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文档简介
miRNA靶基因识别和功能调节一、mRNA简介microRNA(miRNA)是一类能够调节基因表达的短单链內源非编码RNA(约22nt),通过与互补的mRNA选择性地结合抑制蛋白的产生,广泛存在于动物、植物、病毒等多种有机体中。
miRNA通常位于基因间或者内含子区域,在细胞核内有RNA聚合酶Ⅱ转录产生具有帽子结构多聚腺苷酸尾巴的pri-miRNA。在核酸酶Drosha及其辅助因子Pasha的作用下,pri-miRNA被处理成70个核苷酸组成具有茎环结构的pre-miRNA,然后由Exportin
5等转运至细胞质。Dicer将pre-miRNA切割成约22nt的双链miRNA。双链miRNA讲解形成单链的成熟miRNA。成熟miRNA还需要与Argonaute蛋白等组装形成RNA诱导沉默复合体(RISC),RISC作用于特异mRNA的3’UTR,从而抑制翻译过程或者直接降解mRNA。SiRNA与mRNA比较SiRNA和mRNA也有区别。1.根本区别是miRNA是内源的,在基因组中有固定的基因座位;siRNA可以是人工体外合成的,也可以是基因组的转录片断,降解片断和转座片断,病毒基因组转录片断等,关键在于siRNA没有固定的基因座位,本身不是基因组的功能片断,是随机产生的,即加工位点不是保守的。2.二者结构上没有本质区别,功能分子都是单链RNA,miRNA转录出来时必然是发夹状的,siRNA可以由完全互补的双链切断而来,也可以从发夹来。二、靶基因预测方法尽管对miRNA功能的认识还不是非常清楚,但miRNA在许多生物过程中起关键作用,包括发育、细胞分化、增殖、凋亡、肿瘤转移等。准确快速地预测miRNA靶基因对于研miRNA功能以及分析miRNA参与的生物学过程具有十分重要的意义。目前寻找miRNA靶基因的方法主要有生物信息学以及生物实验方法。1、生物信息学方法生物信息学方法主要是利用某种算法对靶基因样本进行评分及筛选。生物信息学的方法只是通过算法为研究人员提供可能性最大的参考信息,还需要通过实验进行验证。目前常规的算法主要遵循以下几个常用原则:(a)miRNA与靶基因的互补性;(b)miRNA靶位点在不同物种之间的保守性;(c)miRNA-mRNA双链之间的热稳定性;(d)miRNA靶位点不会有复杂的二级结构;(e)miRNA
5’端于靶基因
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