肉制品中的微生物检测-肉制品中菌落总数的测定

接种及培养系列稀释一接种培养二目录页食品中菌落总数测定程序步骤接种及培养1.系列稀释：用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中，振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。

25ml1ml检样225ml生理盐水9ml生理盐水食品中菌落总数测定程序步骤接种及培养2.接种培养：选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液，吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，作空白对照。将46℃的平板计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。凝固后的平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。菌落计数菌落总数的计算方法一菌落总数的报告二目录页菌落总数的计算方法一1.一个稀释度菌落数在计数范围内2.两个连续稀释度菌落数在计数范围内3.所有稀释度菌落数均大于300CFU4.所有稀释度菌落数均小于30CFU5.所有稀释度均无菌落生长6.所有稀释度均不在30～300CFU之间食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的计算方法1.只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌落总数结果。稀释度及菌落数空白对照菌落总数/[cfu/g（mL）]报告方式/[cfu/g（mL）]10-110-210-3多不可计120，12425，28

0

122001.2×104食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的计算方法2.有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内：稀释度及菌落数空白对照菌落总数/[cfu/g（mL）]报告方式/[cfu/g（mL）]10-110-210-3多不可计246，25045，49

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268182.7×104食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的计算方法3.所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU：对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。稀释度及菌落数空白对照菌落总数/[cfu/g（mL）]报告方式/[cfu/g（mL）]10-110-210-3多不可计多不可计320

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3200003.2×105食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的计算方法4.所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU：应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。稀释度及菌落数空白对照菌落总数/[cfu/g（mL）]报告方式/[cfu/g（mL）]10-110-210-328121

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2.8×102280食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的计算方法5.所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长：以小于1乘以最低稀释倍数计算。稀释度及菌落数空白对照菌落总数/[cfu/g（mL）]报告方式/[cfu/g（mL）]10-110-210-3000

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<10<1×10食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的计算方法6.所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU～300CFU之间：其中一部分小于30CFU或大于300CFU时，则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。稀释度及菌落数空白对照菌落总数/[cfu/g（mL）]报告方式/[cfu/g（mL）]10-110-210-3多不可计31015

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3.1×10431000菌落总数的报告二1.菌落数小于100CFU2.菌落数小于100CFU3.所有平板上为蔓延菌落4.空白对照上有菌落生长5.单位报告食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的报告1.菌落数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。2.菌落数大于或等于100CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。3.所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。

食品中菌落总数测定结果及报告菌落总数的报告4.空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。5.称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。稀释度及菌落数空白对照菌落总数/[cfu/g（mL）]报告方式/[cfu/g（mL）]10-110-210-3多不可计180，18440，42

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无效培养基的制作加热溶解一包扎灭菌二目录页食品中菌落总数测定程序步骤培养基的制备1.加热溶解：平板计数琼脂（platecountagar，PCA）1.1成分胰蛋白胨5.0g酵母浸膏2.5g葡萄糖1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000mLpH7.0±0.21.2制法将上述成分加于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH。分装试管或锥形瓶，121℃高压灭菌15min。或直接将干粉加于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH，分装于试管或锥形瓶。食品中菌落总数测定程序步骤培养基的制备2.包扎灭菌：121℃高压灭菌15min。无菌器材的准备检验设备的准备一无菌器皿的准备二目录页食品中菌落总数测定程序步骤无菌器材的准备1.检验设备的准备：恒温培养箱：36℃±1℃，30℃±1℃

恒温水浴箱：46℃±1℃感量为0.1g均质器振荡器菌落计数器食品中菌落总数测定程序步骤无菌器材的准备2.无菌器皿的准备：无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。无菌锥形瓶：容量250mL、500mL。无菌培养皿：直径90mm。样品的制备固体和半固体样品的制备一液体样品的制备二目录页食品中菌落总数测定程序步骤样品的制备1.固体和半固体样品的制备：固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。

食品中菌落总数测定程序步骤样品的制备2.液体样品的制备：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。菌落总数检测的方法菌落总数检测的依据一菌落总数检测的方法二目录页菌落总数的测定概述菌落总数检测的方法1.菌落总数检测的依据：食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB4789.2-2016菌落总数的测定概述菌落总数检测的方法2.菌落总数检测的方法

基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。菌落总数检测的意义菌落总数的定义一菌落总数的范围二

菌落总数检测的意义三目录页菌落总数检测的意义菌落总数的定义菌落总数的定义菌落总数（aerobicplatecount）是指食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。菌落总数检测的意义菌落总数的范围菌落总数的范围现标准规定的培养条件下所得结果，只包括一群在平板计数琼脂上生长发育的嗜中温性需氧或兼性厌氧菌的菌落总数，因此菌落总数并不表示实际中的所有微生物总数。菌落总数检测的意义菌落总数检测的意义1.作为食品被细菌污染程度即清洁状态的标志，对被检样品进行卫生学评价时提供依据。食品中细菌数量越多，说明被污染的程度就越严重，对人体健康威胁越大，即病原菌污染的可能性越大。它反映了食品加工、贮存、运输过程中是否符合卫生要求。菌落总数检测的意义菌落总数检测的意义2.用来预测食品耐存放程度或期限。一般讲，细菌数越少，食品耐放时间越长。例如用0℃保存牛肉，菌落总数为103cfu／cm2时，可保存18天，而当菌落总数增至l05cfu／cm2时则只能保存7天。食品中菌落总数测定标准（GB4789.2-2016)及解读器材的准备一培养基的制备二稀释液的准备三操作过程四计数报告五目录页菌落总数测定标准及解读菌落总数测定国标解读1.器材的准备：菌落总数测定标准及解读菌落总数测定国标解读1.器材的准备：菌落总数测定标准及解读菌落总数测定国标