复方丹参滴丸抗垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的药效研究

复方丹参滴丸抗垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的药效研究

现在出版的《人参滴丸》由丹参、三七和婆罗洲组成。其中，婆罗洲是一种合成的婆罗洲，主要起到辅助作用。冰片有天然冰片和合成冰片之分，天然冰片原名龙脑香，分布于南洋群岛，主产于印尼，主要成分是右旋龙脑，合成冰片除含有龙脑以外还含有大量的异龙脑，异龙脑为龙脑的差向异构体[l,2]。本实验观察了天然冰片组成的复方丹参滴丸(以下简称：复方丹参滴丸“天”)抗实验性心肌缺血的药效，并与合成冰片组成的复方丹参滴丸(以下简称：复方丹参滴丸“合”)进行比较。1材料和方法1.1主要实验设备多道生理记录仪(MP-100，美国BIOPAC公司),半自动生化分析仪(荷兰威图Dpu-411TypeⅡ)。1.2药物、试剂、仪器复方丹参滴丸(含天然冰片和合成冰片)由天士力集团提供，出膏率为0.2%；消心痛，5mg/片，批号：000901(天津市海光制药厂)；垂体后叶素(pituitrin,Pit)，每支1OU/mL，批号：20000501(天津市生物化学制药厂)；乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒购于南京建成生物工程公司。1.3各组随机分组Sprage-Dawley大鼠，雌雄各半，体质量（215±24)g，由北京维通利华动物中心提供。随机分为7组：正常对照组、模型组、消心痛组、复方丹参滴丸(天)高剂量组、复方丹参滴丸(天)中剂量组、复方丹参滴丸(合)高剂量组、复方丹参滴丸(合)中剂量组。上述受试药物使用前均用生理盐水配制，浓度为lmL/kg(模型组和正常对照组灌服生理盐水lmL/kg，正常对照组不注射Pit)。1.4pit敏感大鼠实验于实验前1d首先进行动物对垂体后叶素(Pit)敏感性筛选实验，方法舌下静脉注射Pit0.35U/kg(浓度为1U/2mL)，观察心电图变化情况，选取对Pit敏感大鼠用于实验(T波明显抬高，ST段抬高超过0.1mV)，不敏感大鼠及心电图不正常大鼠淘汰。将筛选获得的敏感大鼠于次日实验前1h按随机分组原则分别灌胃给药(10只正常对照组只给生理盐水不注射Pit,复方丹参滴丸剂量均为生药量，3%戊巴比妥纳（30mg/kg）腹腔注射麻醉，仰位固定，多道生理记录仪连接，动态描记Ⅱ导联心电图，心电图正常者舌下静脉注Pit0.35U/kg，于5s内注完，动态观察心电图变化，3h心脏取血以检测各项生化指标。1.5统计方法2结果2.1pit的变化大鼠注射Pit后，观察Ⅱ导联心电图T波峰值的变化百分率，模型组大鼠注射Pit后即刻T波明显抬高，15s时达到高峰，即出现第1期心电图的变化，于注射Pit第1min后出现T波低平、双相、倒置，心率减慢，P-R及Q-T间期延长等心电图第2期变化。各用药组均能够对抗Pit引起的大鼠第1期和第2期的变化，与模型组比较差异非常显著(P<0.05,P<0.01)。各给药组之间无明显差异。2.2各组血清内sod活性、mda含量比较模型组注射PitRG3h血清CK升高，与正常对照组比较差异非常显著（P<0.01），消心痛组、天然冰片和合成冰片组成的复方丹参滴丸生药3.04g/kg,1.52g/kg组对血清CK有不同程度的减少，与模型组比较差异显著（P<0.05），各复方丹参滴丸剂量组之间无明显差异；模型组注射Pit后3h血清LDH明显升高，与正常对照组比较（P<0.05），但各用药组与模型组比较以及各用药组之间无明显差异。模型组注射Pit后3h血清SOD活性明显下降、MDA含量升高，与正常对照组比较差异显著（P<0.01），消心痛组及各复方丹参滴丸剂量组均能够提高SOD活性，降低MDA含量，与模型组比较差异显著（P<0.01）；各给药组之间无显著差异。3复配体系对大鼠心肌缺血的作用复方丹参滴丸是在复方丹参片基础上，利用现代高科技手段制成的纯中药滴丸制剂，但滴丸的药理作用和临床疗效明显优于复方丹参片，是治疗冠心病心肌缺血的常用药物，主要有抗氧化、钙拮抗、扩张冠状动脉、抗动脉硬化、抗血栓形成、降血脂等作用。方中冰片具有开窍醒神、止痛、抗炎等作用。有天然冰片和合成冰片之分。我国在江西、湖南等地发现樟科樟属植物广泛含有龙脑，尤其是梅片树和龙脑樟可提取获得98%以上纯度的右旋龙脑，从而结束了我国不产天然冰片的历史。由于合成冰片阻碍其组方进入国际市场的进程，因此用天然冰片取代合成冰片将成为一种趋势。垂体后叶素(Pit)是从动物脑垂体中提取的，内含有加压素(抗利尿素)和催产素，加压素能直接使血管，特别是毛细血管和小动脉收缩，包括冠状动脉收缩，从而使血压升高，心肌缺血缺氧；同时收缩全身小血管，导致心脏负荷加重；本实验应用Pi舌下静脉注射，对大鼠造成急性心肌缺血的模型，观察心电图、心肌酶、过氧化物的变化，该模型复制方法简便，广泛用于筛选抗心肌缺血药物的研究。近年来随着心肌缺血损伤机制研究的深入，发现大量氧自由基生成及脂质过氧化物反应增强是心肌缺血损伤的主要机制之一。超氧化物歧化酶(SOD)是机体清除氧自由基的重要酶类，对机体的氧化平衡起着至关重要的作用。SOD能清除超氧阴离子，保护细胞免受损伤，其活力的高低常间接地反映了机体清除自由基的能力，当心肌受损时，可导致SOD活性的降低。测试丙二醛的含量常常可以反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映细胞损伤的轻重，本实验证明消心痛组以及各丹参滴丸剂量组(天然冰片、合成冰片)均能够明显增强SOD的活性，降低MDA的含量，从而对心肌发挥保护作用。磷酸肌酸激酶(CPK)以及乳酸脱氢酶(LDH)在心肌损伤时因缺血后细胞膜损伤而释放入血内，故可作为观察心肌缺血的指标，两