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文档简介
绪论组织学与胚胎学histologyandembryology一、组织学与胚胎学的研究内容组织学(histology)与胚胎学(Embryology)是医学课程中一门基础学科。组织学概念:着重于研究人体的微细结构及其相关功能的关系。胚胎学概念:着重于研究个体发生与生长发育及其发育机制的律。组织学
(histology)定义:组织学是借助于显微镜观察人体微细结构及其相关功能的科学。研究内容:人体的组织是由细胞和细胞间质发育分化形成的,而器官系统则又是由几种不同组织发育分化而成。因此组织学的研究内容包括:细胞、组织和器官系统三部分。细胞(cell)定义:是人体结构和功能的基本单位,是一切生物体新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态学基础。形态各异、大小不等:人体中有许多形态各异、大小不同的细胞,参与机体的各种机能活动。相互调节、相互协同:各种细胞在机体内相互调节、相互协同,以维持整体的生命活动。组织(tissue)形成:是在胚胎发育时期形成的。组成:由一些形态相似、功能相近的细胞和细胞间质所组成。分类:由于细胞的特性不同,机体内的组织也相应分为:上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。器官和系统
(organandsystem)形成:是在胚胎发育的早期由几种不同的组织发育、分化和互相结合所形成。组织特征:成体的各器官、系统分别具有其微细结构的组织特征,执行着特定的功能。组织学研究内容:细胞(cell)细胞间质(intercellularsubstance)组织(tissue)上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统人体胚胎学研究内容:受精卵胚胎儿(前8周)(9~38周)胚胎早期发生胚胎学
(embryology)在医学中称人体胚胎学(humanembryology)定义:是研究人体发生、生长发育及其发育机制的科学。研究内容:生殖细胞形成、受精、卵裂、植入、三胚层形成与分化、胎膜与胎盘、先天性畸形等。二、组织学与胚胎学在医学中的地位是医学基础课程
与解剖学、病理学、生理学、生物化学、免疫学有密切的联系。
为妇产科学、男性学、生殖工程学、儿科学等临床学科提供了必要的基础。
近代生物学和基础医学的迅速发展,各学科的内容互相渗透、互相推动、紧密相关。三、组织学与胚胎学的研究方法组织学与胚胎学的研究主要涉及到两个方面:即显微镜和标本。显微镜包括:光学显微镜(lightmicroscopy,LM):电子显微镜(electronmicroscopy,EM):光学显微镜:
分辨率为0.2μm,放大倍数约为1000倍;电子显微镜:分辨率为0.2nm,比光镜高1000倍,电镜观察的结构,通常称超微结构。计量单位:毫米(mm)、微米(μm)和纳米(nm)。(一)一般光学显微镜技术
光学显微镜观察组织标本(切片)是最常用的组织学研究方法。1、标本的制作:
组织学的标本制作比较复杂,基本有以下步骤:取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等。取材、固定:取材迅速,并及时用固定液(fixative)固定(fixation)。常用固定液为甲醛、乙醇等,它们可以使蛋白质迅速凝固,防止其分解和变性。脱水、包埋、切片:材料需经乙醇或丙酮脱水;包埋在石蜡或火棉胶内;切片厚约5-10μm。染色:染色后可在显微镜下观察。2、苏木精、伊红染色常规染色-苏木精(hematoxylin)、伊红(eosin)染色(简称H.E染色)技术:苏木精:是蓝色的碱性染料,可将细胞核和细胞内的某些物质染成蓝紫色;伊红:是红色的酸性染料,可将细胞质染成粉红色。对碱性染料亲和力强的称为嗜碱性(basophilia)对酸性染料亲和力强的称为嗜酸性(acidophilia)对两种染料亲和力都不强称中性(neutrophilia)一般光学显微镜(lightmicroscope,LM)技术HE染色:苏木精(Hematoxylin)伊红(Eosin)染色碱性染料将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝色酸性染料将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色细胞核中的DNA、RNA,细胞质中的RNA细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网)SamplingfixedembeddedstainingH.E染色标本甲苯胺蓝(toluidine)染色技术甲苯胺蓝:是蓝色的碱性染料。将细胞内、外的某些物质染成紫红色。这种染色现象称异染性(metachromasia)。银染标本3、硝酸银、氯化金染色技术硝酸银、氯化金颗粒可附着在细胞结构的表面而呈棕黑色或黄色4、冷冻切片技术
(frozensectionmethod)为避免细胞、组织内的某些物质不被固定液所破坏,又要使组织变硬,便于将其切成薄片,同时又要快速得到切片,可将获取的新鲜组织立即投入液氮(-196℃)内快速冻结,然后用恒冷箱切片机(cryostat)制成冷冻切片(frozensection)
。这种方法制片迅速,细胞内酶活性保存较好,常用于酶组织化学染色。冷冻切片机除切片外,还有其他处理组织的方法:铺片(Wholemount)用于很薄的组织,如肠系膜磨片(Groundsection)用于很坚硬的组织,如骨和牙涂片(Smear)用于液态组织,如血液,精液和唾液其他技术(二)电子显微镜技术透射电子显微镜扫描电子显微镜1、透射电子显微镜
(transmissionelectronmicroscope)
透射电镜观察的组织须用戍二醛或锇酸固定,树脂包埋,切厚50~80nm的超薄切片,再经铅盐等重金属盐染色后镜下观察。电镜下所见结构称超微结构(ultrastructure),超微结构被金属所染部位在荧光屏上显得暗,图象较黑,称为电子密度高;反之则称为电子密度低。2、扫描电子显微镜技术
(scanningelectronmicroscope)
扫描电子显微镜技术要观察的组织不需制成切片。固定后的标本,在其表面喷镀金,在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构,如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。(三)一般组织化学组织化学(histochemistry)方法:
是利用化学试剂与组织细胞内的某些物质呈现化学反应,在局部形成有色沉淀物,通过显微镜观察而对组织细胞内的化学成分进行定位、定性和定量的研究。糖原,例如:过碘酸希夫反应,简称为
PAS反应(periodacidSchiffreaction)。该方法是显示细胞内糖原或多糖的一种方法。肝脏的PAS染色(四)酶组织化学方法
酶组织化学方法也可显示酶的活性,各种不同的酶有不同显示方法。一般来说,是将组织切片在某种酶底物中温育,而后检出反应产物,即可知酶的存在。
(五)免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法a.
待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen),通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合,然后显示标记物,在原位产生不溶有色的反应产物,最后用显微镜观察。b.
2种基本染色法:直接法:第一抗体被标记。间接法:第一抗体也被看作抗原,而第二抗体被标记。因为信号被放大,因此更加敏感。免疫组化染色免疫荧光(六)放射自显影(Autoradiography)
给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如I125等,间隔照相,从而追踪该物质代谢途径。(七)细胞或组织培养技术
(cellortissueculture)将人体或动物的活细胞、活组织在体外培养,称细胞或组织培养(cellortissueculture)
。细胞在体外生存,必需具备适宜的条件,包括营养、O2和CO2比例、渗透压、pH值、温度和湿度。体外培养细胞,可人为的给以各种不同条件,研究它们对细胞的分裂、分化、结构和功能等的影响,并可用显微电影等记录细胞的动态变化。细胞培养四、组织学与胚胎学学习方法
组织学与胚胎学是一门以形态结构为主的学科,许多结构不要死记硬背,而是在掌握学习方法的基础上通过观察、分析、比较,然后再记忆。这种联系既不会感到枯燥而又能认识深刻。形态与机能的结合形态结构总是与一定的机能密切相关。神经细胞有细长突起的结构特点,以传递神经冲动;红细胞含丰富的血红蛋白,则具有结合和携带氧的功能;腺细胞具有丰富的内质网和发达的高尔基复合体,能合成分泌物。总之,结构与功能有着密切的联系。断面和立体的关系在显微镜下看到的组织切片,所见到的形态都是结构断面的形态。一个细胞由于所切的部位不同,在有的断面可见细胞核,在有的断面没有细胞核。又如身体内许多管状的器
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