中药显微鉴定-上2

1.3花粉粒与孢子的制片

为了更清晰地观察花粉壁表面的显微结构，用酸分解除去花粉内壁及内容物,方法是取花药或小的花朵浸于冰醋酸中软化，用玻棒捣碎，以铜筛过滤于离心管中，离心，取沉淀（花粉粒）加新鲜配制的醋酐与硫酸（9∶1）的混合液，置水浴中加热，再经离心得沉淀（除去内壁及内容物的花粉粒）；取沉淀用蒸馏水洗涤2～3次；可直接用甘油水试液装片，也可加甘油明胶适量封藏。（同样适用于孢子制片）2．横切面片根、根茎、茎藤、皮、叶类等，一般制作横切片观察；横切面即与根、茎的长轴，叶柄、花梗、果柄方向相垂直的切面；种子则与种脊相垂直的切面称横切面。木类药材须制作横切片、径向纵切片及切向纵切片三个面观察。这些都可以做徒手制片。2.1材料的选择选材（取样）：根据鉴定要求，选择有代表性的部位；根、根茎、藤茎等类圆形的材料要包含有中心部位，至少为1/4以上；叶、花萼、花冠等材料要包含主脉部位。材料切成长3cm、直径1cm左右的块或段，待切面应削平。样品的量一般不得少于实验所需用的3倍，即1/3供实验分析用，另1/3供复核用，其余1/3则为留样保存，保存期至少一年。2.2材料的预处理处理：清洗水洗，用柔软的毛刷轻轻的刷洗表面。软化常用的软化方法是用湿布包裹材料润湿，或在玻璃干燥器中放入0.5%苯酚水液，将需软化的药材放入不加盖的小玻璃器内并置干燥器的横隔板上，密封干燥器盖即可。较坚硬的材料，则可置水中浸软或煮沸；也可浸入软化剂（甘油酒精或纯甘油）中软化。极坚硬的材料，还可用氢氟酸浸渍软化，方法是将材料用水煮过后，放入15%氢氟酸水溶液中；若十分坚硬，可用更高浓度的氢氟酸溶液中软化，取出后水洗净备用。硬化对柔软而不便切片的药材可浸入70%～95%的乙醇中，20分钟后即可变得较硬。材料处理时，注意不能影响要观察的显微鉴别特征。如要观察菊糖、粘液等在软化、切片、装片等过程中，均不可与水接触，以免溶解消失；要观察挥发油、树脂等，则不可与高浓度乙醇或其它有机溶媒接触。

2.3切片、选片与装片切片用左手拇指、食指握持并用中指抵住材料，材料上端高出手指不超过3～4mm。右手持刀片，坚硬材料常选用单面刀片，柔软材料则选用双面刀片；刀口向内并使刀刃与材料的切面平行，移动右臂使刀口自左前方向右后方斜滑即可得到薄片。对于细小、柔软的材料可加用支撑物（如土豆、石蜡等）辅助进行。注意：①切片时速度要快，不可来回拉锯式切割；②切片时右手不动，只是右臂移动，动作用臂力而不用腕力。选片选择薄而完整的切片置载玻片上，加水或稀乙醇1滴于玻片上，盖上盖玻片，置低倍镜下观察，选取组织构造完整、显微特征清晰者备用。

装片按检测需要封藏于适宜的试液中，如水合氯醛液、斯氏液或某种显微化学试液等。如需制作半永久性标本片，可用稀甘油洗去原切片的试液，后用溶化的甘油明胶封藏。若需制作永久显微标本片，应选用结构完美、清晰的切片，按照石蜡切片项下的脱水、染色、透明及封固等步骤完成操作即可。2.3切片、选片与装片3.粉末制片3.1药材粉碎

选取完整的药材或待鉴定部位，用乳钵或小型电磨粉碎，过《中国药典》4～6号筛（4号筛、5号筛、6号筛的筛孔内径分别是0.25mm、0.18mm、0.15mm，粉末颗粒直径约为150

m～250

m），备用。

3.2斯氏液装片

斯氏液由醋酸∶甘油∶水（1∶1∶1）组成，主要用于观察淀粉粒及一些遇水合氯醛试液易溶解的成分。如多糖类成分、树脂类成分等。

3.3水合氯醛液装片

水合氯醛试液能渗透组织，使皱缩的细胞膨胀；并能溶解淀粉粒、蛋白质、树脂、挥发油和叶绿素等，使细胞组织变得透明而清晰。含多量淀粉的药材粉末

大量淀粉粒的存在会影响观察、描绘及摄影等效果。取一部分粉末于试管中加水煮沸，使淀粉粒糊化而溶解，放置或用离心机使所需细胞、组织下沉管底，用长吸管将沉淀物吸出供制片观察。3.4粉末特殊处