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文档简介
复习提问:1、基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过和等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。2、基因工程中的限制酶:来源、作用和结果。3、基因工程中的针线:种类、来源、作用。4、基因工程中的运载体:种类、特点。体外DNA重组转基因DNA分子水平上ATCATGGCTT
A
ADNA连接酶CGCTT
A
AGAATTDNA聚合酶基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定第一步:目的基因的获取1、目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因2、方法:1)、人工合成2)、从基因文库中获取3)、利用PCR技术扩增(基因比较小,序列已知)基因文库基因组文库部分基因文库--如:cDNA文库聚合酶链式反应mRNARNA-DNA杂合双链单链DNA双链DNA反转录法获取目的基因的过程逆转录酶DNA聚合酶人工合成目的基因目的基因的mRNA杂交双链(单链RNA/单链DNA)单链DNA反转录酶DNA聚合酶双链DNA(目的基因)DNA合成仪人工合成目的基因根据已知的氨基酸序列合成DNA法:蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列基因的脱氧核苷酸序列推测推测目的基因化学合成基因文库
基因组文库部分基因文库(如:cDNA文库)基因文库?将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库从基因文库中获取目的基因从基因文库中获取目的基因依据:1、基因的核苷酸序列2、基因的功能3、基因在染色体上的位置4、基因的转录产物—mRNA5、基因的表达(翻译)产物—蛋白质受体菌的整个群体包含了这种生物的全部基因基因组文库的构建模式图基因组文库与部分基因文库的关系cDNA文库的构建模式图杂交双链(单链RNA/单链DNA)单链DNA反转录酶双链DNA(cDNA)某种生物的mRNA某种酶DNA聚合酶与载体连接后导入受体菌贮存,组成cDNA文库原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区启动子终止子内含子外显子
启动子终止子真核细胞的基因结构非编码序列转录转录mRNA翻译多肽链初始mRNA剪接成熟mRNA翻译多肽链出核孔原核、真核基因表达比较启动子
.VS.起始密码/终止子
.VS./终止密码存在分子:作用:DN
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