野生二线小径胚胎发育的形态学观察

野生二线小径胚胎发育的形态学观察

饲养鱼属于第二科，也被称为三叶鱼。它与海奎有共生关系，因此也被称为海奎鱼。该鱼生活在海葵的触手之间,当要被其它鱼捕食时就躲入海葵中,而海葵也靠小丑鱼引诱海中的生物前来而得到食物。二线小丑体表为棕色,身上具有两条白带,白带边缘有黑边,幼鱼体色较黄。性成熟后雌鱼体形比雄鱼稍大。以藻类和浮游生物为食。体长6~10cm,最大可达13cm。目前海水观赏鱼的饲养正引起人们越来越多的关注,据不完全统计,海水观赏鱼占美国渔业贸易出口总额的20%,价值8.9亿美元。与淡水观赏鱼不同,海水观赏鱼几乎都是从天然海域中捕捞的,采捕时会对自然海域的生态环境造成破坏,对珊瑚和鱼类造成很大的伤害和不利影响。有人估计,采捕后的鱼能够作为商品鱼进入市场的不足20%。由于采捕对天然海域珊瑚礁生态环境的破坏以及对某些海水观赏鱼类的过度捕捞,迫使我们进行人工繁育。研究二线小丑胚胎及胚胎发育,掌握其发育特点及发育阶段生理生态条件,是指导人工育苗取得成功的关键。1材料和方法1.1小型鱼种设计种鱼2003年3月购于广州鱼店,为观赏目的而饲养于大连老虎滩海洋公园珊瑚馆1t水族箱中,内有人工造景、生物石、水草、香菇珊瑚、海葵,共饲养二线小丑8尾、红小丑6尾、兰雀鲷6尾、富翁4尾,计24尾小型鱼。种鱼培育水温(26±0.5)℃,pH8.0~8.2,溶解氧4.5~5.3mg/L,氨氮<0.1mg/L,盐度30~31,日换水量为总水体的20%。250W金卤灯两盏,日照明时间为10h,每日投饵3次,上午为8:00和10:00。8:00投喂小颗粒的薄片、虾干,10:00补充虾肉和鱼肉,下午投喂少量卤虫无节幼体。1.2成虫的排精与产卵产卵的前一天或当天,雌鱼雄鱼不断地用嘴啄除生物石上的藻类及脏物。14:00开始产卵,产卵时雌鱼的输卵管明显伸长,雄鱼的输精管也伸长,雌鱼身体抖动,依次将卵粒排在生物石上,雄鱼以相同的动作排精,鱼卵排列紧密,在生物石上形成大约4cm×6cm的卵块,产卵一般40min结束,之后可以看到亲鱼用嘴啄鱼卵(清除坏卵),雄鱼不离开鱼卵,用胸鳍鼓动水流,使卵摇动。有时雌雄鱼会共同护卵,使其它鱼不敢靠近,只有在喂饵时离开,但立即返回,这种护卵行为直至孵化。1.3摄食后的鱼类状态将刚孵化鱼苗饲养在0.01t的小玻璃缸中,然后放在温度恒定的大水体表层上,微量充气,饲养用水来源于亲鱼水族箱中并用500目筛绢过滤,孵化后的当日,投喂经小球藻强化的海水轮虫,保持10个/ml的浓度,摄食后的鱼苗可观察到腹部变黑。第2d状态不佳或受伤畸形的鱼苗夭折,将死亡的鱼苗吸出。第3d换水1/3,几乎无死亡,第4d增加少量以小球藻强化的卤虫无节幼体,以后每日渐增。每日投饵2次,8:00,16:00。发育良好的鱼苗第9d、一般在第10~11d时出现第一条白带,体长为5.8~6.1mm。1~3d后其余两条白带也相继出现。孵化后的15~30d全部投喂卤虫无节幼体,30d后投喂人工饵料薄片和鲜虾肉等,此时可将幼鱼转移到大的水族箱中饲养。2结果2.1产卵板上植物的分离分离受精卵长径2.14mm,短径0.9mm,椭圆形,桔黄色,显微镜下可观察到卵黄内有1个大油球,若干个小油球,卵为端黄卵,胚胎(盘)形成于动物极,在靠近动物极的一端有丝状物可粘附在产卵板上,植物极的一端游离于水中。受精后2h胚胎(盘)第一次纵裂,等分成大小相等的2细胞。3h后进行第三次纵裂,形成8细胞。5h后仍为纵裂,进入32细胞期,10h后进入桑椹期,15h出现囊胚,20h原肠胚形成,42h出现眼点、体节,心跳52~54次/min,细胞内出现透明液体,分节数为23~25。约96h卵黄大部分被吸收,胚体腹面可见血液流动的情况,120h可见胸鳍雏形。160h鱼卵内的眼睛部分会闪闪发亮,170~180h正常孵化。2.2化管散布的营养期刚孵出的仔鱼全长4.2~4.8mm,口已张开,头部体侧及消化管散布有树枝状的黑色素细胞,肛门在全身的中央位,尾鳍的根基已出现,有强趋光性。仔鱼无内源营养期,直接进入混合营养期。3~4d后卵黄囊完全消失进入稚鱼期,9~10d后进入幼鱼期。3产卵及人工饲料的使用、人工培养等都有一定的时间和空间二线小丑作为热带珊瑚礁海域的一种小型鱼类,是国内水族馆的重要展示品种之一。日本、西欧部份水族馆已繁殖成功,目前在国内水族馆尚无先例,本馆已成功地进行人工繁殖,但要达到一定规模的工厂化育苗尚有距离,且人工育苗的成活率远远低于其它海水经济鱼类,只达到约30%。关于二线小丑的个体发育、生物群落及种群的研究,国外已有报道。该报道认为自然海域的小丑鱼群落中存在着一定的等级差别,有明显的种内、种间的竞争。只有最大的个体才可获得产卵、繁殖的权力。同种间的二线小丑只有一对可达到性成熟并产卵,其它同类永远无法达到性成熟,只有当这一对鱼中的一条或两条消失,其它的鱼才有可能补充进来,但数量只限制在一对鱼上。不同种小丑鱼中由于二线小丑的个体较其它同属的小丑鱼稍大一些,因此只有它们可以产卵繁殖,其它种类的小丑鱼即使已达到性成熟并配对也不能产卵,只有当这一区域产卵的那一对小丑鱼离开后方可产卵。而本馆中人工条件下饲养的小丑鱼不存上述情况,二线小丑和红小丑可同时产卵。已配对的小丑鱼均有自己的领地,不允许其它鱼类进入。在二线小丑个体发育中还存在性逆转的现象,雄鱼可以转化为雌鱼,但是雌鱼不发生性转变。二线小丑在繁殖期时有护卵习性,所产鱼卵只有在亲鱼的看护下胚胎才能正常发育,破膜形成仔鱼。这给日常管理带来很大难度,如何用人工的方法模仿亲鱼的护卵行为及对刚孵化的鱼苗进行收集是今后研究的一个重点。二线小丑鱼的第一批卵,在第8d晚上全部出苗,当时没有收集到。所以第二、三批卵采取在第7d傍晚将有卵的生物石取出,放入原缸的网箱中充气培养,结果卵全部变白死亡。经分析推断局部耗氧过大导致缺氧所至。二线小丑鱼的胚胎发育为7~8d,属于时间较长的种类。因此在此期间对环境因子的控制并使其处于一个相对稳定的范围内就显得尤为重要,影响胚胎发育的环境因子主要有温度、盐度、pH、氨氮、亚硝酸盐。日常换水时的温差对胚胎发育有很大影响,可导致鱼苗无法破膜而全部死亡。二线小丑第6、7批卵就是这种状况。二线小丑鱼胚后发育中无内源营养期,直接进入混合营养期,即孵化后1h就开口摄食,因此开口饵料非常重要。二线小丑鱼