JJF(京) 3024-2023 核酸定量荧光计校准规范

北 京 市 地 方 计 量 技 术 规 范JJF（京）3024-2023核酸定量荧光计校准规范CalibrationSpecificationforFluorescenceMetersofNucleicAcid2023-6-1发布 2023-7-1施北京市市场监督管理局 发布JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023JJF(京)3024-JJF(京)3024-2023CalibrationSpecificationforFluorescenceMetersofNucleicAcid归口单位：北京市市场监督管理局本规范委托北京市计量检测科学研究院负责解释本规范主要起草人：赵佳（京市量检科学究院）梁 亮北京计量测科研究）常栋天计量督检科学究院）刘彦河省计监督测研院）参加起草人：范培蕾（北京市计量检测科学研究院）李冉（北京市计量检测科学研究院）刘然（北京市计量检测科学研究院）尹金山（北京良山信诚科技有限公司）JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023II目 录引 言 （II）1范围 （1）2概述 （1）计量特性 （1）校准条件 （1）环境条件 （1）测量标准及其他设备 （1）校准项目和校准方法 （2）示值误差 （2）测量重复性 （2）校准结果表达 （2）复校时间间隔 （3）附录A校准记录格式（推荐） （4）附录B校准证书内页格式（推荐） （6）附录C示值误差的不确定度评定示例 （7）JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023IIII引 言JJF1071-2010JJF1001-2011《通用计量术语及定JJF1059.1-2012础性系列规范。JJF1836-2020JJF1828-2020《ATP本规范为首次发布。JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE1核酸定量荧光计校准规范范围DNA（10~100）ng/µL概述（以下简称荧光计的原理是荧光染料和核酸分子特异性结合后在特荧光计由光源、检测仓、控制面板以及数据采集信号处理系统组成计量特性仪器各项计量特性指标见表1。表1核酸定量荧光计计量特性指标计量项目计量特性示值误差不超过±20%测量重复性≤10%注：以上计量特性要求是基于双链DNA测量模式得到，仅供参考，不作为判定依据。校准条件环境条件4.1.1（15～30）℃。4.1.2（15～70）%。4.1.3供电电源：电压（220±22）V，频率（50±1）Hz。测量标准及其他设备DNA（10～100）ng/µL10%=2。（1～10）μL（20～200）μL，经计量检定合格。校准项目和校准方法示值误差DNA3（1）计算。XXX0100%X0式中：ΔX——示值误差，%；

（1）3，ng/μL；X0——标准物质的标准值，ng/μL。测量重复性1（10~100）ng/µLDNA10（2）计算测量重复性。RSD

(XiX) 1i1

（2）式中：

XRSD——相对标准偏差，%；10，ng/μL；Xi——单次测定值，ng/μL；n——测定次数；i——测定的序号，i=1～10。校准结果表达校准结果应在校准证书上反映。校准证书应至少包括以下信息：；JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE3复校时间间隔建议复校时间间隔一般不超过一年。复校时间间隔的长短是由仪器的使用情况、使用者、仪器本身质量等因素决定，送校单位也可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔。如果仪器经维修、更换重要部件或对仪器性能有怀疑时，应重新校准。附录A校准记录格式（推荐）记录编号:委托单位:仪器名称:型号:制造厂:出厂编号:环境温度：相对湿度：校准日期:校准依据：主要计量标准器名称测量范围不确定度/准确度等级/最大允许误差检定/校准证书编号溯源单位有效期至一、示值误差标准物质标准值（ng/µL）测量值（ng/µL）（ng/µL）示值误差（%）扩展不确定度（k=2）JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE5二、测量重复性标准物质标准值（ng/µL）测量值（ng/µL）平均值（ng/µL）（%）扩展不确定度（k=2）校准员： 核验员： 附录B校准证书内页格式（推荐）校准结果校准项目校准结果示值误差标准物质标准值（ng/µL）测量值（ng/µL）示值误差（%）扩展不确定度（k=2）测量重复性标准物质标准值（ng/µL）测量值（ng/µL）测量重复性（%）扩展不确定度（k=2）校准员： 核验员： JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE7附录C示值误差的不确定度评定示例概述测量方法ThermoFisherQubiit4（10～100）ng/µL3差。测量标准DNA（10～100）ng/µLrel≤10%=2。（1～10）μL（20～200）μL。测量模型示值相对误差的测量模型为：XXX0100%式中：

X0∆X——示值误差，%；

（C.1）¯3，ng/μL；X0——标准物质的标准值，ng/μL。cu Xc22 2212cu Xc22 2212u X0uX

（C.2）式中，灵敏度系数c

X

1，灵敏度系数c

XX。0 0 01 X X0不确定度来源分析

2 X X2示值误差校准结果的不确定度来源主要为：a）测量平均值引入的不确定度分量uXb）标准物质的标准值引入的不确定度分量u(X0)。各不确定度分量的评定测量平均值引入的不确定度分量uX（0~100ng/uL31.485.7ng/µLDNA10C.1。按照贝塞尔公式（C.3）计算标准偏差，计算得出的标准偏差即为单次测量值的不确定度，实3（C.4）计算，计算结果见表C.1。nn(XX)2ii1 n13uXs3

（C.3）（C.4）表C.1重复性引入不确定度数据标准值（ng/µL）测量值（ng/µL）s（ng/µL）uX（ng/µL）31.435.435.135.936.036.135.135.035.234.934.50.520.3185.781.482.481.882.382.181.481.781.882.282.30.370.22标准物质的标准值引入的不确定度分量uX0（C.5计算得到标准不确定度uX0，C.2。

u

U0X0Uk

（C.5）表C.2标准物质引入的不确定度标准值（ng/µL）rel=2)标准不确定度uX031.49.8%1.54ng/µL85.73.0%1.29ng/µL合成标准不确定度JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-202399C.3和。按照公式（C.2）C.3。表C.3合成标准不确定度标准值（ng/μL）测量值（ng/μL）平均值（ng/μL）c1uXc2u(X0)uX12331.435.435.135.935.50.0320.31-0.0361.545.7%85.781.482.481.881.90.0120.22-0.0111.291.5%扩展不