DB43-T+2175-2021辣椒远缘杂交胚拯救技术操作规程

ICS67.080.20CCSB31 43湖 南 省 地 方 标 准DB43/T2175—2021辣椒远缘杂交胚拯救技术操作规程TechnicalRegulationforembryorescueofDistantHybridinPepper20212021082920211029湖南省市场监督管理局发布目 次前言1围2语定义13剂设备1拯培基备 2拯技流程 2附录A（料）辣胚拯培基方3前 言GB/T1.1-20201请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖南农业农村厅提出。本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。本文件主要起草单位：湖南农业大学、湖南省蔬菜研究所。辣椒远缘杂交胚拯救技术规程本文件适用于辣椒远缘杂交胚拯救。下列术语和定义适用于本标准。2.1远缘杂交指不同种、属或亲缘关系更远的植物类型间进行的杂交。2.2胚拯救织培养技术，将合子胚转至适合的培养基中离体培养，使其能正常发育成完整植株的方式。3试剂和设备3.1试剂织培养技术，将合子胚转至适合的培养基中离体培养，使其能正常发育成完整植株的方式。3试剂和设备3.1试剂所有试剂等级均为分析纯，见表1。表1辣椒远缘杂交胚拯救技术所需试剂3.2仪器设备1H或H100、500mL（00µ、1mL10m～1℃试剂名称无机试剂次氯酸钠、氢氧化钠、盐酸、硝酸铵、硝酸钾、氯化钙、七水硫酸镁、磷酸二氢钾、碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、钼酸钠、氯化钴、硫酸亚铁、EDTA二钠盐、有机试剂酒精、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸、叶酸、生物素植物生长调节剂萘乙酸、激动素、赤霉素、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸其他琼脂粉、蔗糖培养基包括胚拯救培养基和幼胚分化成苗培养基，其配方见附录A。pH121℃，1.05kg/cm215min。授粉收集父本花粉，选取母本植株上将开未开的花苞，去除雄蕊，对其进行人工授粉，授粉24h后用75mg/L的2,4-D溶液涂抹母本植株上授粉花苞的花梗。（28±1）℃（20±1）16h/d2000lx。（28±1）℃（20±1）16h/d2000lx。2d～3d905d15d附录A（资料性）辣椒胚拯救培养基配方培养基名称配方成分胚拯救培养基825mg/L950mg/L220mg/L185mg/L85mg/Lmg/L6.2mg/L22.3mg/L8.6mg/Lmg/L0.025mg/L27.8mg/L37.8mg/LEDTAmg/L0.5mg/L0.5mg/L0.5mg/L盐酸硫胺素、2mg/L0.5mg/L0.05mg/L0.05mg/La0.25mg/L0.2mg/L赤霉素、6g/L琼脂粉、30g/L蔗糖幼胚分化成苗培养基1650mg/L1900mg/L440mg/L370mg/L170mg/L磷酸二氢钾、0.83m/Lg6.2mg/L22.3mg/L8.6mg/L水硫酸锌、0.25m/Lg0.025mg/L0.025mg/L27.8mg/L酸亚铁、37.3mg/LEDTA100mg/L0