中职《细菌染色镜检》竞赛规程

2022年广西水产畜牧学校“细菌检查技术项目”赛项规程赛项名称赛项名称：细菌检查技术项目赛项组别：中职组二、竞赛目的通过竞赛活动，激发学生学习兴趣，提升学生技能水平和职业素养，促进教学改革。三、竞赛内容细菌检查技术，包括细菌涂片的制备、染色、镜检。竞赛方式竞赛方式为个人赛。每位选手通过现场抽签的方式决定比赛时段及项目顺序。竞赛流程日期时间内容5月18日15:00-15:30签到15:30-17:30按序号进行比赛5月19日8:30-9:00签到9:30-11:30按序号进行比赛竞赛规则参赛资格本校2021级中职畜禽生产一年级学生。参赛准则1.参赛选手必须穿大赛组委会统一提供的白大褂，并佩戴参赛序号牌（现场抽签决定），选手不得在参赛服饰上作任何标识，一经查实取消本次竞赛成绩。2.赛前1日，各领队组织选手参观熟悉竞赛场地和使用设备。大赛用物由畜牧兽医专业科提供，不得使用自带参赛物品。3.比赛当日选手必须按竞赛时间，提前30分钟到指定检录处进行检录，并在工作人员的引导下进入候赛室，迟到10分钟者取消参赛资格。选手凭学生证、身份证进入候赛室。工作人员负责对选手的身份进行核查。参赛选手不允许携带任何书籍和其他纸质资料，不允许携带通讯工具和存储设备。4.参赛选手在候赛室随机抽签决定比赛顺序后，由竞赛现场工作人员组织引导选手到指定的竞赛场地进行竞赛准备工作。5.参赛选手在规定时间内独自完成各竞赛环节。选手在竞赛过程中，无论遇到任何问题，需举手向裁判员示意。选手之间互相询问按作弊处理。竞赛过程中如出现仪器设备故障问题，应提请竞赛裁判长到赛场确认原因。如果确实是因为设备故障原因导致选手中断或终止竞赛，由竞赛裁判长视具体情况做出决定。6. 选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判员同意后作特殊处理。7. 在竞赛规定时间结束时各参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延竞赛时间。参赛选手欲提前结束比赛，应向现场裁判员举手示意并记录比赛终止时间，比赛终止后，不得再进行任何与比赛有关的操作。竞赛结束后，经裁判员许可后，参赛选手方可离开赛场。竞赛地点实训楼二号楼一楼实训室技术规范细菌检查技术操作规范细菌美蓝染色参赛选手在规定的30min内，对待测菌种（菌种范围：大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌）进行简单染色，要求各步骤正确，正确使用油镜观察染色结果并判断。具体操作规范详见下表：项目考核内容操作标准制片滴加无菌生理盐水涂片：取一洁净的载玻片，用75%酒精棉球擦拭载玻片表面，自然晾干。滴一小滴生理盐水于载玻片中央，按无菌操作要求(注：单手持无菌培养皿，打开皿盖约45°角，另一手持灭菌好的接种环，在酒精灯8-10cm范围内进行操作)，用接种环挑取少量细菌于玻片中央水滴中，均匀涂布，形成直径约为1-1.5cm的菌膜面，要求涂片薄而均匀。(注:涂片是否均匀将在镜检中进行判定)接种环的使用涂片、干燥接种环的使用:按无菌操作要求，正确对接种环进行灭菌，并取菌、制作涂片。干燥：为在规定时间内完成操作，可以利用酒精灯火焰温度干燥涂片，注意不能太靠近火焰（应在酒精灯火焰上方约10cm处），在固定之前要保证菌种细胞活性。固定固定：涂片干燥后，以钟摆速度将玻片（菌膜面朝上）通过酒精灯火焰2-3次，进行固定。美蓝染色染色步骤在已干燥、固定好的涂片或触片上滴加适量的美蓝染色液。1-2min后，水洗，干燥（吸水纸吸干或自然干燥），镜检。镜检显微镜的使用①载玻片安置：移开镜套。插上电源，打开显微镜，将载玻片放置于载物台上并用标本夹夹住。②调节光源：调节光源、光圈到适当的照明强度。③低倍镜观察：移动推进器使观察对象处于物镜的最下方，转动粗准焦螺旋，在视野中寻找物像，再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。④油镜观察：在低倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心，通过转换器将低倍镜转离工作位置，在待观察的目标区域滴上一滴香柏油，将油镜转到工作位置，油镜镜头此时应正好浸泡在镜油中，调节光圈使视野的亮度合适，微调细准焦螺旋使物象清晰。染色结果判断染色结果判定:在实验结果记录表上完成对染色细胞形状(球状或杆状)和颜色(紫色或红色)的描述。显微镜清洁和归位镜检完毕处理:①缓慢下降载物台至最低位置，调节光源到最暗，关闭电源开关。②取下载玻片。③清洁显微镜：先用擦镜纸擦去油镜镜头上的香柏油，再用沾有少许二甲苯的擦镜纸擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸抹去残留的二甲苯（注:需要按同一个方向擦洗镜头）。④清洁后，将物镜转成八字形，同时降下聚光镜，将推进器归位，拔下电源，罩上镜套。文明操作实验后台面整理操作结束，将载玻片放回指定回收处，用酒精灯盖子熄灭酒精灯（注:酒精灯应在制片结束后立即熄灭），清理桌面上的实验废弃物。在操作过程中，无不当操作。器皿破损实验操作过程规范选手编号：细菌美兰染色显微镜观察结果记录形态描述结果判断附：细菌检查技术竞赛项目评分细则细菌美蓝染色项目考核内容分值评分标准及要点制片清洁消毒玻片3取75%酒精棉球擦拭玻片，自然晾干。3分。滴加生理盐水4生理盐水滴加在玻片中间，2分。生理盐水无过多，无漏出。2分接种环的使用11接种环彻底灼烧，1分单手手持平皿，待接种环冷却后再取菌，1分在酒精灯无菌区域范围内操作，2分；按无菌操作要求单手打开培养皿，3分取单菌落时培养基无划破，2分涂片后灼烧接种环，放回原处，2分涂片、干燥4涂片区域均匀合理，2分干燥时，载玻片与火焰的距离适中，2分固定4在酒精灯外焰以钟摆速度通过3次，4分美兰染色染色干燥10无漏液，4分正确水洗，4分正确干燥，2分镜检显微镜的使用14正确放置载玻片,先使用低倍镜寻找视野，2分滴加镜油至镜检位置，并用油镜观察2分调亮视野至适合观察的亮度，4分油镜观察时，使用细准焦旋钮，2分物像清晰，4分染色结果判断30判断结果正确，20分，实验记录规范，2分涂片均匀，细胞无过密或过疏，4分无其它杂菌和杂质，2分视野亮适合观察，2分显微镜清洁和归位12镜检结束，正确步骤清洁油镜镜头，6分显微镜正确归位，4分操作结束，将载玻片放到统一回收处，2分文明操作实验室后台面整理8台面整理，正确清理实验废弃物，并注意环保(按照《实验室生物安全手册(第三版)》、《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2008)的规范要求处理实验废奔物)，2分器皿破损未破损，2分实验操作过程规范在操作过程中，无不当操作，4分完成时间共用时间竞赛时间结束时各参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延竞赛时间。合计100分各项操作应当规范、到位方可得分，凡操作错误一律不得分，如不熟练可酌情给分。技术平台项目操作配备设施、材料备注细菌检查技术项目待测菌种（大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌）、载玻片、无菌生理盐水、酒精灯、接种环、美兰染色液、显微镜、洗瓶、洗耳球、75%酒精棉、吸水纸、擦镜纸、染色架、二甲苯。成绩评定竞赛评分严格按照公平、公正、公开的原则，由裁判员在竞赛现场针对具体操作表现进行评判、打分、复核。各参赛选手成绩由高到低排列，比赛成绩相同时，比赛总用时少的名次在前；比赛成绩和比赛总用时相同，名次并列。赛项安全1.学校相关部门制定安保须知、安全隐患规避方法及突发事件预案，设立紧急疏散路线及通道等，确保比赛期间所有进入赛点车辆、人员需凭证入内；严禁携带易燃易爆等危险品及比赛严令禁止的物品进入场地；场地设备设施均可安全使用。2.参赛选手在参赛过程中，必须服从场内裁判及工作人员的指挥，严格按照制作规程进行操作，正确使用器具及设备。如出现意外，立即向工作人员汇报并配合妥善处理。3.裁判员在比赛前，强调安全规则。当现场出现突发事件时,应及时给予处理。申诉与仲裁本次技能比赛设仲裁工作委员会，赛点设仲裁工作组，组长由大赛组委会办公室指派，组员为赛项裁判长和赛点执委会主任。2.参赛选手对賽事过程、工作人员工作若有疑异，在事实清楚，证据充分的前提下可由以书面形式向赛点仲裁组提出申诉。报告应对申诉事件的现象、发生时间、涉及人员、申诉依据等进行充分、实事求是的叙述。非书面申诉不予受理。3.提出申诉应在赛项比赛结束后1小时内向赛点仲裁组提出。超过时效不予受理。提出申诉后申诉人及相关涉及人员不得离开赛点，否则视为自行放弃申诉。4.赛点仲裁工作组在接到申诉报告后的2小时内组织复议，并及时将复议结果以书面形式告知申诉方。5.大赛仲裁委员会的仲裁结果为最终结果。6.申诉方不得以任何理由拒绝接收仲裁结果；不得以任何理由采取过激行为扰乱赛场秩序；仲裁结果由申诉人签收，不能代收；如在约定时间和地点申诉人离开，视为撤诉。7.申诉方可随时提出放弃申诉。竞赛观摩1.观摩对象：本校在校生及全体教师。2.观摩方法及遵守的纪律：参加观摩的师生须遵守大赛纪律，按照大赛组委会的组织有序观摩。比赛期间，注意赛场安静。凡观摩人员均不得进入赛场内部进行拍照、交流、观看。竞赛视频本赛项将对比赛整体情况进行摄制，形成教学宣传片，反映本赛项整体情况和优势特色。竞赛须知参赛选手须知1.参赛选手须认真填写报名表内容，提供个人身份证明，弄虛作假者，将取消竞赛资格和竞赛成绩。2.参赛选手须提前30分钟到达检录处参加检录，迟到超过10分钟不得入场。参赛选手必须携带参赛证、身份证和学生证，务必按时到达指定竞赛报到处报到、抽签，并接受大赛工作人员检查，如不能按时参赛以自动弃权处理。3.参赛选手着装穿戴须按大赛组委会要求。选手比赛前抽取比赛顺序号，并对抽签结果签字确认。4.参赛选手不允许自带仪器设备，不允许携带任何书籍和纸质资料，不允许携带通讯工具和存储设备进入赛场；保持赛场安静，自觉维护赛场秩序，不大声喧哗，文明参赛。5.参赛选手应爱护竞赛场所的仪器设备，不得人为损坏竞赛用仪器设备，并自觉维护竞赛场所的环境卫生，操作仪器设备应谨慎，不得触动非竞赛用仪器设备。6.参赛选手在比赛过程中，应严格遵守赛场纪律。收到开赛信号前不得启动操作；在竞赛过程中不得擅自离开竞赛场地。在竞赛规定时间结束时各参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延竞赛时间。参赛选手欲提前结束比赛，应向现场裁判员举手示意并记录比赛终止时间，比赛终止后，不得再进行任何与比赛有关的操作。选手不得带走竞赛场地的任何物品，比赛结束后，经评委或工作人员许可方可