五指毛桃水煎液对大黄型脾虚模型小鼠补水作用的研究

五指毛桃水煎液对大黄型脾虚模型小鼠补水作用的研究

第五指毛桃是中国南方常用的中药。它被称为“五爪龙”、“五指荣”和“土北尖”。桑科高音的根被用作药物。根据广东省的中药标准，五指毛桃甜、微温，具有益气健脾、祛痰、除湿、舒筋活络的功效。用于治疗肺虚痰喘、脾胃气虚、肢倦无力、食少腹胀、水肿、带下、风湿痹痛、腰腿痛等症。此外五指毛桃还可以作为食用,其根煲汤香味浓厚,在民间有广泛的应用,其应用历史悠久,保健作用广为认可。本研究通过对大黄型脾虚模型小鼠的实验研究来探讨五指毛桃补脾益气方面的药理作用,为临床应用提供参考。1材料表面1.1医药大学第一附属医院药物制剂室提供五指毛桃药材(产地为广东省河源市,由广州致信公司中药饮片厂提供,批号为070402,由广州中医药大学专家鉴定为桑科榕属植物粗叶榕的根),五指毛桃水煎液[广州中医药大学第一附属医院药物制剂室提供,批号:070523,规格:150.0g生药/100mL。按临床成人日用量50g生药(0.83g/kg体重),实验设高、中、低3个剂量组,按体表面积折算为临床日用量的4、2、1个等效剂量]。生大黄(广州市药材公司中药饮片厂生产,生大黄水煎液(取生大黄加7倍水浸泡0.5h后,煮沸25min,滤过,药渣再加5倍水煮沸15min,合并滤液,浓缩至100%备用)。心得安(天津利生制药股份有限公司,批号:20060204,规格:每片10mg)。1.2实验动物及专利NIH小鼠(SPF级),210只,雌雄各半,由广州中医药大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(粤)2007-01。2方法2.1造模期间小鼠的典型症状大黄型脾虚造模法(苦寒泻下法):取体重18~22gNIH小鼠,每只以1mL100%大黄水浸煎液灌胃,每天1次,连续8天造模,造模期间可见动物出现纳呆、消瘦、体重下降、泄泻、四肢无力、体温偏低等脾虚证症状。2.2u3000小鼠资产过氧试验选用体重为18~22g的NIH小鼠90只,随机分为6组,分别为空白对照组、模型对照组,五指毛桃高、中、低剂量组,心得安组。给药方法为灌胃给药,给药时间为7天,每天灌胃1次,末次给药后30min,按常压耐缺氧实验法,将各组小鼠逐一装入统一直径、长度,装有钠石灰(7g)的玻璃管中,加盖密封,瓶盖周围涂以凡士林,以保证密封。观察记录各鼠缺氧存活时间。然后将死亡小鼠,按免疫器官重量法,剖开小鼠腹部及胸部,小心剪取胸腺和脾脏,用电子天平称重。2.3灌胃灌胃后小鼠在低温和10的水文活动试验选用18~22gNIH小鼠55只,随机分为5组,分别为空白对照组、模型对照组,五指毛桃高、中、低剂量组,给药方法为灌胃给药,造模成功后小鼠禁食12h后给药,给药时间为7天,每天灌胃1次,末次给药后1h,按小鼠游泳实验法,测试小鼠在负重(体重的10%)的状态下,在低温(10℃)冰水中的游泳时间,以观察药物对脾虚证模型小鼠抗应激能力的影响,以自落水开始至鼻孔沉下水面所需时间为游泳时间。2.4毛桃高、中、低剂量模型实验法选用18~20gNIH小鼠65只,其中13只作为正常对照组,另52只按大黄型脾虚造模法实验,造模的第1天,即将脾虚小鼠随机分为4组,分别为模型对照组与五指毛桃高、中、低剂量组,按体重增长实验法称量体重后,灌胃给药,每天1次,连续7天,正常对照组与模型对照组灌服等量的蒸馏水,末次给药后1h,称量体重,计算体重增长或降低百分数。2.5统计方法3结果3.1心得安对小鼠优化耐对比的影响见表1。模型对照组小鼠缺氧存活时间少于正常对照组(P<0.05)。与模型对照组比较,心得安组和五指毛桃高、中剂量组小鼠的常压耐缺氧存活时间均延长(P<0.01,P<0.05),低剂量组的耐缺氧存活时间差异无显著性意义(P>0.05)。3.2对小鼠胸径和脏器重量的影响见表2。与模型对照组比较,五指毛桃高剂量组模型小鼠胸腺重量增加(P<0.05),其余各组模型小鼠胸腺和脾脏重量均回升,但无统计学意义。3.3低温状态下的游泳时间见表3。高剂量的五指毛桃可显著延长脾虚证模型小鼠在低温状态下的游泳时间(P<0.05),提示五指毛桃对模型小鼠有抗寒抗疲劳作用。3.4模型小鼠体重的增加见表4。五指毛桃高、中、低3个剂量组与模型对照组比较,模型小鼠体重均增加(P<0.01)。表明五指毛桃对大黄型脾虚小鼠体重有一定的增长作用。4补骨脂素及免疫作用五指毛桃,民间用作药物和保健品历史悠久,具有益气补虚、行气解郁、壮筋活络、健脾化湿、止咳化痰等功效,主要用于肝炎、慢性支气管炎、食欲不振等。对五指毛桃化学成分的研究表明,主要含有丰富的多糖、生物碱、香豆素等生物活性物质[4~5]。分离鉴定出的补骨脂素为呋喃香豆素类化合物,具有抗菌、抗病毒、抗凝血、抑制肿瘤、免疫调节等作用,并对红细胞系统的造血有一定的促进作用。有文献报道证明补骨脂素为五指毛桃的主要活性成分之一,是否为补益作用的活性成分有待进一步研究。脾胃虚弱临床表现为病程较长,平素食欲不振、面色萎黄、神疲倦怠、形体瘦弱等方面。而应激是机体在外界环境剧烈刺激下出现的综合应答状态,包括精神、神经、内分泌、免疫等各方面的反应。疲劳、缺氧、缺血是常见的3种应激原,通常作为反映药物抗应激能力的重要指标。体重可作为药物促进生长发育的一个指标,也常作为从总体上评估药物补益作用的综合指标。实验结果表明,五指毛桃可使处于应激状态的脾虚小鼠耗氧量降低,使机体体力增强,对心脑等重要脏器具有保护作用,可使脾虚小鼠免疫器官及体重有一定的增长。存在的问题是对于游泳时间和免疫器官的重量的影响,中、低剂量组显示无效,对于耐缺氧低剂量组无效,分析原因一是用药时间较短,脾虚在临床中往往表现为一种慢性疾病,需要长时间的治疗;二是每天给药次数不够,按照临床常规使用为