机能实验设计

机能学实验设计大纲实验名称：比较传统与新型降压药的即时降压效果课题来源：自选设计班级：09级临本设计人员：汪贵清设计日期:2011年10月11日指导老师：荣成张晓一. 实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路。目的与意义:学习高血压模型的制备，掌握血压的测定方法，比较以氢氯噻嗪（利尿药）阿替洛尔（6-受体阻滞药）为代表的传统降压药与以卡托普利（ACE抑制药）和氯沙坦（血管紧张素受体II拮抗药）为代表的新型降压药在短时间内的降压效果及各药物降压机制的探讨；熟悉大鼠血压的测定步骤，加深对高血压形成机制的思考，培养自主设计及严谨的科研精神。国内外研究现状：高血压病是指在静息状态下动脉收缩压和/或舒张压增高（＞=140/90mmHg）,常伴有脂肪和糖代谢紊乱以及心、脑、肾和视网膜等器官功能性或器质性的改变。分为原发和继发性高血压，发病近年来呈现上升趋势。其发病机理和治疗药物的研究一直受到国内外学者重视，就目前国际、国内的研究大致有如下几个趋势：1.缓释、控释技术尝试引入即为了尽快解决降压药物长期服用的特点，许多大的国际公司开始尝试将新的药物制剂技术引入该类药的使用，如阿斯特拉捷利康的血管选择性钙通道阻滞剂非洛地平（商品名波依定）制成缓释制剂，有效降低了每天的服药次数，自上市后迅速占领市场，并在国内市场迅速打开局面。德国拜耳公司生产的缓释硝苯地平（商品名拜新同）均在国际、国内市场占有一定份额。2.复方制剂前景广阔为了有效降低血压，临床上常联合应用几种降压药物治疗，其优点是药物的协同作用可提高疗效；几种药物共同发挥作用，可减少各药的单剂量，减少每种药物的副作用，或使一些副作用互相抵消，使血压下降较为平稳。目前除了传统的利尿药及6-受体阻滞药外，新型的CCB（钙拮抗药）、AEC抑制药以及血管紧张素II受体拮抗药等研制成功也迅速占领了广大市场，加之基因药物的研制，联合用药及遗传治疗的启动，高血压的治疗越来越有章可循，总之，新世纪的高血压治疗目标一明确，前景光明，但新旧观念转轨难，落实到行动不易。总的来说，前途光明，任重道远。存在的问题：有报道说长期降压6年后，停药仅6个月，血压基本上又升至原来水平，值得我等深思，现代治疗虽然较传统治疗有了很大的进步，可是其根本的和基本的缺陷并未触动。另外高血压的产生机制尚未研究清楚，加之单一药物和联合的的研究未彻底，且不同个体的不同药物需要都为降压药物的研究提出了更大的要求和挑战。解决问题的思路：利用动物无创血压测量仪、生物血压传感器及BL-410生物机能实验系统、血压计观察定期分别灌胃给予四种药物后血压的变化情况，记录实验结果并进行降压效果比较及降压机制的分析。参考文献：朱鼎量.遗传性高血压大鼠模型【J】.生理科学进展，1985,16（2）：105焦海霞，李凌，余绢，等.套尾法和颈动脉法测定急性应激大鼠血压变化值的比较【J】.福建医科大学学报，2006,40（4）:404-405王文,孙瑞成,张会东,王佩合,张宝杰，李悦，邓卿.保持自发性高血压大鼠的高血压特性一SHR大鼠受孕与产仔率及血压的实验观察，中国比较医学杂志,2004年14卷第03期陈治奎，胡申江，孙坚，夏强，沈岳良・黄芪对自发性高血压大鼠的降压作用.中药新药与临床药理,2003年14卷第06期王小燕,陈林莺，许昌声.Candesartan治疗对SHR大鼠心肌AntII及其受体表达的影响中国校医，2010年24卷第11期徐丹蕾，林杨闯.原发性高血压综合治疗与单纯药物治疗疗效比较[J].浙江医学，2005,27（9）:667.二、实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题，实验动物设计，实验专业设计，实验统计设计,实验方法设计，可行性分析，预期结果，实验设计工作时间安排）。（一） 实验设计目标，拟解决的关键问题设计目标：利用SHR大鼠进行药物实验，比较不同药物降压效果，比较新型与传统降压药降压效果拟解决的关键问题：血压测定的方案及时间、注射剂量、数据的采集（二） 实验设计1、 实验动物设计我们选用SHR作为实验动物，有以下几点理由：1） 、SHR是最接近人类原发性高血压的动物模型2） 、目前SHR已经发展到了30代以上，来源广泛2、 实验专业设计选用SHR作为实验动物，分别分期定时给予等剂量量氢氯噻嗪、阿替洛尔、卡托普利、氯沙坦注射，观察血压变化情况，并做好数据记录3、 实验统计设计（1） 随机：选正常健康体重相近（283±12）g，23周大小的SHR40只，雌雄各半，于温度（24±2）°C，湿度（50±10）%，大鼠自由进水进食。雌雄SHR随即分成四组，各组编号分别为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9、A10A组注射氢氯噻嗪B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、B10B组注射阿替洛尔C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10C组注射卡托普利D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8、D9、D10D组注射氯沙坦（2） 对照：本组实验做的是两两实验对照。（3） 重复：本实验采用的是每实验小组有10只大鼠，具有一定的重复性。（4） 统计数据分析：本实验搜集注射不同药物血压变化情况，初步确定对各组实验数据的比较分为注射药物前与注射药物后的血压变化值

a.实验技术路线:b,实验技术方法随机抽样：选正常健康23周大小体重相近的SHR40只，雌雄各半，于相同环境中饲养。雌雄SHR各随机分为4组，编鼠号，为A1-10,B1-10,C1-10,D1-10。然后随机雌雄搭配.A组.B组.C组，D组，并称重。实验分组：40只生长正常的SHR，四组处理方法不同，分别给以不同药物，实验比较性较强。处理措施：给药：按人/鼠公斤体重的等效剂量换算公式计算大鼠给药量，4组动物每天上午按计算剂量灌胃给药1次。测量血压：感应器放于大鼠尾部中部，将SHR大鼠放进鼠笼，按编号放入BP-6动物无创血压测量仪箱内预热5-10分钟，待电脑监视器上出现大鼠正常脉搏波形后，加压、放气，读取收缩压（SBP）.如此反复重复3次，读取最接近的3个值并取其平均值作为结果，自开始测量日起，每隔4日重复上述操作至实验结束。（三） 可行性分析1、 SHR是最接近人类原发性高血压的动物模型，在科研工作中被广泛利用，但价格稍贵需要在有条件的实验室进行。2、 实验步骤简单清晰，且对比性强，实验结果比较明显（四） 预期效果1、 各组药物都有明显的降压效果，且各组实验结果差异不大2、 传统药物和新型药物的降压效果都不能维持太久，降压的维持需要长期服药（五） 实验设计工作时间安排共计2D完成实验动物模型采购和器材准备取材每隔4天测量一次，共4次，合计16D完成实验数据的分析处理总共实验在18D完成。三、完成实验的条件1、仪器设备情况：BL-410生物机能实验系统（学校机能实验室提供）、BP-6动物无创血压测量仪和PT-100生物血压传感器（成都泰盟科技有限公司提供）、血压计（江苏鱼跃医疗有限公司提供）。2、 实验动物情况：实验动物为SHR（自发性高血压大鼠）40只，体重、年龄、健康状况相似（由北京维通利华公司提供）。3、 药品试剂来源：氢氯噻嗪（山东省莒南制药厂制1