DB51∕T 2410-2017 应用微卫星DNA标记亚洲黑熊个体司法鉴定技术规范

61DB51 51/T

2410—2017

DNA

标记亚洲黑熊个体司法鉴定技术规范2017

2017

四川省质量技术监督局

DB51/T

2017目 次

...............................................................................

II

范围

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规范性引用文件

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术语、定义和缩略语

................................................................

PCR

.....................................................

DNA

的提取与检测..................................................................

.............................................................

基因分型

..........................................................................

个体识别

..........................................................................

附录

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DB51/T

2017前言本标准按

GB/T

第1部分：标准的结构和编写规则》的规定编写。本标准主要起草人：靳伟

毛毳

夏云

DB51/T

2017应用微卫星

DNA

标记亚洲黑熊个体司法鉴定技术规范

GA/T

383-2002SN/T

1193-2003NY/T

1673-2008

Microsatellite

tandem

repeats，STR）或简单重复序列（Simple

repeats，SSR）。在个体间重复次数发生变化的多态性微卫星位点，

sample

reaction,PCR

DNA Microsatellite

specific

primersDB51/T

2017用于亚洲黑熊微卫星DNA分子鉴定选用的一套微卫星引物。具有多态性、稳定性、重复性等综合特

把取回样品用蒸馏水洗净后，用标准的SDS变性、蛋白酶K消化和酚／氯仿抽提方法提取总DNA，具体操作参照《分子克隆实验指南

A260A2801.8–2.0

10

以上，方可正常进行后续实验。

DB51/T

2017

50

s,

55℃-65℃（根据不同的引物确定）退火45s,

50

s,

55℃-65℃（根据不同的引物

当PCR扩增完成后，取PCR产物5μL，经1.5%-2%琼脂糖凝胶电泳检测，如电泳条带清楚、片段大小

用附录A中16个微卫星标记检测，获得待测个体在这些位点的等位变异数据，利用这些数据进行个

DB51/T

2017当两个样品的微卫星标记分型结果中只有一个标记差异时，对出现差异的位点重复PCR扩增和基