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文档简介
o.1什么是微生物?习惯上它包含哪几大类群?之欧侯瑞魂创作创作时间:贰零贰壹年柒月贰叁拾日微生物:一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。类群:①非细胞型。小、无典型细胞构造,包含病毒亚病毒②原核细胞型。无成形细胞核及完整的细胞器,包含三菌三体③真核细胞型。有完整的细胞构造,细胞核分化程度高,细胞器完善,包含酵母菌、霉菌、蕈菌等。0.2微生物发展史如何分期?各期的时间、实质、创始人和特点是什么?我国人民在微生物发展史上占有什么地位?有什么值得反思?分期:史前期、初创期、奠基期、发展期、成熟期奠基期?1.1试对细菌细胞的普通构造和特殊构造设计一简表解。普通构造细胞壁细胞膜间体核糖体细胞质内含物储藏物核区特殊构造糖被荚膜微荚膜黏液层凝胶团鞭毛、菌毛、性菌毛芽孢+细菌和G—细菌细胞壁的重要构造,并简要阐明其异同成分占细胞壁干重的%革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细菌肽聚糖含量很高(50~90)含量很低(~10)磷壁酸含量较高(<50)无类脂质普通无(<2)含量较高(~20)蛋白质无含量较高G+细菌和G-细菌都含有肽聚糖和磷壁酸,区别在于含量的分歧。1.3试图示肽聚糖单体的模式构造,并指出G+细菌和G-细菌在肽聚糖的成分和构造上的不同。G+细菌肽聚糖单体构造与G-细菌基底细同,不同仅在于:①四肽尾的第三个氨基酸分子不是L-Lys,而是被一种只存在于原核生物细胞壁上的特殊氨基酸—内消旋二氨基庚二酸(m-DAF)所替代;②没有特殊的肽桥,故前后两单体间的连接仅通过甲四肽尾的第四个氨基酸(D-Ala)的羧基与乙四肽尾的第三个氨基酸(m-DAP)的氨基直接相连,因而只形成较稀疏、机械强度较差的肽聚糖网套。-细菌细胞壁外膜和细胞壁(内膜)上各有那些蛋白?其功效如何?外膜:?细胞膜:?1.5试列表比较真细菌与古生菌在细胞膜构造上的分歧点.古生菌细胞膜真细菌细胞膜亲水头(甘油)与疏水尾(烃链)间醚键连接酯链连接疏水尾的长链烃是异戊二烯的重复单位疏水尾是脂肪酸单分子层膜或单双分子层混合膜(单分子层比双分子层机械强度高)双分子层膜甘油3C分子上连接磷酸酯基、硫酸酯基、多个糖基细胞膜上含有多个独特酯类,如视黄醛,可与蛋白质结合成视紫红质1.6试简述革兰氏染色的机制。通过结晶紫液初染和碘液媒染后,在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+细菌由于其细胞壁较厚,肽聚糖网条理多和交联致密,故遇脱色剂乙醇(或丙酮)解决时因失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的解决不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其坚持紫色。反之,G-细菌因其细胞壁薄,外膜层类脂含量高,肽聚糖层薄和交联度差,遇脱色乙醇后,以类脂为主的外膜快速溶解,这时薄而松的肽聚糖网不克不及制止结晶紫与碘复合物的溶出,因此细胞退成无色。这时再经沙黄等红色染料复染,就使G-细菌呈现红色,而G+细菌则保存最初的紫色(实为紫加红色)了。【涂片固定→初染→结晶紫→媒染→碘液→脱色→95%酒精→稀释复染→复红】1.7什么是缺壁细胞?试列表比较四类缺壁细胞细菌的形成、特点和实践意义。缺壁细胞:(见前文名词解释6)类型形成特点实际应用L型细菌在实验或宿主体内通过自发突变形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。没有完整而坚韧的细胞壁,细胞成多形态;大多数染成革兰氏阴性;营养规定高,高渗环境,生长较缓慢,普通培养2~7天可形成中心较厚四周较薄的“油煎蛋”似的小菌落。可能针对细胞壁的抗菌治疗有关原生质体在人为条件下,用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素克制新生细胞壁的合成,所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗入敏感细胞。G+细菌最易形成原生质体,这种原生质体除对对应的噬菌体缺少敏感性(若在形成原生质体前已感染噬菌体的细胞仍可正常复制)、不克不及进行正常的鞭毛运动和细胞不克不及分裂外,仍保存着正常细胞所含有的其它正常功效。分歧菌种或菌株的原生质体间易发生细胞融合,可用于杂交育种;另外原生质体比正常细菌更易导入外源遗传物质,故有助于遗传学基来源根基理的研究。球状体又称原生质球,指还残留了部分细胞壁(特别是G—细菌外膜层)的圆球形原生质体。枝原体在长久进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。细胞膜中含有普通原核生物没有的zhai醇,故即使缺少细胞壁,其细胞膜仍有较强的机械强度-细菌的鞭毛和螺旋体的周质鞭毛在构造、着生方式和运动特点等方面作一比较。构造着生方式运动特点G-细菌的鞭毛螺旋体的周质鞭毛1.9试用表解法对细菌芽孢的构造及各部分成分作一介绍。什么是菌落?试讨论微生物的细胞形态与菌落形态间的有关性及其内在因素。菌落:是指将单一微生物或一小堆同种细胞接种在固体培养基上,在适宜的培养条件下,形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团。菌落形态包含菌落的大小、形态、边沿、隆起、光泽、质地、颜色和透明度等。每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特性。分歧种或同种在分歧的培养条件下,菌落特性是分歧的。这些特性对菌种识别、鉴定有一定意义,细胞形态是菌落形态的基础,菌落形态是细胞形态在群体聚集时的反映。细菌是原核微生物,故形成的菌落也小;细菌个体之间充满水分,因此整个菌落显得湿润,易被接种环挑起;球菌形成隆起的菌落;有鞭毛的细菌常形成边沿不规则的菌落;含有荚膜的菌落概况较透明,边沿光滑整洁;有芽孢的菌落概况干燥皱褶,有些能发生色素的菌落还显出鲜艳的颜色。试以链霉菌为例,描述这一类典型放线菌的菌丝、孢子和菌落的普通特性。放线菌是一类呈菌丝状生长、重要以孢子繁殖和陆生性强的原核生物。链霉菌的细胞呈丝状分支,菌丝直径很细,与细菌相似。在营养生长阶段,菌丝无内隔,内含许多核质体,故普通呈多核的单细胞状态。基内菌丝体(营养菌丝“根”,吸取水、营养和代谢废物)气生菌丝生长致密,覆盖整个菌落概况,菌丝呈放射状。2.1试对酵母菌的繁殖方式作一表解。2.2试图示酿酒酵母的生活史,并对其中各重要过程作一简述。子囊孢子在适宜的条件下发芽发生的单倍体营养细胞(2)单倍体营养细胞不竭地进行出芽繁殖(3)两个性别分歧的营养细胞彼此接合,在质配后即发生核配,形成二倍体营养细胞(4)二倍体营养细胞不进行核分裂,而是不竭进行出芽繁殖(5)在以醋酸盐为唯一或重要碳源,同时又缺少氮源等特定条件下(6)子囊经自然或人为破壁后,可释放出其中的子囊孢子2.3试以表解法介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化构造,并简要阐明它们的功效。2.4试列表比较四大类微生物的细胞形态和菌落特性。菌落特性微生物类别单细胞微生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌重要特性菌落含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观状态小而凸起或大而平坦大而凸起小而紧密大而疏松或大而致密细胞互有关系单个分散或有一定的排列方式单个分散或假丝状丝状交错丝状交错形态特性小而均匀个别有芽孢大而分化细而均匀粗而分化参考特性菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落与培养基结合程度不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样单调,普通呈乳脂或矿浊色,少数红色或黑色十分多样十分多样菌落正背面颜色的不同相似相似普通分歧普通分歧菌落边沿普通看不到细胞可见球状,卵圆状或假丝状细胞有时可见细丝状体细胞可见粗丝状细胞细胞生长速度普通很快较快慢普通较快气味普通有臭味多带酒香味带有泥腥味往往有霉味试列表比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同,并提出制备对应原生质体的酶或试剂。细菌细胞壁重要成分为肽聚糖,含有固定细胞外形和呵护细胞不受损伤功效细菌原生质体制备,溶菌酶,自溶酶酵母菌细胞壁重要成分甘露聚糖(外层)蛋白质(中层),葡聚糖(内层)类脂,几丁质酵母菌原生质体的制备:EDTA-a—硫基乙醇,蜗牛消化酶放线菌和霉菌的细胞壁重要成分微纤维,纤维素,几丁质无定形基质成分:葡聚糖,蛋白质,脱乙酰几丁质,甘露聚糖,少量脂类无机盐等3.1试图示并介绍病毒的典型构造。病毒粒有时也称病毒颗粒或病毒粒子,专指成熟的构造完整的和有感染性的单个病毒。核酸位于它的中心,称为核心和基因组,蛋白质包抄在核心周边,形成了衣壳。衣壳是病毒类的重要支架和抗原成分,有呵护核酸等作用,衣壳是由许多在电镜下可分辨的形态学亚单位——衣壳粒所构成,核心和衣壳合称核心壳。3.2病毒粒有哪几个对称体系?多个对称体系又有几个特殊外形?试各举一例。3.3病毒的核酸有哪些类型?试举例并列表比较之。其中有哪几个类型现在尚未找到代表性病毒?此后前景如何?P71核酸类型病毒代表动物病毒植物病毒微生物病毒DNAssDNA线状细小病毒H-1玉米条纹病毒等核盘菌5Shadv-1病毒环状待发现待发现噬菌体dsDNA线状单纯疱疹病毒和腺病毒待发现λ噬菌体环状猿猴病毒40(SV40,5243bp)等花椰菜花叶病毒铜绿假单细胞菌的PM2噬菌体等RNAssRNA线状脊髓灰质炎病毒,艾滋病毒豇豆花叶病毒和TMV等RNA噬菌体dsRNA线状弧长谷病毒和昆虫质型多角体病毒等玉米矮缩病毒和植物伤流病毒等多个真菌病毒3.4什么是烈性噬菌体?试简述其裂解性增值周期。定义:在短时间内能持续完毕上述5个阶段(即吸附、侵入、增值、成熟、和裂解)而实现其繁殖的噬菌体。周期①吸附:尾丝与特异性受体接触后,吸附在受体上,通过刺突、基板固定于细胞概况②侵入:尾管所携带的溶菌酶把细胞壁上的肽聚糖水解,将核酸注入宿主细胞内③增值:包含核酸的复制和蛋白质的合成④成熟:把合成好的“部件”进行自我装配⑤裂解:在脂肪酶和溶菌酶的作用下,促使细胞裂解。3.5什么是效价,测定噬菌体效价的办法有几个?最经常使用的是什么办法,其优点如何?定义:每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子数,即噬菌斑形成单位数或感染中心数。办法:液体稀释法、玻片快速测定法、单层平板法、双层平板法。较经常使用的是双层平板法。优点:加了底层培养基后,可弥补培养皿底部不服的缺点,可使全部的噬菌斑都位于同一平面上,因而大小一致,边沿清晰且无重叠现象,又因上层培养基中琼脂较稀,故可形成形态较大、特性较明显以及便于观察和计数的噬菌斑。3.6何为一步生长曲线?它分几期,各期有何特点?定义:定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。分期①潜伏期:侵入到第一种噬菌体释放。分为隐蔽期和胞内积累期。②裂解期:细胞裂解,噬菌体急剧增加。③平稳期:溶液中噬菌体效价达成最高点。4.1什么是自养微生物?它有几个类型?试举例阐明。定义:凡以无机碳源作为唯一或重要碳源的微生物。类型:分为光能自养微生物和化能自养微生物两种。光能:蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌、藻类化能:硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌4.2什么是水活度?它对微生物的生命活动有何影响?对人类的生产和生活实践有何关系?定义:是一种比渗入压更有生理意义的物理化学指标,它暗示在天然或人为的环境中,微生物可实际运用的自由水或游离水的含量。影响:生长繁殖在水活度高的微生物代谢旺盛,在水活度低的范畴内生长的微生物抗逆性强,理解各类微生物生长的水活度,不仅有助于设计培养基,并且还能对避免食物霉腐含有指导意义。4.3试述通过基因转移运输营养物质的机制。4.4何谓碳氮比?分歧的微生物为什么有分歧的碳氮比规定?试举例阐明之。定义:指在某一培养基配方中,碳源与氮源含量的比例。严格的讲,应指在培养基所含有碳源中的碳原子摩尔数与氮源中氮原子摩尔数之比。在分歧种类的碳源和氮源分子中,其实际含碳量和含氮量不同很大,普通来讲,真菌需碳氮比较高,细菌,特别是动物病原菌需碳氮比较低的培养基。4.5设计培养基的4个原则、4个办法是什么?你能提出一种更加好的原则和办法吗?名称要点原则1、目的明确培养何菌,作研究或生产,生产菌体或代谢产品,生产主流代谢产品或次生代谢产品,代谢产品的C/N比2、营养协调各营养物性质适宜,各营养物质含量比例恰当,C/N比适中3、理化适宜pH适宜,渗入压、水活度、氧化-还原势适宜4、经济节省以粗代精,以简代繁,以廉代贵等办法1、生态模拟先测验考试用天然基质做一初级培养基,再不竭改善提高2、参阅文献大量收集文献,参考其中细菌和内容相近的培养基3、精心设计运用数学等工具提高工作效率4、实验比较先做定性实验再做定量实验,先坐小实验再坐中实验室规模再扩大到工厂化生产。4.6什么是选择性培养基?试举一实例并分析其中为什么有选择性功效。定义:根据分歧的微生物对营养的特殊规定,或对物理化学条件的抗性而设计的培养基,运用这一类培养基能够把需要微生物从混杂的其它微生物分离和拟定。4.7什么是鉴别性培养基?试以EMB为例分析其含有鉴别性功效的因素。定义:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产品发生显色反映的批示剂,从而达成只须用肉眼分辨颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可克制G+细菌和某些难培养的G-细菌。在低酸度时,这二种染料结合形成沉淀,起着产酸批示剂的作用。多个肠道菌会在EMB培养基上发生互相易分辨的特性菌落,因而易于识别。特别是E.Coli,其强烈分解乳糖而发生大量的混合酸,菌体呈酸性,菌落被染成深紫色,从菌落概况的反射光中还可看到绿色金属闪光。5-1.在化能异养微生物的生物氧化过程中,其基质的脱氢的途径重要有几条?试列表比较各途径的重要特点。四条比较项目特点EMP途径醛缩酶为核心酶,厌氧条件下进行,产能效率低HMP途径葡萄糖可直接完全氧化,转醛酶和转酮酶为核心,只产NADPH2,可在有氧条件下进行TCA循环产能还原力效率高,有氧条件下进行,是分解代谢和合成代谢的枢纽ED途径KDPG醛缩酶是核心酶,产能率低,厌氧条件下进行5-重要性:①供应ATP形式的能量和NADPH2形式的还原力②是连接其它几个重要代谢途径的桥梁,包含三羧酸循环(TCA),HMP途径和ED途径等③为生物合成提供多个中间代谢物④通过逆向反映进行多糖合成关系,EMP途径与乙醇、乳酸、甘油、丙酮和丁醇等的发酵生产关系亲密。5-3.试述HMP途径在微生物生命活动中的重要性,并说出它与人类生产时间的关系重要性:①供应合成原料,供应合成核酸、核苷酸、某些辅基、芳香族及杂环组氨基酸的原料②HMP发生大量的NADPH2,为细胞的多个物质合成反映提供重要的还原力(重要目的不是供能),合成脂肪酸、固醇、四氢叶酸等③是光能自养型和化能自养型微生物固定二氧化碳的中介④扩大碳源运用范畴(为微生物运用三碳糖、七碳糖提供需要的代谢途径)⑤通过与EMP途径的连接(在1,6-二磷酸果糖和3-磷酸甘油醛处)可为微生物提供更多的戊糖5-4.试述ED途径在微生物生命活动中的功效,并说出它与人类生产实践的关系功效:替代EMP途径,可与EMP、HMP和TCA连接,可进行细菌酒精发酵以发生酒精关系:用ED途径发酵生产乙醇,代谢速率高,产品转化率高,菌体生成少,代谢副产品少,发酵温度较高,不必定时供氧5-同时发生两类还原力,为糖、脂、蛋白质三大物质转化中心枢纽,循环中的某些中间产品是某些重要物质生物合成的前体,可为微生物的生物合成提供多个碳架原料,与人类的发酵生产【如柠檬酸、苹果酸、谷氨酸、延胡索酸和琥珀酸等】紧密有关5-6.构成呼吸链(电子传递链)的载体有哪些?他们分别如何执行其生理功效1.NADH:辅酶Q氧化还原酶复合体,由NADH脱氢酶(一种以FMN为辅基的黄素蛋白)和一系列铁硫蛋白(铁—硫中心)构成。它从NADH得到两个电子,经铁硫蛋白传递给辅酶Q。铁硫蛋白含有非血红素铁和酸不稳定硫,其铁与肽类半胱氨酸的硫原子配位结合。铁的价态变更使电子从FMNH2转移到辅酶Q。
2.琥珀酸脱氢酶(一种以FAD为辅基的黄素蛋白)和一种铁硫蛋白构成,将从琥珀酸得到的电子传递给辅酶Q。
3.辅酶Q是呼吸链中唯一的非蛋白氧化还原载体,可在膜中快速移动。它在电子传递链中处在中心地位,可接受多个黄素酶类脱下的氢。
复合体Ⅲ辅酶Q:细胞色素C氧化还原酶复合体,是细胞色素和铁硫蛋白的复合体,把来自辅酶Q的电子,依次传递给结合在线粒体内膜外概况的细胞色素C。
细胞色素类都以血红素为辅基,红色或褐色。将电子从辅酶Q传递到氧。根据吸取光谱,可分为三类:a,b,c。呼吸链中最少有5种:b、c1、c、a、a3(按电子传递次序)。细胞色素aa3以复合物形式存在,又称细胞色素氧化酶,是最后一种载体,将电子直接传递给氧。从a传递到a3的是两个铜原子,有价态变更。
复合体IV:细胞色素C氧化酶复合体。将电子传递给氧。5-7.试列表比较呼吸、无氧呼吸和发酵的特点比较项目呼吸无氧呼吸发酵递氢体呼吸链(电子传递链)呼吸链(电子传递链)无氢受体O2无机或有机氧化物(NO3-、SO42-、延胡索酸等)中间代谢物(乙醛、丙酮酸等)终产品H2O还原后的无机或有机氧化物(NO2-,SO32-或琥珀酸等)还原后的中间代谢物(乙醇,乳酸等)产能机制氧化磷酸化氧化磷酸化底物水平磷酸化产能效率高中低5-8.试列表比较由EMP途径中的丙酮酸出发的6条发酵途径,产品和代表菌名称发酵产品代表菌同型酒精发酵乙醇酿酒酵母等同型乳酸发酵乳酸德氏乳杆菌丙酸发酵丙酸谢氏丙酸杆菌混合酸发酵甲酸,乙酸等大肠杆菌等2,3-丁二醇发酵2,3-丁二醇等产气肠杆菌丁酸型发酵丁酸,丁醇,乙酸,丙酮等丁酸梭菌,丙酮,丁醇梭菌等5-类型途径产品/1葡萄糖产能/1葡萄糖菌种代表同型EMP2乳酸2ATP徳氏乳杆菌,粪肠球菌异形HMP1乳酸,1乙醇,1二氧化塘1ATP肠膜明串珠菌,发酵乳杆菌1乳酸,1乙醇,1二氧化碳2ATP短乳杆菌两歧双歧杆菌5-。5-11、试列表比较细菌终究发酵与酵母菌酒精发酵的特点和优缺点。种类项目酵母菌酒精发酵细菌酒精发酵同型酒精发酵同型酒精发酵异性酒精发酵途径EMP途径ED途径HMP途径的PK途径代表菌酿酒酵母假单胞菌肠膜明串珠菌反映式G+2ADP+2Pi→2乙醇+2CO2+2ATPG+ADP+Pi→2乙醇+2CO2+ATPG+ADP+Pi→乳酸+乙醇+CO2+ATP优点产能较高适宜高浓度的葡萄糖,吸取葡萄糖速度较酵母菌快,生长过程完全不要氧气发生酒精的同时发生乳酸缺点不适宜高浓度的葡萄糖发酵底物局限于葡萄糖、果糖、蔗糖该途径不克不及单独存在5-12、Stickland反映存在于哪些微生物中?反映的生化机制如何?多见于厌氧的梭菌中,如生孢梭菌、肉毒梭菌、斯氏梭菌、双酶梭菌等。5-13、在化能自养细菌中,亚硝化细菌与硝化细菌是如何获得其生命活动所需的ATP和[H]的?亚硝化细菌是通过氧化无机底物氨根离子获得ATP和还原力[H]的,氨的氧化必须有氧气介入,氧化作用的第一步是由氨单加酶催化成羟氨,接着由羟氢氧化还原酶将羟氨氧化为亚硝酸。ATP是第二步中通过细胞色素系统进行的电子转移磷酸化形成的。硝化细菌是通过亚硝酸氧化酶系统催化氧化亚硝酸得能量的,亚硝酸根离子氧化为硝酸根离子的过程中,氧来自水分子而非空气,发生的质子和电子从与其氧化还原电位相称细胞色素进入呼吸链,顺着呼吸链传递给氧,发生ATP,而还原力[H]则是通过质子和电子的逆呼吸。5-14、试图示不产氧光合细菌所特有的循环光合磷酸化反映途径。5-15、试图示产氧光合细菌和其它绿色植物所特有的非循环光合磷酸化的生化途径。5-16、青霉素为什么只能克制代谢旺盛的细菌?其克制机制如何?青霉素克制肽聚糖的合成过程,形成破裂的细胞壁,代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成,因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制:青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾于肽桥间的转态作用。6-1微生物的生长与繁殖间的关系如何?研究他们的生长繁殖有何理论与实践意义?生长是一种逐步发生的量变过程,繁殖是一种发生新的生命个体的质变过程。高等生物里这两个过程能够明显分开,但在低等特别是在单细胞的生物里,这两个过程是紧密联系又很难划分的过程。单个微生物细胞→适宜的外界条件,吸取营养物质,进行代谢→同化作用的速度超出了异化作用→个体的生长原生质的总量(重量、体积、大小)就不竭地增加→如果各细胞组分是按恰当的比例增加时,则达成一定程度后就会发生繁殖,引发个体数目的增加→群体内各个个体的进一步生长→群体的生长微生物的生长繁殖是其在内外多个环境因素互相作用下生理、代谢等状态的综合反映,因此,有关生长繁殖的数据就可作为研究多个生理、生化和遗传等问题的重要指标;同时,微生物的生产实践上的多个应用或是人类对致病、霉腐等有害的微生物的防治,也都与它们的生长繁殖或克制亲密有关。这是研究微生物生长繁殖规律的重要指标。6-2延滞期有何特点?实践上如何缩短它?特点:(1)生长速率常数R=0;(2)细胞形态变大或增加;(3)细胞内RNA特别是rRNA含量增高,原生质嗜碱性增强;(4)合成代谢活跃(核糖体、酶类、ATP合成加紧),易发生诱导酶;(5)对外界不良条件反映敏感(如氯化钠浓度、温度、抗生素等理、化学药品)。缩短延滞期的办法:(1)接种龄:如果以指数期接种龄的种子接种,则子代培养物的延滞期就短;反之,如以延滞期或衰亡期的种子接种,则子代培养物的延滞期就长;如果以稳定时的种子接种,则延滞期居中。(2)增加接种量;普通来说,接种量增大可缩短甚至消除延迟期。(3)培养基营养:调节培养基的成分,应适宜丰富,且发酵培养基成分尽量与种子培养基的成分靠近。6-3指数期有何特点?处在此期的微生物有何应用?特点:(1)生长速率常数R最大,即代时最短;(2)细胞进行平衡生长,菌体大小、形态、生理特性等比较一致;(3)酶系活跃,代谢最旺盛。应用:指数期的微生物含有整个群体的生理特性一致、细胞各成分平衡增加和生长速率恒定等优点。(1)用作代谢、生理等研究的良好资料;(2)是增殖噬菌体的最适宿主;(3)是发酵工业中用种子的最佳资料。(4)进行染色、形态观察等的良好资料。6-4稳定时有何特点?稳定时到来的因素有哪些?特点:(1)R=0,即处在新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等,或正生长与负生长相等的动态平衡之中。(2)菌体产量达成了最高点。(3)菌体产量与营养物质的消耗间呈现出有规律的比例关系。(4)细胞内开始积聚糖原、异染颗粒和脂肪等内含物;芽孢杆菌普通在这时开始形成芽孢;(5)通过复杂的次生代谢途径合成多个次生代谢物。因素:(1)营养物特别是生长是限制因子耗尽;(2)营养物的比例失调;(3)酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产品的累积;(4)pH、氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜等等。6-5试根据E.coli的代时来阐明夏季食物容易蜕变的因素,并提出其避免方法。因素:食物蜕变是微生物在食物中蜕变发酵的成果,Ecoli在分歧温度下的代时是分歧的,特别是当温度达成40度左右时,它的代时是最短的,因此,夏季的温度条件特别适合E.coli这类的微生物的生长,它们的繁殖很快,并且易产酸,很容易使食物蜕变,变酸。避免方法:在食物蜕变之前将其放入温度较低的不适宜微生物大量繁殖的地方。6-6试述McCord和Fridovich有关厌氧菌氧毒害超氧化物歧化酶假说。凡严格厌氧菌就无SOD活力,普通也无过氧化氢酶活力;因此含有细胞色素系统的好氧菌都有SOD和过氧化氢酶;耐氧性厌氧菌不含细胞色素系统,但含有SOD活力而无过氧化氢酶活力,在此基础上,他们认为,SOD的功效是呵护好氧菌免受超氧化物阴离子自由基的毒害,从而提出了缺少SOD的微生物必然只能进行专性厌氧生活的学说。6-7在微生物的培养过程中,培养基的PH变更有何规律?如何合理调节以利微生物更加好地生长和发生大量代谢物?微生物的生命活动过程中会自动地变化外界环境的pH,其中发生pH变化有变酸和变碱两种过程,在普通微生物的培养中往往以变酸占优势,因此,随着培养时间延长,培养基的pH会逐步下降。PH的变更还与培养基的组分特别是碳氮比有很大关系,碳氮比高的培养基经培养后pH会明显下降;相反,碳氮比低的培养基经培养后,其pH常会明显上升。方法:过酸时:加入碱或适量氮源,提高通气量。过碱时:加入酸或适量碳源,减少通气量。7-1质粒有何特点?重要的质粒可分几类?各有哪些理论或实际意义?质粒是细菌体内的环状DNA分子。大致能够分为5类:接合性质粒,抗药性质粒,产细菌素和抗生素质粒,具生理功效的质粒,产毒质粒。在基因工程中质粒常被用作基因的载体或标记表记标帜基因,抗多个抗生素,抗金属等离子,抗生素就是用于治疗多个细菌感染或克制致病微生物感染的药品。种类意义接合性质粒抗药性质粒抗多个抗生素。抗重金属等离子产细菌素和抗生素质粒具生理功效的质粒运用乳糖、蔗糖、尿素、固氮等降解辛烷、樟脑、萘、水杨酸等发生色素结瘤和共生固氮产毒质粒外毒素,K抗原,内毒素致瘤引发龋齿产凝固酶、溶血素、溶纤维蛋白酶和肠毒素7-2诱变育种的基本步调有哪些?核心是什么?何故?核心是出发菌株的选择和诱变办法的选择。由于这些都能决定诱变的效果和方向。7-3试简述转化的基本过程。供体菌的dsDNA片段与感受态受体菌细胞概况的膜连DNA接合蛋白相接合,其中一条链被核酸酶齐荣凯和水解,另一条进入细胞。来自供体菌的ssDNA片段被细胞内的感受态特异的ssDNA接合蛋白相接合,并使ssDNA进入细胞,随即在RecA蛋白的介导下与受体菌核染色体上得同源区段配对、重组,形成一小段杂合DNA区段。受体菌染色体组进行复制,于是杂合区也跟着得到复制。细胞分裂后,形成一种转化子和一种仍坚持受体菌原来基因型的子代。7-4试比较E.coli的F+、F-、F’和Hfr4个菌株的特点。并图示它们间的互相联系。F+菌株,F因子独立存在细胞概况有性菌毛,,F-菌株,不含F因子,没有性菌毛,但能够通过结合作用接受F因子而酿成雄性菌株F+,Hfr菌株,F因子拔出到染色体DNA上,细胞概况有性菌毛;F’菌株,Hfr菌株内德F因子不正常切割而脱落染色体时,形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子,特称F’’因子,细胞概况同样有性菌毛。7-5为什么用结合中断法能够绘制E.coli的环状染色体图?由于在接合中的DNA转移过程有着稳定的速度和严格的次序性,因此,人们能够再实验室中每隔一定时间翻遍地用接合中断器或组织捣碎机等方法,使接合中断,获得一批接受到Hfr菌株分歧遗传性状的F-接合子。根据这一原理,运用F质粒可正向或反向拔出宿主核染色体组的分歧部位的特点,构建几株有分歧整合位点的Hfr菌株,使其与F-菌株接合,并在分歧时间使接合中断,最后根据F-中出现Hfr菌株中多个性状的时间早晚,就可画出一张比较完整的环状染色体图。7-6用原生质体融正当进行微生物育种有何优点?该法的基本操纵步调如何?原生质体融合是通过人为的办法,使遗传性状分歧的两个细胞的原生质体进行融合,借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程,能进行原生质体融合的生物种类即为广泛,不仅包含原核生物中的细菌和放线菌,并且还包含多个真核生物细胞。步调:先选择两株有特殊价值、并带有选择性遗传标记表记标帜的细胞作为亲本菌株至于高渗溶液中,用适宜的脱壁酶去除细胞壁,,再将形成的原生质体进行离心聚集,如果促融合剂PEG或借电脉冲等因素增进融合,然后用等渗溶液稀释,再涂在能促使它再生细胞壁和进行细胞分裂的基本培养基平板上,待形成菌落后,再通过影印平板法,把它接种到多个选择性培养基平板上,检查它们与否为稳定的融合子,最后再测定其有关生物学性状或生产性能。7-7试列表比较原核微生物的转化、转导、接合和原生质体融合的异同。类型定义共同点分歧点转化受体菌在自然或人工技术作用下直接摄取来自供体菌的游离DNA片段,并把它整合到自己的基因组中,而获得后者部分遗传性状的基因转移过程都是让受体菌发生了新的遗传性状,并且能够稳定遗传是DNA和受体菌进行转化转导以温和噬菌体为媒介,将供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中,通过交换与整合,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象是供体菌和受体菌进行接触发生遗传物质的交流接合供体菌(“雄”)通过其性菌毛与受体菌(“雌”)相接触,前者传递分歧长度的DNA给后者,并在后者细胞中进行双链化或进一步与核染色体发生交换、整合,从而使后者获得供体菌的遗传性状的现象是缺点噬菌体和受体菌进行DNA的重组原生质体融合通过人为的办法,使遗传性状分歧的两个细胞的原生质体进行融合,借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程人工将细胞做成原生质体,然后将两者进行融合发生重组7-8菌种衰退的因素是什么?如何对衰退的菌种进行复壮?如何区别菌种终究是衰退,还是发生污染或饰变?在生物进化的历史长河中,遗传型的变异是绝对的,而其稳定性却是相对的,在变异种,退化性的变异是大量的,而进化性的变异却是个另外。在自然条件下,个另外适应性变异通过自然选择就可保管和发展,最后成为进化的方向,在人为的条件下,人们也可通过人工选择法去故意识地筛选个另外正变体,并用于生产实践中。相反,如不自觉、认真的区进行人工选择,大量的自发突变株就会随之泛滥,最后造成菌种的衰退。在菌种已发生衰退的状况下,通过纯种分离和生产性能测定等办法,从衰退的群体中找出未衰退的个体,以达成恢复该菌原有典型性状的方法;或者在菌种的生产性能未衰退前就故意识的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提高。事实上是运用自发突变(正变)不竭地从生产中选种。衰退是菌种在培养或收藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有优良生产性状的劣化、遗传标记表记标帜的丢失等现象。污染是7-9冷冻干燥收藏法的重要操纵步调是什么?该法的优缺点是什么?纯种细胞或孢子用脱脂牛奶等呵护剂混匀,放入安瓿管中,置-70℃优点:是一种有效的菌种收藏办法。它集中了低温、干燥、缺氧和加呵护剂等多个有利菌种收藏条件于一身,可达成长久收藏菌种的效果,合用的菌种多,收藏期和存活率高等优点。缺点:设备较贵,操纵较繁琐。7-10试述液氮超低温收藏法的重要操纵过程,并指出该法的优缺点。把微生物细胞混悬于含呵护剂的液体培养基中分别装入耐低温的安瓿管中厚,做缓慢预冷,然后移至液氮罐中的液相或气相做长久超低温收藏。优点:收藏期长且适合帮藏各类微生物,特别适宜于保管难以用冷冻干燥收藏法的微生物,如支原体、衣原体、不产孢子的真菌、微藻和原生动物等。缺点:需要液氮罐等特殊设备,且管理费用高,操纵较复杂,发放方便。8-1为什么说土壤是人类最丰富的菌种资源库?如何从中筛选所需的菌种?土壤是微生物的大本营:①进入土壤中的有机物为微生物提供了良好的碳源、氮源和能源;②/L);③土壤中的水分即使变更较大,但基本上能够满足微生物的需要;④土壤的酸碱度在pH5.5-8.5之间,适合于大多数微生物的生长;⑤土壤的渗入压大都不超出微生物的渗入压;⑥土壤空隙中充满着空气和水分,为好氧和厌氧微生物的生长提供了良好的环境。⑦土壤含有保温性,与空气相比,昼夜温差和季节温差变更不大。筛选:配制PDA培养基1、原料准备:1000ml水;200g土豆;20g蔗糖;15—20g琼脂10g蛋白胨;5gNaCl;15—20g琼脂。二、牛肉膏蛋白胨培养基的配制1、原料准备:1000ml水;3g牛肉膏;1、培养基、培养皿、涂抹棒、枪头、无菌水等置于高温灭菌锅121摄氏度灭菌25min;超净工作台紫外线消2、将培养基、培养皿、涂抹棒、枪头、无菌水等移入超净工作台中。3、将培养基倒入培养皿(培养皿三分之一容积),在酒精灯火焰附近(火焰周边10厘米左右)操纵。4、开盖至冷却,盖上盖子。土壤样本10g、90ml无菌水(锥形瓶中)、9ml无菌水(试管)、培养皿1、电子天平精确称取10.00g土样,加入90ml无菌水中,振荡摇匀,酒精擦拭后移入超净工作台。2、将试管依次编号1-6,用移液枪移取1000微升悬浊液置于1号试管,再移取1000微升1号试管悬浊液置于2号试管,依次做六个试管。3、涂布①、用移液枪分别取4、5、6号试管溶液各200微升(每个试管取2—4份)置于培养基中并做好标②、用涂抹棒均匀涂抹培养基中的土壤溶液。4、在恒温干燥箱中培养,观察。5、定时观察8-2在检查饮用水的质量时,为什么要选用大肠菌群数作为重要指标?我国卫生部分对此有何规定?因素:大肠菌群是温血动物肠道中的正常菌群,数量极多,用它作指标能够敏捷地推断该水源与否曾与动物粪便接触以及污染程度如何。由此即可避免直接去计算出数量极少的肠道传染病(霍乱、伤寒、痢疾等)病原体所带来的难题。规定:我国卫生部分规定的饮用水的尺度是:①细菌总数1mL自来水中的细菌总数不成超出100个,(37℃,24h)②大肠菌群数1000mL自来水中的大肠菌群数不克不及超出3个(37℃8-3现有一种只含大量死乳酸菌的口服保健液,能否称它为“微生态口服液“?为什么?8-4从理论上讲,在甲乙两种生物间有可能发生哪些互有关系?试各举一例阐明之。互生:粪肠球菌与阿拉伯糖杆菌;分解纤维素的细菌与好氧的自生固氮菌;人体肠道中的正常菌群与人体。共生:根瘤菌和豆科植物的共生固氮,瘤胃微生物与反刍动物共生。寄生:噬菌体与细菌。蛭弧菌与某些肠杆菌和假单胞菌。引发动植物致病的病原菌与宿主。冬虫夏草。拮抗:葡萄球菌和青霉素。捕食:原生动物捕食细菌和藻类。8-5白蚁肠道中的“三重共生关系”是怎么回事?这一现象有何理论与实践的重要性?以消化木材为唯一食物来源的白蚁存在着大、中、小生物间的三重关系:由白蚁提供木质纤维,其肠道内的原生动物协助消化纤维素,而原生动物体内的共生细菌则通过生物固氮向前两个宿主提供氨基酸营养物。重要性:8-6为什么说微生物在自然界氮素循环中起着核心作用?在氮素循环中的8个循环中,有6个只有通过微生物才干进行,特别是为整个生物圈开辟氮素营养源的生物固氮作用,更属原核生物的专利,因此,我们能够认为微生物是自然界氮素循环的中心。8-7良好的水体为什么含有自体净化能力?如何使水体坚持其高度自净能力?良好的水体除了物理性德沉淀、扩散、稀释和化学性德氧化作用外,起核心作用的是生物学和生物化学作用,包含好氧细菌对有机物的降解和分解作用,原生动物对细菌的吞噬作用,噬菌体对细菌的裂解作用,细菌糖被(荚膜等黏性物质)对污染物的吸附、沉降作用,藻类和水生植物的光合作用,以及多个浮游动物、节肢动物和鱼类等食物链的摄食作用等。8-8为什么说在多个污水解决办法中,最根本、最有效、最便宜的手段是借助于微生物的生化解决法?用微生物解决污水的过程,实质上就是在污水解决装置这已小型人工生态系统内,运用分歧生理、生化功效微生物间的代谢协同作用而进行的一种物质循环过程。当高BOD的污水进入该系统后,其中自然菌群在充足供氧条件下,对应于污水这种特殊选择性培养基的性质和成分,随着时间的推移,发生着有规律的微生物群演替,待系统稳定后,即成了一种良好的混菌持续培养器。它可包管污水中的多个有机物或毒物不竭发生降解、分解、氧化、转化或吸附、沉降,从而达成消除污染和达成分层的解决效果——气体自然逸出,低BOD得解决水重新流入河道,而残留的少量固态废渣则可进一步通过厌氧发酵发生沼气燃料和有机肥供人们运用。9-1细菌、病毒和真菌三大类病原体对人和动物的致病力有何明显的不同:细菌:毒力就是菌体对宿主体表的吸附,向体内侵入,在体内定居、生长和繁殖,向周边组织的扩散蔓延,对宿主防御功效的抵抗,以及发生损害宿主的毒素等一系列能力的总和。9-2决定传染结局的三大因素是什么:病原体,人体免疫力,环境因素;三者间的关系:病原体作为传输的起点,没有传染源就不会有传染病发生,环境因素是病原体传输的途径,没有这个媒介病原体就不会再传染源和健康人群中传输,最后是人体免疫力,免疫力较差的比方老年人和小孩比成年人更易感染。9-3什么是幽门螺杆菌:幽门螺杆菌(HP)是人体胃粘膜内的一种螺旋状的革兰阴性细菌;它对人类的健康有何危害:可引发慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡和胃癌等10种胃病和6种其它疾病;如何检测它:能够通过检测抗体、胃窥镜观察和呼气实验法进行诊疗;如何防止它的危害:变化不良的饮食习惯,倡导分餐进食,变化喝不洁生水的不良习惯;注意饭前便后洗手、生吃蔬菜瓜果要洗净,切断口-口传输等,都是控制和杀灭幽门螺杆菌的有效途径.9-4用鲎试剂法测定内毒素的原理是什么:LAL中的B因子在内毒素、Ca2+作用下转化为活化的B因子,凝固酶原在活化的B因子的作用下转变成凝固酶,凝固原(可凝性蛋白)在凝固酶的作用下转变成凝固蛋白(凝固素)最后形成凝胶。用此办法替代家兔法测内毒素有何特点:专一、简便、快速、敏捷。9-5干扰素有几类:有四类,INF-α、INF-β、INF-γ、INF-ω;它对病毒克制的机制是如何:宿主细胞(A)在病毒或干扰素诱生剂作用下发生干扰素mRNA再转译为干扰素;宿主细胞(A等)在干扰素作用下发生抗病毒蛋白(AVP)mRNA,再转译为休止的AVP,它又通过病毒的dsRNA转变成激活的AVP;任何病毒感染后的宿主细胞(A等)转变的病毒的mRNA在激活的AVP的作用下降解,生成钝化的mRNA最后制止了病毒衣壳蛋白的翻译,于是克制了病毒的正常增殖。10-1种以上的系统分类单元有哪几级?各级的中、英、拉丁词怎么写,试举一具体菌种按7级分类系统编排一下:界Kingdom(Regnum)、门Phylum(Phylum)、纲Class(Classis)、目Order(Ordo)、科Family(Familia)、属Genus(Genus)、种Species(Species);10-2什么是微生物的种:是指一大群表型特性高度相似、亲缘关系极其靠近、与同属内其它种有着明显差别的菌株的总称。试述种、模式种与模式菌株间的关系:在微生物中,一种种只能用该种内的一种典型菌株来作具体标本,故这一典型菌株就是该种的模式种。10-3什么是新种:是指最新权威性的分类、鉴定手册中从未记载过的一种新分离并鉴定过的微生物。如何体现一种微生物的新种:在其学名后附上“”符号10-4什么是学名:学名是指一种菌种的科学名称,它是根据《国际命名法规》命名并受国际学术界公认并通用的正式名字。用双名法和三名法体现学名有何不同:当某种微生物室一种亚种(subsp)或变种(var)时,学名就应按三名法拼写。10-5菌株、品系、毒株、无性繁殖系、克隆、菌落、菌苔、斜面培养物、分离物、纯培养基和菌种等各名词间有何联系或区别10-6何谓三域学
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