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文档简介
微生物的分子生物学检测方法123目录PCR核酸技术核酸分子技术结语PCR核酸技术
聚合酶链反应(PCR)技术自1985年发明以来,各种各样以PCR为基础的DNA序列的扩增和检测方法得到了迅猛发展。各种衍生技术如反转录PCR(RTR)、多重PCR、巢式PCR、PCR单链构象多态性(PCRSSCP)、限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增的多态性DNA技术(RAPD)和重复序列PCR技术(Rep-PCR)、荧光定量PCR等。其中定量PCR既可以用于临床感染性疾病的诊断,又可用于监测其疗效,PCR及其衍生的技术近年来在病原微生物分型研究上得到了广泛应用。简介随机扩增的多态性DNA技术重复序列PCR技术免疫PCR优点添加标题随机扩增的多态性DNA技术RAPD是目前最简单的DNA分型方法,分辨力高于RFLP,但低于Rep-PCR,RAPD技术的使用范围也非常广,分辨结果也有较好的实验室再现性,在疾病暴发流行时,PAPD仍是一种分析相关菌株和排除不相关菌株的良好技术。缺点由于其对引物和DNA浓度、DNA模板质量、凝胶电泳和DNA聚合酶类型的变化高度敏感,故RAPD的重复性不够理想。虽然RAPD的分型结果在不同实验室间变化较大,分辨力不如PFGE技术。随机扩增的多态性DNA技术(RAPD)是一种典型PCR衍生技术,在低复性温度下用短任意序列引物(10~15mers)扩增有密切同源性的基因组DNA序列,模板上任意引物杂交点的数目和位置因种的不同株而异,理论上特定
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