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文档简介
植物解剖与制片技术PlantAnatomyandSectioningTechnology学时分配:理论课4学时;实验课24学时。教学目的:通过对植物制片技术的掌握,为研究植物胚胎学、植物解剖学、作物栽培、遗传育种等教学、科研提供必备的技术。主要参考书目:1植物显微技术,王灶安主编,农业出版社;2植物制片技术,李正理编著,科学出版社;3《西北植物学报》,《植物研究》,《武汉植物学研究》,《植物分类学报》等学术杂志。考核方式:撰写实验报告:对所观察的器官结构进行详细的描述并作进一步的讨论,附上植物器官显微结构图。植物显微制片技术
植物制片的类型和方法切片法:徒手切片法
石蜡切片法滑走切片机切片法半薄切片法超薄切片法非切片法:离析法压片法整体封存法石蜡法制片原理与方法
一、材料的选择与分割
1.新鲜、健康、有代表性的材料;
2.生长发育的不同阶段;3.大小适当,0.5cm左右.
二、杀生、固定与保存
杀生:固定:
1根据固定目的物本身的结构性质;
2分割大的材料;
3抽气;
4标记.(整染)
固定液的配置及使用:
FAA固定液:适用范围:根、茎、叶、花药、子房固定时间:24h低温配方:福尔马林5ml
冰醋酸5ml70%酒精90ml
卡诺固定液:适用范围:根尖、花药、子房固定时间:小于24h,15-30分钟配方:ab
纯酒精15ml30ml
氯仿5ml
冰醋酸5ml1ml
保存:
70%酒精三、脱水
作用:1
除去组织内的水分;
2使石蜡顺利进入细胞内脱水剂:
1酒精:50%--70%--85%--95%--100%(梯度脱水)
2二氧杂环己烷
3正丁醇
4叔丁醇
5丙酮
四、透明作用:1
使材料透明、干净;
2便于包埋剂及封固剂的进入透明剂:
1二甲苯:1/2纯酒精+1/2二甲苯——二甲苯
2甲苯或苯;
3氯仿
4丁香油、香柏油等五、浸蜡
1低温浸蜡:40℃左右(1夜)
2高温浸蜡:58℃左右(6小时以内)六、包埋
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