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文档简介
感染性疾病实验室诊断
LaboratoryDiagnosisofInfectiousDiseases一般实验检测病原学检测WBC常规检查直接显微镜检查C-反应蛋白(CRP)分离培养和鉴定血清降钙素原(PCT)病原体核酸检测体温病原体抗原与抗体检测
代谢产物毒素等检测体外抗菌药物敏感试验(一)直接显微镜检查(形态与结构检查)
1.染色标本检查法
了解病原体的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体2.不染色标本检查生活状态下细菌的动力及运动状况3.直接电镜检测EM免疫电镜技术IEMHAVparticlesfoundinfecalextractsbyimmunoelectronmicroscopy
高倍暗视野显微镜下悬滴米泔样粪便,观察到来回穿梭似流星样运动的细菌(二)分离培养和鉴定
分离培养是微生物学诊断的金标准,是最可靠的传统诊断技术临床意义:1.明确感染病原体2.为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结果药物敏感试验标本培养特征形态特征生化试验血清学试验毒力试验普通琼脂平板?血平板?选择培养基?1.细菌的分离培养和鉴定一)病毒分离培养
1.动物接种2.病毒的分离与鉴定2.鸡胚培养卵黄囊接种、绒毛尿囊膜接种尿囊接种及羊膜腔接种敏感动物合适部位3.组织细胞培养:
目前培养病毒应用最广的方法
(1)原代和次代细胞培养
(2)二倍体细胞培养
(3)传代细胞培养
识别病毒在培养细胞中增殖
病毒在培养细胞中增殖的指标
1)细胞病变:细胞病变效应(CPE)、包涵体
2)红细胞吸附(hemadsorption)
细胞病变效应(CPE):
病毒感染细胞后引起的细胞病变,可出现细胞圆缩、裂解或细胞肿大、数个细胞融合成多核巨细胞等。二)病毒鉴定Cytopathiceffect(CPE)ofprimarysevereacuterespiratorysyndrome–associatedcoronavirusstrain48h
72h
36h
N
常用鉴定试验:中和实验virus常用鉴定试验:血凝抑制实验红细胞凝集抑制(HI)试验原理:病毒病毒(特异性抗体)
++
红细胞红细胞凝集不凝集血凝现象血凝抑制现象
(三)真菌的分离培养
-常用培养基沙保(Sabourud)培养基含4%葡萄糖1.0%蛋白胨pH4.0~6.0,用于真菌培养。大多数真菌营养要求不高,在沙保氏培养基,22~28℃生长良好。大多于1~2周出现典型菌落。真菌的菌落有两种:酵母型菌落和丝状菌落酵母型菌落丝状菌落(三)病原体抗原与抗体的检测病原体抗原成分的检测:早期诊断现症感染特异性IgM:
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