第25次课 体内药物分析

体内药物分析第十三章一概述（一）体内药物分析的概念体内药物分析：是一门研究进入人或动物体内，存在于生物样品（如体液、组织、器官和排泄物等）中的药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学。（二）体内药物分析的意义

通过体内药物分析结果可求得药物动力学参数，可了解药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄情况。因此，体内药物分析为药物研究、制剂质量管理、临床用药等提供了数据和信息。另外，在用药过量、误服或服毒等中毒事件中，为解毒急救或判断案情，也需要进行体内药物分析；还有对一些兴奋剂、致幻剂、镇静剂等药物滥用现象也需要进行体内药物进行检测。返回首页（三）体内药物分析的特点1．干扰物质多：生物样品中含有大量的内源性物，质如蛋白质、脂肪等，以及代谢物、结合物等，样品一般均需经过分离、净化后才能进行分析。2．样品量少、不能重复取样：生物样品多数在特定条件下采集，无法再次取样，且浓度低、变化幅度大，在测定前需浓缩、富集以适应分析方法要求。 3．被测成分浓度低：对分析方法的灵敏度及专属性要求较高。4．药物浓度监测和药物滥用：要求分析方法简便、快速二常用样品的种类、采集和贮存（一）样品及采集1、血样：

血浆：是在加肝素、枸橼酸、草酸盐等抗凝剂的全血经离心后分取，量约为全血的一半。血清：是血液室温放置后，自然凝固析出的清液。采取：一般是静脉取血、针刺手指、耳垂取血2、唾液：

优点：样品易得，取样无痛苦，尤易为儿童接收。缺点：药物浓度变化大采取：漱口15分钟，收集自然流出或经舌在口内搅动流出的唾液。也可采取物理、化学方法刺激使唾液流出。

3、尿液：

尿样测定主要用于药物剂量回收研究、药物肾清除率和生物利用度等研究，以及测定代谢物类型等。

优点：采取简便，取样量大，受试者无痛苦。缺点：药物浓度变化也大，需采集一定时间内的尿样。采取：动物应在代谢笼中进行，通过笼下漏斗接收。（二）样品贮存取样后最好立即进行分析，不能立即分析的，则短期内冷藏(4℃)，长期冰冻(-20℃)。尿液是很好的细菌生长液，若需收集24小时或更长时间的样品或不能立即测定的，应置冰箱冷藏或加防腐剂（1%甲苯、过饱和氯仿）保存。

三生物样品前处理（一）药物在体内的存在形式游离型：原形药物或代谢物缀合物：药物或其代谢物与葡萄糖醛酸等结合结合物：药物与蛋白质结合因此，在样品测定之前要进行适当的样品制备。包括分离、纯化、浓集、必要时还需对待测组分进行化学衍生化。（二）样品前处理的目的1、提高测定方法灵敏度、准确度和专属性2、保护测定仪器不受生物样品中类脂和蛋白质等的污染。（三）样品的分离与纯化包括样品去除蛋白质、缀合物水解和待测组分的提取。1、去除蛋白质（1）加入与水相混溶的有机溶剂：乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等。（2）加入中性盐：饱和硫酸铵、硫酸钠、枸橼酸盐等。（3）加入强酸：三氯醋酸、高氯酸、硫酸-钨酸等。（4）加入金属离子：CuSO4-Na2WO4等。（5）酶解法：常用枯草菌蛋白酶2、缀合物水解尿液中药物多数呈缀合物状态。（1）酸水解：适量盐酸（2）酶水解：常用葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶或两者混合。3、待测组分的提取提取目的：从大量共存物中分离出所需要的微量组分提取方法：多数药物是亲脂性的，可用有机溶剂提取出来，而大多数内源性杂质是强极性的，不被提取出。（1）液-液提取（LLE）：液-液提取中需注意的问题：①适当的有机溶剂：常用乙醚、氯仿等。②适当的水相pH值：由药物的pKa值确定，一般碱性药物在碱性条件、酸