洁净区(室)沉降菌测试标准操作规程

干净区〔室〕沉降菌测试标准操作规程干净区〔室〕沉降菌测试标准操作规程14页干净区〔室〕沉降菌测试标准操作规程起草人起草日期颁发人发放部门审核人审核日期生效日期药检室批准人批准日期修订日期文件编号文件名称一、目的：建立一个干净区文件编号文件名称二、范围：干净室和干净区，无菌室或局部空气净化区域〔包括干净工作台〕的沉降菌的测试和环境的验证。三、责任：药检员、药检室负责人。活微生物数，并以此来评定干净室〔区〕的干净度。仪器仪器包括：a〕培育皿；b〕培育基：大豆酪蛋白琼脂培育基；c〕恒温培育箱；d〕高压蒸汽灭菌器。培育皿一般承受φ90mm×15mm规格的培育皿。培育基按培育基要求加水，加热溶化后，分装，灭菌，冷却至约60℃，在无菌操作要求下倾注约20mL至无菌平皿〔φ90mml))中。加盖后在室温放至凝固。制备好的培育基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周为宜或按厂商供给的标准执行。恒温培育箱必需定期对恒温培育箱进展校验。测试步骤测试前培育基外表必需严格消毒。将已制备好的培育皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个翻开培育皿盖，使培育基外表暴露在空气中。静态测试时，培育皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培育皿暴露时间为不大于4h。全部采样完毕后，将培育皿倒置于恒温培育箱中培育。承受大豆酪蛋白琼脂培育基〔TSA〕配制的培育皿经采样后，在30℃~35℃培育箱中培育，时间2d。每批培育基应有比照试验，检验培育根本身是否污染。可每批选定3只培育皿作比照培育。菌落计数用肉眼对培育皿上全部的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5~10倍放大镜检查，有否遗漏。2222个以上菌落计数。留意事项测试用具要作灭菌处理，以确保测试的牢靠性、正确性。实行一切措施防止人为对样本的污染。对培育基、培育条件及其他参数作具体的记录。由于细菌种类繁多，差异甚大，计数时一般用透射光于培育皿反面或正面认真观看，不要漏计培育皿边缘生长的菌落，并须留意细菌菌落与培育基沉淀物的区分，必要时用显微镜鉴别。采样前应认真检查每个培育皿的质量，如觉察变质、破损或污染的应剔除。测试时间在空态或静态测试时，测试宜在净化空气调整系统正常运行时间不少于30min后开头，或在生20min自净后开头。在动态测试时，则须记录生产开头的时间以及测试时间。沉降菌菌落数计算采样点数量及其布置mm2干净度级别注：对于100级的单向流干净室〔区，包括100级干净工作台benc，面积指的是送风口外表积；对于10000级以上的非单向流干净室〔区，面积指的是房间面积。10010000100000300000<102~3222≥10~<204222≥20~<408222≥40~<10016422≥100~<200401033≥200~<400802066≥400~<1000160401313≥1000~<20234001003232≥20238002006363采样点的位置〕工作区采样点位置离地0.8m~1.5m左右〔略高于工作面b〕可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。c〕2两点承受左右摆布，三点承受左中右摆布。采样次数每个采样点一般采样一次。采样留意事项对于单向流干净室〔区〕或送风口，采样器采样口朝向应正对气流方向；对于非单向流干净室〔区，采样口向上。布置采样点时，至少应尽量避开尘粒较集中的回风口。采样时，测试人员应站在采样口的下风侧，并尽量少走动。应实行一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。培育皿在用于检测时，为避开培育皿运输或搬动过程造成的影响，宜同时进展比照试验，每次或每个区域取1箱内培育，结果应无菌落生长。记录测试报告应包含以下内容：a〕测试者的名称和地址，测试日期；b〕测试依据；c〕被测干净室〔区〕的名称；d〕测试结果；包括全部统计计算资料。结果计算用计数方法得出各个培育皿的菌落数。每个测点的沉降菌平均菌落数的计算，公式为：=M1+M2……M〕/式中：M—平均菌落数；M1—1号培育皿菌落数；M2—2号培育皿菌落数；Mn—n号培育菌落数；n—培育皿总数。结果评定每个测点的沉降菌平均菌落数必需低于所选定评定标准中的界限。在静态测试时，假设某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。干净室〔区〕沉降菌技术要求干净度级别干净度级别沉降菌/皿，0.5h100≤110000