不同提取方法对杏香草成分的影响

不同提取方法对杏香草成分的影响

果实香味物质是一个全面的香气物质，可以激发和产生特定的味道。这是影响新鲜食品和加工质量的主要因素。20世纪60年代以来,随着气相色谱技术的发展,国内外在果树不同树种香气物质测定方面取得了很大进展。杏(ArmeniacaVulgarisLam.)原产中国,属蔷薇科(Rosaceae)、李亚科(Prunoideae)、杏属(ArmeniacaMill.),在中国栽培历史久远,种质资源极为丰富,但国内对杏果实香气成分的研究还未见报道。常规提取果树果实香气成分的方法是水蒸气蒸馏-萃取,也有文献报道用溶剂直接从果品中分离提取。本实验采用水蒸气蒸馏-萃取和溶剂萃取两种方法提取杏果实香气成分,采用气相色谱-质谱-计算机联用技术对杏果实香气成分进行了分离鉴定。结果表明:用蒸馏-萃取法提取的杏果实香气成分中鉴定出74个化学成分,用溶剂萃取法提取的杏果实香气成分中鉴定出32个化学成分。1实验部分1.1仪器和试剂Agilent6890N-5973N型气相色谱-质谱-计算机联用仪;KD浓缩器。二氯甲烷(AR),无水硫酸钠(AR)。1.2gc-ms质谱条件色谱条件:色谱柱,HP-5弹性石英毛细管柱25m×0.25mm,0.1μm;柱温采用程序升温,初温40℃,然后以2℃/min升至250℃,保持40min;进样口温度270℃;进样量0.2μL;载气He流量1mL/min;分流比100∶1。质谱条件:GC-MS接口温度280℃;EI离子源;离子源温度230℃;电子能量70eV;质量范围29~600amu。1.3萃取时间的确定水蒸气蒸馏萃取法:取杏果肉500g,加水200mL,匀浆后置于2000mL圆底烧瓶中,加入800mL蒸馏水,置套式恒温加热器中加热。水蒸气连续蒸馏3h,用60mL二氯甲烷收集馏出液,分别用60、40mL二氯甲烷萃取2次。无水硫酸钠干燥,KD浓缩器在51℃下浓缩至0.6mL,冷藏备用。溶剂萃取法:取杏果肉500g,加水200mL,匀浆后置于1000mL分液漏斗中,分别用150、100、40mL二氯甲烷萃取3次。无水硫酸钠干燥,KD浓缩器在51℃下浓缩至0.6mL,冷藏备用。2结果和讨论2.1萃取法提取化合物类型按上述分析条件对香气成分进行GC-MS分析,图1、图2是两种提取方法的总离子流图,将各色谱峰对应的质谱图进行人工解析及计算机检索(质谱数据库Nist/Wiley),确定其化学成分,用峰面积归一化法测定各成分的质量分数,结果见表1。由表1可以看出:水蒸气蒸馏-萃取法提取的化合物主要是C6醛类、C6醇类、内酯类、萜烯醇类、酮类。含量较多的化合物有:(E)-2-己烯-1-醇、2-乙基-1-己醇、苯乙醛、芳樟醇、2,6-二甲基-5,7-辛二烯-2-醇(罗勒烯醇)、α-萜品醇、橙花醇、香叶醇、γ-癸内酯、2,4-双(1,1-二甲基乙基)-苯酚、γ-十二内酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸双(2-乙基己基)酯等。溶剂萃取法提取的化合物主要是α-萜品醇、4-乙烯基-2-甲氧基-苯酚、丁基化羟基甲苯、2,4-双(1,1-二甲基乙基)-苯酚、邻苯二甲酸二丁酯、饱和烷烃类等。其中烷烃类化合物18种,占总鉴定化合物的56.25%,表明溶剂直接萃取法提取的主要是烷烃类化合物,而烷烃类化合物对杏香气的贡献率很小。水蒸气蒸馏-萃取法提取的杏果实香气成分74种,占总峰面积的73.604%;溶剂萃取法提取的杏果实香气成分是32种,占总峰面积的44.677%;两者相同的成分有21种,不同的成分有11种,而且在这11种不同的成分中烷烃类占8种。由此可见,水蒸气蒸馏-萃取法能较好的提取果实香气成分。2.2分离的化合物对玫瑰ue与国外欧洲杏香气成分研究相比较,本试验在中国杏中检测出的以下化合物还未见报道:糠醛、蒽、3,7-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-醇、2,6-二甲基-5,7-辛二烯-2-醇(罗勒烯醇)、苯酚、吡咯甲醛、邻苯二甲酸酐、酰胺类、对,对-二辛基二苯胺、烷烃类等化合物。其中罗勒烯醇(为顺式和反式异构体混合物)有清新的花香香气,并有柠檬香调和青香气息;3,7-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-醇具欧洲椴树的香气,在玫瑰香型葡萄品种中也发现有该物质。由此说明中国杏和欧洲杏香气成分有所不同。某种化合物对香气的贡献决定于其香气值Uo(odorunits),即该化合物的含量与其阈值的比值。某种化合物的香气值愈大,其对香气的贡献愈大。对香气贡献大的化合物被称为果实香气的特征化合物。国外研究表明:内酯类和萜烯醇类是杏香气的特征化合物。在本试验所鉴定的化合物中,萜烯醇类化合物占13种,含量较高(占总峰面积的24.997%),主要包括芳樟醇、橙花醇、香叶醇、α-萜品醇、2,6-二甲基-5,7-辛二烯-2-醇(罗勒烯醇)等。内酯类化合物有4种,占总峰面积的5.65%,主要是γ-癸内酯、γ-十二内酯。在这些特征化合物中,芳樟醇、香叶醇、γ-癸内酯和γ-十二内酯阈值较低,因而对香气的贡献最大,芳樟醇、香叶醇与果实的花香相关,而内酯类则与果香、背景香相关,水蒸气蒸馏-萃取法能有效提取果实中的挥发性成分,是一种经典而广泛的提取香气成分的方法。溶剂萃取法简便易行,但萃取的化合物种类较少,因此应用不如水蒸气蒸馏-萃取法普遍。本试验结果表明