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文档简介

动物细胞培养和核移植技术如何获取大量的皮肤细胞?皮肤移植动物细胞培养和核移植技术一、动物细胞培养第44页概念

从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。原理:细胞增殖动物细胞培养1、动物细胞的培养过程

幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞用胰蛋白酶分散成单个细胞,说明细胞间的物质是什么?用胃蛋白酶行吗?为何选幼龄动物组织或器官进行细胞培养?动物细胞培养过程:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。(分解纤维蛋白)动物细胞培养过程:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。(分解纤维蛋白)

细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。

细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。

细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。无菌操作培养箱培养器皿动物细胞培养瓶内表面为什么要光滑、无毒?2、动物细胞培养的条件1)、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2)、营养(葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。)3)、温度和PH

36.5+0.5度;PH为7.2-7.4。4)、气体环境:

O2和CO2(95%空气和5%CO2

)补充合成培养基中缺乏的物质(1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。(3)用于检测有毒物质(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据3、动物细胞培养的应用细胞的全能性细胞株、细胞系植物体或组织培养结果获得细胞或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目试一试

动物细胞特点?分化潜能变窄:随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄,这是指整体细胞而言。细胞核仍具有全能性:细胞核,它含有保持物种遗传性所需的全套基因,而且并没有因细胞分化而丢失基因,因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性想一想

根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达?

再想一想利用动物体细胞核移植技术动物核移植:

将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。

用核移植的方法得到的动物。克隆动物:记一记二、、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、体细胞核移植的过程多莉——细胞工程的一个里程碑!卵细胞母羊B母羊A乳腺细胞胚胎移植细胞核移植细胞质融合后的卵细胞细胞核母羊C子宫早期胚胎多莉羊分娩卵裂妊娠多莉羊的培育过程问题1、多莉羊是雄还是雌?2、为什么要使用卵细胞?3、克隆羊多莉的成功证明了什么?卵细胞A母绵羊B母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育过程融合后的卵细胞供体细胞(供核)细胞培养体细胞卵巢卵母细胞(MⅡ中期:供质)去核无核卵母细胞注入细胞融合重组细胞构建重组胚胎胚胎移植代孕母体生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛归纳:1.共分成两大阶段:核移植和胚胎移植2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状同时其可为细胞核的全能性表达提供物质基础3.严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状核移植过程2.体细胞核移植技术的应用前景克隆动物的研究意义1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白2.改良动物品种

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