生物化学教学课件：实验四 血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定_第1页
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文档简介

【目的要求】1、掌握丙氨酸氨基转移酶测定的基本原理。2、学习酶活性的测定方法。3、了解丙氨酸氨基转移酶在临床诊断中的意义。实验四血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定【实验原理】

1、取四支试管，标号，按下表操作（单位：mL)

标准管标准空白管测定管测定空白管丙酮酸标准液0.1———新鲜血清--0.10.1底物液0.50.50.5-

0.1mol/L磷酸缓冲液，pH=7.4—0.1——

混匀后，前三管37℃水浴准确保温30min

—2,4-二硝基苯肼0.50.50.50.5底物液———0.5

混匀后，37℃水浴准确保温20min0.4mol/LNaOH5.05.05.05.0

2.静置10min，在520nm下比色，以蒸馏水校正零点，读取各管管的吸光度值（A）。【计算】ＶVmax[S]

Km+[S]

＝──0.1mL血清所产生的丙酮酸数（μg）=A测定-A测定空白A标准-A标准空白×10本法ALT活性单位定义是：每mL血清在pH=7.4，37℃条件下与底物作用30min，每生成2.5μg丙酮酸为1单位(U)。ALT活力单位（u)=0.1mL血清所产生的丙酮酸数（μg）2.5×10

正常人各组织GOT及GPT活性(单位/克湿组织)血清转氨酶活性，临床上可作为疾病诊断和预后的指标之一。【临床意义】【思考题】1.血清中谷丙转氨酶的测定有何临床意义？

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