五叶草莓65%醇提液对s

五叶草莓65%醇提液对s

五叶草（又名泡沫和泡沫，当地人也被称为“泡沫”和“泡沫”）。它是陕西省秦岭山区的一种野生植物。它属于蔷薇科和多年生草本植物。山区人民收集了大量白色成熟的水果，吃了大量的食物和饮料。当地流行的草医学仪法对上腹部疼痛、腹部肿瘤、小便、窒息和胃痛等疾病没有显著影响。我们发现单味野生植物五叶草莓水煎液,具有抑制胃癌等消化系肿瘤生长,并能调节患者免疫功能的作用,且五叶草莓65%乙醇提取部位抑瘤率超过水提部位,为此本实验采用五叶草莓65%醇提液进行抑瘤实验。制备方法(65%乙醇回流提取):称取五叶草莓全草1250g,剪成约1cm长短,置于蒸馏烧瓶中加入65%乙醇为提取溶剂,加入溶剂量分别为12、10、8倍,水浴回流提取3次,时间分别为4h、3h、2h,合并3次提取物,过滤。滤液减压浓缩,回收乙醇至浸膏,得醇提浸膏为215g。恶性肿瘤是一种常见病、多发病,有效防治肿瘤是关系到人类前途命运的问题,一直被世界各国所关注。肿瘤不仅是细胞增殖和分化异常的疾病,也是细胞凋亡异常的疾病中医中药因具有多途径、多靶点、毒副作用小等优势,在肿瘤治疗和辅助治疗方面发挥着不小的作用。我们从实验角度探讨五叶草莓65%醇提液对S180荷瘤小鼠模型的作用机制。1实验材料1.1实验动物和仪器健康雄性SPF昆明小鼠50只,年龄4～9周,体重19～22g,由西安交大医学院动物实验中心提供,合格证号:SC·XK(陕)2007-001。1.2肿瘤植株购自第四军医大学实验动物中心,荷瘤S180腹水瘤小鼠,每7天传代1次。1.3叶草莓的制备五叶草莓65%醇提液:五叶草莓采购自陕西秦岭山区,经陕西中医学院药学系生药教研室胡本祥教授鉴定为蔷薇科植物五叶草莓的全草,本药为正品。经65%乙醇提取后,每1g提取物相当于5.8g生药,置0～4℃冰箱里保存备用。环磷酰胺(CTX):由山西普德药业有限公司提供,生产批号H14023686,临用时用生理盐水配制成所需浓度2mg/ml。IL-2放射免疫试剂盒和TNF放射免疫试剂盒:由北京福瑞生物有限公司提供生产批号090825。1.4降压机器和管机器电子天平(FA1004N)由上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂制造;低速离心机(KDC-40)由科大创新股份有限公司中佳分公司制造;FM-2000全自动r免疫计数器由西安凯普机电有限责任公司制造;膜式电动吸引器由上海医疗器械工业公司医用吸引器厂制造。2实验方法2.1实体瘤模型制备所有小鼠先适应性喂养7天,后在无菌条件下,用5mL注射器接8号针头刺入已接种7d的荷瘤S180腹水瘤小鼠的腹腔中,采集S180小鼠腹水,不加抗凝剂,1mL腹水加1mlPBS液,放入离心机1000rpm/min离心6min,连续2次,弃上清液,取离心后溶液1mL加一滴0.2%台盼蓝溶液混匀,在显微镜下用血球计数板计数,经检测活细胞率>95%,用PBS液稀释调整瘤细胞悬液密度至1×107个/mL,每只小鼠右侧腋部皮下被注入0.2mL瘤细胞悬液接种制成实体瘤模型。2.2小组小鼠被接种24h后,按体重随机分为模型组、CTX组、五叶草莓高剂量、五叶草莓低剂量组,每组10只,分组后称重。所有小鼠均为普通饮食。2.3ctx对灌胃量的影响将分别给予五叶草莓65%醇提液高剂量(8.26g·kg·d)组、五叶草莓65%醇提液低剂量(4.13g·kg·d)组、CTX(0.04g·kg·d)组,五叶草莓65%醇提液组灌胃给药,阳性对照CTX组腹腔注射,生理盐水组灌胃量同五叶草莓醇提液每天灌胃量。以上各组在接种瘤细胞后第2天开始给药。以上小鼠每天给药1次,连续14天。2.4小鼠脱瘤率的测定S180荷瘤小鼠给药14天后,第15天处死小鼠,剥离瘤体,计算抑瘤率;剖取脾脏和胸腺,计算脾脏指数和胸腺指数,分离血清,用放射免疫法检测血清中IL-2、TNF-α的含量。2.5统计方法各组数据均按均数±标准差(x¯±s)(x¯±s)表示,采用t检验及方差分析,运用SPSS16.0统计软件进行。3结果3.1小鼠按照大鼠的前前表作在于饮食、饮水、活动正常接种前所有小鼠灵活,体毛光泽致密,进食饮水可,生长良好。1周后五叶草莓65%醇提液各剂量组及环磷酰胺组右腋下可见皮下肿块。正常组小鼠饮食、饮水、活动正常,被毛光泽,反应灵敏。模型组小鼠接种瘤细胞1周后瘤体生长迅速,进食、饮水减少,小鼠活动明显减少,被毛无光泽,反应迟钝;五叶草莓65%醇提液各组及环磷酞胺组肿瘤生长相对缓慢,而环磷酰胺组小鼠比五叶草莓65%醇提液各剂量组和模型对照组小鼠活泼,被毛略有光泽。3.25%液态草吉隆对s180莲花肿瘤的严重影响3.35%液态草对s180莲花瘤小鼠胸腺指数和脾脏指数的影响3.45%乙醇提取物对s180莲花瘤大鼠血清tnf-i和il-2的影响3.5叶草莓20%醇提液大、难以感染造成瘤灶周围炎性反应光镜下可见,模型组瘤细胞形态不规则,核浆比例大,核异形性强,核大深染,可见病理性核分裂象,部分区域可见肿瘤细胞侵及血管壁。五叶草莓65%醇提液高、低剂量组细胞异型性有所缓解,肿瘤细胞减少,瘤灶周围伴有炎性反应。CTX组肿瘤细胞明显减少,可见大片炎细胞区域,见图1～4。4叶草莓醇提液对s180荷瘤小鼠血清中il-2、tnf-的影响本文从实验研究方面探讨了五叶草莓65%醇提液的抑瘤和改善机体免疫功能的作用,结果显示:五叶草莓65%醇提液高、低剂量组对s180荷瘤小鼠的肿瘤有抑制作用,其机制是可能增加了S180荷瘤小鼠血清中IL-2、TNF-α的含量,促进S180荷瘤小鼠免疫器官胸腺、脾脏的生长,与改善荷瘤小鼠的免疫功能有关。5对荷瘤小鼠血清tnf、il-2、th-2的活性检测近年来人们越来越认识到肿瘤的发生、发展与机体免疫功能密切相关。免疫系统不仅具有清除病原微生物和其毒素、损伤或衰老的自身细胞、移植的外来细胞的功能,也能清除那些因各种因素而发生突变的新生细胞,即肿瘤细胞。免疫系统实现上述功能,主要是依靠免疫细胞和细胞因子。肿瘤坏死因子(TNF)是机体免疫反应中引起出血和坏死的细胞因子。TNF-α对恶性肿瘤的作用尤为突出。白细胞介素2(IL-2),原称T淋巴细胞生长因子,主要由抗原激活的T细胞产生,其最重要的作用是诱导T淋巴细胞的增殖与分化,即T淋巴细胞受抗原刺激后产生IL-2,IL-2又作用于T淋巴细胞,诱导其自身增殖、分化和发挥功能,IL-2在机体抗肿瘤疫中有着重要地位,尤其在增强CTL(细胞毒性T细胞)及(Th)T辅助细胞的活性和激活T细胞增殖等方面起关键作用。本实验以S180荷瘤小鼠为模型,对五叶草莓65%醇提取物进行了抗肿瘤实验研究。结果显示,五叶草莓65%醇提取物对荷瘤小鼠的肿瘤生长有抑制作用,高剂量组抑瘤率为45.05%,低剂量组抑瘤率为37.77%,五叶草莓65%醇提取物高、低剂量组与模型组比较