测在肿瘤转移中的应用 84重组人血小板生成素的应用及发展 85小结 9参考文献 101前言血小板作为当前临床所发现的最小的循环血细胞，具有维持出凝血平衡、促进机体止血、发挥免疫的重要作用。就目前临床发现而言，血小板并不存在细胞核，但是细胞内却存在不少颗粒，其中有些分子颗粒承担了促进机体各类生理机制运转的重要任务[1]。尽管单个血小板体积较小，但是血液中的运转量较为活跃，其活跃度可以说仅次于红细胞。根据临床数据报道显示血小板在血液中含量的异常与各类疾病的病理过程有极大的关系，包括糖尿病、血栓性疾病、肿瘤、炎症等，因而对于人体重要生理活动的运作及维持生命运转均发挥重要作用。当前在血小板功能的各项研究中，血栓和止血是当前有较多相关研究的重要观点，但是除了血栓性疾病，随着越来越多临床研究的开展，血小板也逐渐在糖尿病、脓毒症、炎症等疾病中展开了相关研究[2]。通过文献查找国内外目前有关血小板应用及发展的相关报道，对目前血小板在不同疾病中的作用机制及血小板制品的应用进行了解，发现其缺少综合及系统的阐述，故本论文对血小板的检测现状及其在临床应用发展情况进行分析，从而为当前临床相关疾病的治疗及对症处理方式提供新思路的指导。2血小板检测现状2.1血小板聚集功能检测血小板聚集试验通常可作为血小板功能不全疾病例如凝血酶原状态及血栓性疾病的主要临床诊断方式，当前临床将其作为首要的筛查标准。该试验通过跨膜激活血小板的各种衍生物与血小板膜受体的相互作用，激活膜表面的另一种受体糖蛋白IIb/IIa，与血浆中的纤维蛋白原结合，从而使得血小板发生聚集[3]。血小板聚集的测定是对血小板活化和释放反应、膜蛋白受体和其他综合因子常见表现进行反映，是血小板功能检测的基础，故而临床上常对血小板聚集功能进行测定，该指标也是临床检测血小板活化程度的重要方式[4]。常规血小板检测方法并不能直接对异常的血小板聚集功能进行反映，且该方法缺乏一定的灵敏性。2.1.1比浊法检测临床上检测血小板聚集功能的方法有很多种，但最早用于检测血小板聚集功能的是浑浊度法，由Bon于1962年发现并应用。该方法是一种比较广泛的检测血小板聚集功能的方法[5]。该方法主要由于其血小板絮凝剂能够简便、快速地获得血小板聚集状态，可用于评价血小板聚集功能，具有简便、快速的优点，因而在过去几十年中较为常见，然而其缺点也较为明显，离心分离和其他步骤很可能会导致体外血小板活化，对血小板聚集不敏感，而且该方法重复性非常差，显色样品和血凝素样品会影响浊度的结果，相同条件下与其他检测方法相比需要更多的血液量才能完成检测[7]。随着全血法、流式细胞术等临床新检测技术的出现，该检测方法的应用也逐渐减少。2.1.2全血法检测全血聚集仪检测、血小板功能分析仪检测和血小板计数法均为全血法检测血小板聚集功能的重要手段。全血聚集仪可通过对血液电极间微小的电流或电阻变化而形成聚集曲线，从而实现对患者血小板聚集功能的检测，明文娟等[7]的研究通过采用全血聚集仪对新鲜血液中血小板进行采集，发现该方法的优点是血液不需要离心，因而检测更为便利，然而相对光学聚集仪来说可能会花费更长的时间，且对于小聚集物交不敏感，电极安放环境需要更高的要求，故而对于临床工作需求也相对更难满足。血小板功能分析仪对于血小板功能障碍性疾病有良好的筛选能力，作为一次性反应杯，内有一层膜，膜上小孔，使得其可以对相关诱导剂进行覆盖，抗凝血如果能够经由小孔被吸出，则可通过计算“封闭时间”以反映血小板聚集速率[8-9]。血小板计数法可通过测量血小板数目的改变来对血小板聚集所花时间进行测定，该方法对小样品尺寸小团聚体的形成敏感快速。王楠等[10]通过血小板计数法对小红细胞性贫血患者内血液样本进行检测，并将其与电阻抗法及手工法检测结果进行比较，结果显示血小板计数法对于血小板聚集的检测更具价值，相较于其余两种检测方法来说可以获取更高的准确度。然而在小聚集体快速形成，不能满足仅有大血小板聚集体可测的形态，各时间点进行动态计数器分析，通常在加合体剂30秒后开始，6分钟结束，因而操作步骤相对来说较为复杂，缺少一定时效性[10]。2.1.3其他检测方法散射性粒子子检测法主要通过血小板在聚集过程中引起的光散射变化来对其进行检测，分别通过聚集块大小生成数量来对血小板凝聚功能进行检测[11]。流式细胞术可通过探测器对每个细胞的荧光讯号和散射光进行收集，并将其传入计算机进行分析，从而实现对血小板聚集率的测量，这种方式使得标本处理方式被简化，且具有较高的重复性和敏感性，但是由于检测价格较为昂贵，还不能在临床被大量使用[12]。2.2血小板活化功能检测血小板的活化功能经常通过流式细胞术检测，流式细胞术能够敏感、特异性地检测血液中的活化血小板并评估其功能。血小板活化状态以及血小板应答可以在全血中血小板糖蛋白的免疫荧光技术分析通过荧光和光散射特性鉴定血小板后确定。与静态血小板相比，活化的血小板在膜糖蛋白上发生明显变化，成为活化血小板的检测标志物。流式细胞术的优点如下：（1）血小板可特异性检测，不受其他类型细胞或片段干扰[13]。（2）分析单一或亚组血小板膜上活化标志物的变化，结果真实客观。该方法的缺点为检测成本高，操作复杂。为了避免血小板体外活化，样品需要在45分钟内处理。仅检测循环血小板功能并不反映血管壁上血小板的激活和最近清除的血小板。3血小板检测在各类疾病中的应用3.1血小板检测在糖尿病中的应用糖尿病是当前有着较多发病人群的代谢性疾病，当糖尿病患者发生血管病变后就有可能使得血小板粘附增加、聚集并增强释放反应，导致动脉粥样硬化，引起相关糖尿病并发症的进一步形成，而糖尿病患者并发症的发生可能是由于相关因素引起的血小板粘附聚集有关。李海东等[14]的研究对2型糖尿病患者血小板体积与糖尿病性黄斑水肿的关系进行研究，将160例研究对象分为四组，分别为健康对照组、有糖尿病无糖尿病视网膜病变组、有糖尿病视网膜病变但无黄斑水肿组及有视网膜病变伴黄斑水肿组，结果显示后两组血小板体积明显大于前两组，故而得出结论，血小板体积增高参与了糖尿病视网膜病变及黄斑水肿的进展，由于大体积的血小板所包含的活性物质增多，其代谢能力旺盛，故而聚集功能也会明显增强，甚至还有研究提出大体积血小板的膜可表达的糖蛋白受体数量增多，使得纤维蛋白原之间的亲和力更强，故而更容易引起血小板粘附、聚集能力的增加，并引起血管相关变化，因而通过监测血小板体积可帮助临床医师对糖尿病相应并发症的发生进展进行预测。同时，糖尿病患者血浆可在ADP或肾上腺素后提高正常人群血小板聚集；降糖时，血小板聚集和释放也明显不会有异常。高血糖引起血小板聚集及释放能力增强，血小板处于激活状态，可能是糖尿病患者发生心脑血管并发症的机制之一。研究表明，高血糖可明显增强血小板的粘附功能。影响血栓形成的因素之一是血小板的活化[15]。另外，临床认为血小板的改变也与胰岛素抵抗存在明显相关性，故而可通过对血小板进行相关检测来了解患者糖尿病胰岛素抵抗状态。胰岛素抵抗期间产生的糖基化产物会改变血小板膜的流动性。血小板膜蛋白糖基化程度与膜流动性下降呈负相关，这表明糖基化程度越高，膜的流动性越小，血小板的活化越容易。3.2血小板检测在免疫炎症反应中的应用一般情况下，血小板遇到一氧化氮或前列腺素等抑制剂时，其活性受到阻碍，身体外部循环显示静息状态。许多炎症疾病就会出现明显的血小板活性增加或是单核细胞聚集增多，如炎症性肠病患者中出现明显的血小板活化。Kullaya等[16]的研究将呼吸道合胞病毒与血小板和单核细胞在体外共培养，认为血小板可以内化病毒颗粒，并使得单核细胞的干扰素α的分泌产生强化刺激，从而减少了病毒对于单核细胞的感染。在感染、炎症、脓毒症邓冰中，血小板也通过多种机制发挥免疫防御作用，然而随着病毒感染加剧，就会出现明显血小板减少及出血倾向，因而近年来血小板数量够、血小板平均体积、血小板活化水平等的改变也明显对脓毒症患者预后产生明显的预测作用。还有研究认为脓毒症患者在基线未成熟血小板指数水平低时已经可以对持续血小板减少和更高的死亡率进行预示，从而帮助临床医师尽早采取相应的措施对患者进行救治，从而改善其最终预后结果。3.3血小板检测在心血管疾病中的应用心血管疾病的发生基础为冠状动脉粥样硬化，而粥样硬化的发生机制与动脉内皮、内膜损伤、炎症-纤维增生性反应密切相关。凝血瀑布反应的发生会导致动脉管腔狭窄加剧，从而导致血小板消耗，最后，血小板分布幅度增加，不仅血小板数量增加，其活性也增加。应激状态下，皮质醇和儿茶酚胺在血液中的释放增加，产生骨髓抑制，反向调节淋巴细胞增殖和分化，加重细胞凋亡。在严重炎症的状态下，低淋巴细胞增多症也可能发生。研究表明血小板几乎参与了动脉粥样硬化的整个过程，血小板被认为是不稳定斑块形成和急性冠状综合征发展的重要因素[17]。动脉粥样硬化性心血管疾病被朱春梅等[18]人认为与血小板体积有密切相关的作用，其通过对3081名18~80岁居民进行随访调查，研究患者动脉粥样硬化性心血管疾病被十年风险概率与血小板体积的作用，通过建立风险模型认为两者存在明显正相关，因而认为血小板体积的增加可明显提高患者动脉粥样硬化性心脏病的发生风险。此外，血流中各种细胞间的交联和粘附也参与了一系列血栓的形成和炎症的发展。循环血小板是中风发展所有阶段的一个非常重要的因素。3.4血小板检测在肿瘤转移中的应用肿瘤转移是恶性肿瘤患者发展至晚期的常见现象，也是加快患者死亡的重要原因，然而血小板在肿瘤转移过程中发挥重要作用，肿瘤为环境内，血小板可能受到刺激从而产生异常聚集现象，进而帮助肿瘤细胞产生免疫逃逸，使得肿瘤细胞转移的存活率明显提升。此外血小板还提供了肿瘤生长所需的活性因子，从而促进了肿瘤的转移。通过对肿瘤患者血小板功能进行检测，可以对其肿瘤转移活性进行了解，有利于临床医师对肿瘤转移情况进行预测，从而尽早采取相应干预措施并制定合适的诊疗计划。（这个应用是为了干什么）王禾等[19]的研究通过小规模试验表明非小细胞肺癌患者早期会呈现血小板聚集功能异常状态，而通过让患者服用阿司匹林，可对环氧化酶进行抑制，使得患者体内循环中血小板数量和活性得到明显减少，进而使得血小板与肿瘤细胞间的相互作用进行阻断，从而进一步降低肿瘤转移的发生。血液中循环肿瘤细胞是肿瘤血行转移的重要机制，其数量多少和预后也有明显关联，既往研究从模型小鼠的血小板膜表面表达凋亡诱导配体进行检测，认为丰富的血小板表达使得循环肿瘤细胞的血行加快，从而促进其在小鼠体内的转移，因而对于人体肿瘤转移的治疗，也可考虑通过对血小板聚集活性进行抑制的方式来降低肿瘤转移风险[20]。4重组人血小板生成素的应用及发展当前临床研究认为，重组人的血小板性素有利于增加中、重量骨髓，抑制患者血小板的数量，有助于恢复血小板。重组的血小板生成素是治疗血小板减少症的有效药，孙少勤等[21]的临床研究通过随机对比实验，观察了110例血液恶性肿瘤患者的化学治疗后血小板水平及炎症因子水平，认为重组人血小板生成素对于改善患者炎性水平，改善血小板计数均有良好效果，因而对其在血液肿瘤因化疗所致血小板减少症中有较为良好的作用，且不良反应少，安全性良好。此外重组人血小板生成素还可应用于脓毒症、心血管疾病等重要疾病，可通过对血小板减少症状进行有效抑制，从而使得血小板功能被调节，降低相关恶性事件，使得炎症及相应连锁反应能得到控制，进而使得患者预后得到好转，因而在当前临床使用中还有较为广泛的应用空间。重组人血小板生成素的药理作用目前还比较单一，主要在增加血小板生成方面，另有研究对于心脏以及血管也有一定的保护作用。近年来，随着血小板越来越多的关注，重组人凝血酶原酶的药理学效应研究不断增加[22]。目前，重组人凝血酶原酶的研究正在进行中，但其化学研究需要更深层次的进展。5小结血小板作为人体血液内细胞必不可少的构成部分，对于当前临床医师有较高的指导价值，本研究对血小板相关检测方式进行了阐述，认为当前主要从血小板聚集及活化功能两方面来实现对血小板的检测，主要检测方式包括比浊法和全血法，此外，糖尿病、免疫炎症反应、心血管疾病、恶性肿瘤转移等均可通过检测血小板对其疾病进展程度进行反映，从而帮助临床更好的治愈疾病。重组人类血小板生成素在当前作为增加血小板生成的重要药物，对于血液、免疫、神经等各个系统均起到一定保护作用，但还需要临床进一步研究对其进行观察探讨。

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