中药合剂振明正生对k562、cn1和p3的抑制作用

中药合剂振明正生对k562、cn1和p3的抑制作用

将人肿瘤细胞移植到裸鼠，建立了人肿瘤细胞移植小鼠的不同模式，并使用该模型观察药物对肿瘤的抑制作用。该方法已广泛应用于肿瘤实验治疗和药物效应研究。本研究分别建立了人白血病、鼻咽癌和胰腺癌三个裸鼠移植瘤模型,观察中药合剂“振明正生”对肿瘤的抑制作用。1材料和试剂1.1材料表面1.1.1藏红花等5种植物属中药合剂“振明正生”由北京立国之路科技有限公司提供。主要成分为:藏红花、西藏秦艽、昆明鸡血藤、千里光、黑胡桃、啤酒花、诃子、臭草等(批号20071018,规格100ml/瓶)。1.1.2肿瘤细胞系统人白血病细胞系K562、人鼻咽癌细胞系CN1和人胰腺癌细胞系P3均为中国医学科学院血液学研究所病理细胞库保存并提供。1.1.3常规培养试剂BALB/c裸鼠购自中国医学科学院实验动物研究所。常规培养试剂:1640培养液和胎牛血清(美国GIBCO公司)。铯源照射装置(加拿大NORDION公司)。1.2实验方法1.2.1胎牛血清培养组三株肿瘤细胞系均采用RPMI1640培养液,含10%胎牛血清;37℃,含5%CO2的二氧化碳孵箱培养。贴壁细胞传代用常规0.25%胰蛋白酶液消化传代。1.2.2肿瘤细胞毒性检测BALB/c裸鼠4-5周龄,雌性。全身照射3.3Gy,于照射当天皮下接种肿瘤细胞,2×106/只。分成实验组(或实验组高剂量组、低剂量组)和对照组,每组6只裸鼠。1.2.3分组和给药时间接种后24小时开始给药,实验组口服中药合剂ZMZS,0.2ml/只,每天一次;对照组口服生理盐水0.2ml/只,每天一次;实验组连续给药四周。实验高剂量组:口服中药合剂ZMZS三倍浓缩溶液,0.2ml/只,低剂量组:口服中药合剂ZMZS,0.2ml/只。1.2.4肿瘤体积计算每周用游标卡尺测量实验组和对照组动物肿瘤大小,肿瘤体积按照下列公式计算:V=1/2长径×短径2。肿瘤生长抑制率=(对照组肿瘤体积-实验组肿瘤体积)/对照组肿瘤体积1.3统计方法两组实验采用t检验,两组以上实验采用方差分析,Q检验进行统计检验。2结果2.1组患者给药后三组肿瘤抑制率的比较经过三至四周治疗后,实验组裸鼠肿瘤体积明显小于对照组,经统计处理有显著性差异。给药后三周肿瘤抑制率低剂量和高剂量分别为43.6%和70.3%;给药后四周分别为44.6%和69.1%(表1和图1)。2.2给药后2周肿瘤抑制率经过三至四周治疗后,实验组裸鼠肿瘤体积明显小于对照组,经统计处理有显著性差异。给药后第二周实验组肿瘤抑制率为38%;给药后第三周为65.4%和给药后第四周为70.8%(表2和图1)。2.3两组患者给药后肿瘤抑制率比较经过三至四周治疗后,实验组裸鼠肿瘤体积明显小于对照组,经统计处理有显著性差异。给药后第二周实验组肿瘤抑制率为72.3%;给药后第三周为57.6%和给药后第四周为73.5%(表3和图1)。3中药复方生物制剂的复配中药复方抗肿瘤是多成分、多途径产生抗肿瘤作用,其不良作用低,能提高机体免疫力,不易产生耐药性。中医治疗肿瘤的理论基础,“清热解毒、活血化瘀、软坚散结、扶正赔本”,通过近年来现代医学的实验证明,主要包括调节机体免疫功能、调节肿瘤细胞生命周期、逆转肿瘤多药耐药性、直接细胞毒作用、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤细胞黏附与浸润转移、调节细胞信号传导、阻断致癌和抗突变作用等途径发挥抗肿瘤作用。中药方剂的特点是:“药有个性之特长,方有合群之妙用”,以配伍为特色的中药复方有数千年的经验积累,合理配伍可增效减毒。复方中各味中药所含成分往往多达几十种,其疗效的物质基础包括小分子化合物(包括挥发油、生物碱、黄酮类、皂甙类等)及生物大分子(肽、蛋白及多糖等)。活性物质群通过多靶点、多途径、多因素整合发挥作用。如复方黄黛片用于治疗粒细胞白血病,该方主要成分是四硫化四砷、靛玉红和丹参酮IIA,研究发现三药联合可显著增强硫化砷引起的癌蛋白降解。随着分子生物学和分子药理学发展抗肿瘤药物的作用机制研究有显著提高,如菊花含有黄酮类和挥发油成分能通过细胞毒作用、阻滞细胞周期、抑制肿瘤细胞生长,诱导肿瘤细胞凋亡。白花蛇草中的黄酮类化合物、甾醇类化合物、三萜类化合物和多糖等成分诱导细胞凋亡提高免疫功能。三七所含皂甙类成分,可直接抑制肿瘤细胞生长转移,促癌细胞凋亡,诱导癌细胞分化,逆转肿瘤细胞多药耐药。半枝莲、丹参、莪术、人参皂甙能下调血管内皮生长因子的蛋白表达,有效抑制肿瘤血管生成。川芎嗪、苦参对肿瘤细胞与内皮细胞的黏附有明显的抑制作用,减少肿瘤转移。将人肿瘤细胞植入免疫缺陷小鼠体内,建立人肿瘤细胞裸鼠模型,利用该模型便于观察药物对人类肿瘤的疗效,尤其适合于中药复方不同剂型药物的实验研究。中药合剂ZMZS的组成药材均是无毒可食性植物,急性毒性实验证明中药合剂ZMZS是无/低毒