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文档简介

动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合单克隆抗体(常用技术手段)动物细胞工程其他动物细胞工程技术的基础动物细胞工程常用的技术手段生产考点二动物细胞培养与体细胞克隆一、动物细胞培养1、概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成

,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。单个细胞原理:细胞增殖(有丝分裂)目的:增加细胞数量幼龄动物的组织或器官:增大细胞与酶的接触面积。吸收营养,易于培养,排出代谢废物。细胞分裂能力强2、过程幼龄动物的组织或器官:细胞分裂能力强增大细胞与酶的接触面积。吸收营养,易于培养,排出代谢废物。现象一:细胞贴壁■培养瓶(皿)壁:表面光滑、无毒、易于贴附。现象二:接触抑制说明:传代培养的细胞,一般培养至

代就不容易传下去了。一般来说,细胞在传至

代左右时,增殖会逐渐减慢,部分细胞的细胞核型可能会发生变化。当继续传代培养时,少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限,获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正朝等同于癌细胞的方向发展。目前使用的或冷冻保存的正常细胞常在

代以内,以保持正常的二倍体核型。1010~5010核型:指染色体组在有丝分裂中期的表型,是染色体数目、大小、形态的总和。失去接触抑制动物组织单个细胞悬浮液剪碎胰蛋白酶加培养液母瓶原代培养传代培养分瓶总结归纳:动物细胞培养的过程胰蛋白酶思考题:1.动物细胞工程的基础是什么?2.动物细胞培养的基本原理是什么?3.进行动物细胞培养的材料一般有何特点?动物细胞培养技术离体的细胞在适宜的条件下可以增殖(细胞增殖)一般取胚胎组织或幼龄动物的组织做动物细胞培养。因为胚胎组织或幼龄动物的组织的细胞分化程度低,增殖能力强,更易于培养。4.哪些细胞会失去接触抑制?5.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件?癌细胞②营养:除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入

等一些天然成分。③适宜的温度:36.5℃±0.5℃;适宜的pH:7.2~7.4。抗生素(防止杂菌污染)培养液血清、血浆细胞代谢合成培养基7.动物细胞培养有何应用价值?①大规模生产生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等;②基因工程中的受体细胞;③用于检测有毒物质;④用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据6.动物细胞培养液的主要成分是什么?通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。细胞的全能性获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株、获得细胞产物等培养目的葡萄糖、血清、血浆蔗糖、植物激素培养基不同成分液体培养基固体培养基培养基状态细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较如图所示为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。据图分析:(1)原代培养和传代培养的分界点是图中哪个点?

B点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养。(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么?AB段发生了接触抑制;DE段细胞大部分衰老失去分裂能力。(3)E点后的细胞大多数具有异倍体核型,这样的细胞有什么特点?

E点后的细胞属于细胞系,能无限增殖。植物体细胞动物体细胞植物组织培养体外培养?核移植:克隆植株动物个体

1.概念:将动物的一个细胞的________,移入一个已经去掉细胞核的_________中,使其_______并发育成一个___________,这个新的胚胎最终发育成动物个体。核移植(难度高)受体细胞:MⅡ中期的卵母细胞二、动物体细胞核移植技术和克隆动物胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,恢复全能性相对容易用核移植的方法得到的动物称为克隆动物细胞核卵母细胞重组新的胚胎2、原理:动物细胞核的全能性3、类型:4、体细胞核移植的大致过程是:去核重组细胞大本P242供体卵细胞A母绵羊B母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫(代孕母体)胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育过程重组细胞二动物体细胞核移植技术

◆用的是去核的减数第二次分裂中期细胞(MⅡ中期)为什么?◆激活方法:◆激活目的:◆促融方法:电刺激◆胚胎移植至代孕受体内

妊娠、分娩供体:优质高产奶牛受体:普通奶牛(卵母细胞的采集与培养)

1.体积大,易操作。2.含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型◆取供体细胞传代培养10代以内的细胞.为什么?使核移植的胚胎或动物的细胞核内的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的细胞1.动物细胞核移植技术的原理是什么?2.体细胞核移植获得高产奶牛过程中,利用了哪些现代生物技术手段?2.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?

动物细胞培养技术、核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植技术

否。①受体卵母细胞提供了细胞质DNA(线粒体中DNA)。②核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境

不会完全相同。动物细胞核的全能性探究动物细胞培养与动物体细胞核移植的不同点细胞增殖动物细胞核全能性原代胰蛋白酶传代无核卵母细胞重组细胞早期胚胎细胞群克隆动物动物细胞培养体细胞核移植发育的全能性基因的选择性表达不存在免疫排斥加入分化诱导因子治疗性克隆克隆动物的胚胎常在母体怀孕期死亡。代孕母体子宫容易病变。出生的也有诸多致命毛病。克隆动物的常见病症表现为超重、呼吸系统疾病等异常表型、免疫缺陷、关节炎或肾、脑畸形等问题。核移植的问题多莉诞生经过:

(1)植物组织培养最终能产生新个体,体

现全能性,动物细胞培养不能产生新个体。

(2)植物组织培养得到的植株的性状与提

供外植体的植株完全相同,而动物细胞核移

植形成的个体与供体大部分性状相同。

(3)核移植技术产生新个体不属于有性生

殖,而属于无性繁殖。

动物细胞培养与核移植技术中易错分析:(2016·全国课标卷Ⅱ,40)下图表示通过核移植等技

术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。回答下列问题:(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染

色体的组成可为____________。过程①表示去除细

胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再

进行,去核时常采用_________________的方法。

②代表的过程是________。供体细胞核去核胚胎移植

XX或XY显微操作(去核法)胚胎移植(2)经过多次传代后,供体细胞中__________________

的稳定性会降低。因此,选材时必须关注传代次数。(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从

遗传物质的角度分析其原因是____________________________________________________

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