复方麝香注射液中5个有效成分的测定

复方麝香注射液中5个有效成分的测定

复方香注射液是一种新型的中药复方制剂，采用传统的中医“安宫牛黄丸”。它的主要成分包括麝香、婆罗洲、郁金香、菖蒲和广茉3430；香。大量临床研究表明复方麝香注射液在脑部疾病、病毒、中毒及解热镇痛方面作用显著。而复方制剂化学成分复杂,确定指标成分是质量控制的关键。目前,原有的复方麝香注射液质量标准研究的指标是以麝香酮为单一控制指标的目标成分。曾有报道GC法测定麝香酮、薄荷脑等成分,为了更加全面地控制产品质量,本实验选取含量较高,且有豁痰开窍、醒神安脑功效的麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑和薄荷脑作为质控指标,采用GC-MS同时对5个成分进行定性定量分析。并利用该方法对市售复方麝香注射液进行质量评价,进一步说明此方法对复方麝香注射液质量控制研究的优越性。1仪器和试剂1.1自动进样器和电子分析天平Agilent7890/5975C气相色谱-质谱联用仪,配有电子轰击电离源(EI);7963型自动进样器(美国Agilent公司);DRAGONMED移液器(大龙医疗设备(上海)公司);CP2250D电子分析天平(德国Sartorius公司);Maxi-MixII涡旋混合器(美国BarnsteadThermolyne公司)。1.2复方香精注射液对照品麝香酮(≥98%,批号120709)、百秋李醇(≥98%,批号120927)、龙脑(≥98%,批号120411)、薄荷脑(≥98%,批号120709)均为四川省维克奇生物科技有限公司产品,β-细辛醚(70.9%,批号03124JRV)为Sigma公司产品;复方麝香注射液由生产企业提供(10mL·支-1)。实验所用试剂均为分析纯,实验用水为双蒸水。2方法和结果2.1测试方法色谱条件:采用AgilentHP-5MS毛细管柱(30m×0.25μm×0.25mm),进样口温度280℃,分流比5∶1,柱温采取程序升温(初始温度100℃,保持2min,以5℃·min-1速率升温至190℃,保持1.5min,以40℃·min-1速率升温至250℃),载气为高纯氦气,流速1mL·min-1,进样量1μL。质谱条件:EI源,轰击电压70eV;离子源温度230℃;四极杆温度150℃;辅助接口温度280℃。采用全扫描模式获得混合标准溶液的总离子流色谱图,确定各目标化合物的保留时间和特征离子;再进行选择离子检测(SIM)定量,选择m/z238、208、222、138、154分别为麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑和薄荷脑的检测离子。在上述色谱条件下,混合对照品储备液与供试品溶液全扫描总离子图、混合对照品储备液SIM色谱图见图1。2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备精密称定麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑和薄荷脑的对照品适量于10mL量瓶中,加约2mL甲醇溶解,再加2%的聚山梨酯80溶液至刻度,60℃水浴加热溶解,配制成混合对照品储备液(麝香酮0.104mg·mL-1,β-细辛醚1.500mg·mL-1,百秋李醇0.093mg·mL-1,龙脑0.953mg·mL-1,薄荷脑0.946mg·mL-1)。2.2.2试验溶液2.3进样、色谱测定精密移取“2.2.1”项下混合对照品储备液1、2、4、6、8、10mL,分别置10mL的量瓶中,加2%聚山梨酯80稀释至刻度,摇匀得系列对照品工作液。分别吸取1μL,按“2.1”项色谱条件进样,记录色谱图,测定峰面积。以峰面积A对对照品浓度C(mg·mL-1)进行线性回归,得麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑、薄荷脑的回归方程分别为:实验结果表明:麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑和薄荷脑的浓度分别在0.0104~0.104、0.1529~1.529、0.0093~0.093、0.0953~0.953、0.0946~0.946mg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系。2.4精密度试验取供试品溶液,按“2.1”项下色谱条件,连续进样6次,计算麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑、薄荷脑峰面积的RSD(n=6)分别为0.91%、0.88%、1.6%、1.8%、1.2%,表明该法精密度好,满足检测要求。取同一批样品6份,按“2.1”项色谱条件进样,计算麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑、薄荷脑平均含量(n=6)分别为0.0390、0.625、0.0361、0.525、0.483mg·L-1,RSD分别为0.39%、1.0%、0.72%、0.89%、1.0%,方法重复性好,实验结果可靠。2.5香辛料检测取供试品溶液,室温下放置0、1、2、4、8、12h后分别在“2.1”项色谱条件下测定。麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑、薄荷脑所得峰面积的RSD(n=6)分别为2.6%、1.5%、1.1%、2.4%、2.7%。表明供试品溶液在12h内稳定性良好。2.6加标回收率试验精密移取同一已知含量的样品9份,每份0.5mL,分别加入高、中、低浓度的混合对照品溶液0.5mL,每个加入水平各3份,混匀,在上述色谱条件下进样测定,计算回收率,结果见表1。2.7样品含量的测量取各批次复方麝香注射液,在“2.1”项色谱条件下,每批次随机取1份,进样3次求平均值,结果见表2。3复方香精注射液的检测方法在进行网络实验时,其效果好,他从前例物理工艺和长本实验采用GC-MS所建立的方法,可同时测定复方麝香注射液中麝香酮、β-细辛醚、百秋李醇、龙脑和薄荷脑5个成分的含量,该方法操作简单、可靠、快速,能较好地反映该注射液质量。本实验从优选柱温出发,比较不同的程序升温方法和毛细管柱,发现该实验所采取的的柱温和毛细管柱能使各成分在23min内得到很好的分离。当选用如