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文档简介

2.工业发酵菌种的选育2.3.3菌种保藏方法斜面保藏法斜面保藏法03适用：细菌、放线菌、酵母菌02保存期：1~6个月01条件：4℃冰箱，相对湿度50%~70%04影响因素：培养基和培养条件05优点：简单、成本低，随时观察菌株性状06缺点：自发突变、染菌、菌种退化沙土管保藏法保存期：数年适用：产孢子或形成孢芽的微生物010203缺点：存活率低矿物油浸没保藏法123矿物油浸没保藏法原理为了防止菌种培养基失水，并隔绝氧气，以降低微生物的代谢作用，在无菌条件下向培养成熟的菌种斜面注入一层灭过菌的矿物油，油层高出斜面1cm，然后保存于冰箱中适用不能利用矿物油作为碳源的细菌、霉菌和酵母菌等微生物的保藏。保藏期1年左右悬液保藏法原理保藏时间适用010302悬液保藏法寡营养保藏，是将微生物混悬于不含养分的媒液中，如蒸馏水、生理盐水、0.25mol/L磷酸缓冲液(pH6.5)等，加以保藏的方法。1年左右大部分的放线菌、酵母菌、霉菌以及肠道科细菌等真空冷冻干燥保藏法处理安瓿管制备混悬液预冻保护剂冷冻干燥真空分口安瓿管的保藏保存期：4℃冰箱，保存5~10年适用：广泛缺点：繁琐，设备技术要求高低温保藏法1234请在此处添加关键字方法使用密封性能好的螺旋口小管，装入1～2mL的菌液，直接放人低温冰箱中保藏。一般以较高浓度的菌悬液进行保藏为宜，温度低时保藏效果好，如果低温冰箱发生温度变化，引起悬液融化就会影响保藏效果。优点在工业生产中，该法比真空冷冻干燥保藏法方便。适用大多数微生物可在-20℃以下的低温中保藏。保藏期约为1年，某些菌可长达10年。真空冷冻干燥保藏法分装入安瓿管封口预冻置液氮内保存期：-150℃~-169℃，保存15年适用：最为广泛优点：高效缺点：购置设备、费用高干燥-载体保藏法123干燥-载体保藏法适用适用于产孢子或芽孢的微生物保藏，一般细菌芽孢常用砂管保藏，霉菌的孢子多用麸皮管保藏。保藏期1~10年方法是将菌种接种于适当的载体上，如河砂、土壤、硅胶、滤纸及麸皮等，以保藏菌种。寄主保藏法、基因工程菌保藏法此方法适用于一些难以用常规方法保藏的动植物病原菌和病毒。寄主保藏法

取细菌培养物，加入灭菌甘油(甘油应在1.034×105Pa高压下蒸汽灭菌20min），振荡培养物使甘油分布均匀，然后转移至标记好的、带有螺口和空气密封圈的保存管内，在乙醇-干冰或液氮中冻结后转至-70℃长期保存。复苏菌种时，用灭菌的接种针刮拭冻

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