实验动物医学课件

实验动物医学导言

一、引言实验动物医学（LaboratoryAnimalMedicine）J.G.福克斯B.J.科恩F.M.洛疾病诊断、治疗和预防减轻科研用动物疼痛鉴定影响动物研究的因素二、动物实验的起源与发展Aristotle(BC384-BC322)Harvey（1578-1657）Pastuer（1827-1895）300BC:“vivisection”1500-1700:physiologystudiesusingliveanimals1879:D.E.Salmon,firstvet(Salmonella)1915:S.D.Brimhall,V.M.D.employedatMayoClinic1949:AALASformed1957:ACLAMformed三、实验动物医学的教育与培训ContinuingEducationSeminars/conferences:local/nationalComparativemedicinebulletinboardJournalsAdvisoryBoards/PanelsSpecialProjectsClinicalormanagerialresearchOccupationalhealthEnvironmentalenrichmentTrainingOnthejobTrainingprogramsApprox35ACLAMapproved2-4yearsDegree/non-degreePHSorotherfundingClinical,ResearchtrainingBoardEligibility+/-Trainingprogram,publication,application四、相关法律法规对实验动物医学的影响1966年，美国（LaboratoryAnimalWelfareAct.）Mice:TransgenicsRatsRabbitsHamsters,guineapigs,otherrodentsDogs,cats,ferretsPigs,sheep,cattle(calves)Fish(zebrafish)Amphibians(Xenopus)Non-humanprimates第一章影响动物实验的因素

内源性因素外源性因素第一节内源性因素种属：反应性质的不同品系：反应强度的不同年龄和体重：性别:♀，♂生理状态：怀孕、哺乳、体温健康状况第二节外源性因素管理因素动物实验技术因素动物选择（种属及数量）：重要条件实验季节昼夜变化（体温、血糖、基础代谢率、内分泌麻醉深度：（深、浅）手术技巧减少刺激减少受伤减少出血***解决办法（如何避免）？实验药物（途径、制剂、浓度、给药量）

其他因素人员素质：职业道德和技能质量监督实验设计实验记录环境控制实验仪器R=(A+B+C)×D±E

式中：

R实验动物的总反应

A实验动物种的共同反应

B动物品种及品系特有反应

C动物个体反应（个体差异）

★D环境的影响（包括实验处理）

E实验误差遗传因素第二章小鼠常见疾病

第一节小鼠肝炎病毒感染（MouseHepatitisVirusInfections，MHV）（一）病原

冠状病毒，有囊膜、RNA病毒。

25种毒株（肠道；呼吸道）

对乙醚敏感，对热的敏感性不同。

低毒力/热稳定毒株是感染实验鼠群最严重的毒株。

可感染多种组织或细胞。（二）流行病学1.传染源2.传播途径

粪-口，直接接触，气溶胶，垂直传播；移植瘤或细胞培养物3.易感动物

小鼠。棉鼠、大鼠、仓鼠（脑内）。乳鼠易感MHV。KM42%

裸鼠34.7%BALB/c31.4%C57BL/620%NIH14.3%SSB11.6%C57BL，DBA，Nu/Nu感染易产生临床症状。（三）临床表现肝炎、脑炎、肠炎（四）病理变化肝脏表面常见有淡黄色或白色灶性坏死；感染早期有包涵体和坏死灶。脑部：脱髓鞘脑炎。肠道:常见肠绒毛坏死及多核巨细胞。肠上皮细胞合胞体肝脏坏死肝细胞合胞体（五）诊断

组织学PCR诊断血清学（六）防控MHV难以清除。如何防控？引种前检查。加强饲养管理和环境消毒。剖腹产结合屏障系统。严格监测可能隐匿病毒的生物材料。（七）对实验研究的干扰免疫健全鼠激活T细胞和巨噬细胞，引发脑炎PersistantMHV（mousehepatitisvirus）infectionreducestheincidenceofdiabetesmellitusinthenon-obesediabeticmice，SWilberzetal.,1991.减少非糖尿病小鼠产生I型糖尿病的几率

胸腺萎缩CATHERINEetal.,ThymusInvolutionInducedbyMouseHepatitisVirusA59inBALB/cMice，J.Virol,1995肝细胞吞饮功能丢失/下降。肝脏酶活性改变。诱生肝脏促凝血物质及甲胎蛋白。其他病原的易感性、抵抗力及致病性改变。免疫不健全鼠多器官坏死（肝、肺、脾、肠、脑、淋巴结和骨髓）；血清酶活、胆红素浓度改变；巨噬细胞的吞噬活性提高；加剧异种肿瘤移植排斥；肝肠、淋巴、神经和呼吸系统受影响。第二节仙台病毒感染

（sendaivirusinfection）一、概况小鼠仙台病毒感染是小鼠最难控制的疾病之一。临床表现两种病型急性型：断乳小鼠，产生呼吸道症状隐性感染：干扰实验仙台病毒感染十分普遍二、病原仙台病毒---副粘病毒科，单股负链RNA病毒，有囊膜;6种结构蛋白---NP，P，L，F，HN，M；血凝性---可凝集多种动物红细胞；繁殖---在鸡胚和多种哺乳类动物细胞系中繁殖较快，感染细胞出现合胞体。理化特性---对乙醚及热敏感，pH3.0条件下极易灭活；血清型---只有1个血清型核衣壳囊膜三、流行病学自然条件下感染小鼠、大鼠、仓鼠不同品系小鼠易感性不同易感---129/J，DBA/2抵抗---C57BL/6，SJL/J传播方式---直接接触和空气传播35-49日龄小鼠最易感四、临床症状自然感染---呈地方流行性。持续感染---断乳至42日龄小鼠。急性型---弓背、呼吸困难、眼角有分泌物，发育不良，妊娠期延长，乳鼠死亡率增高。五、病理变化上皮细胞肥大、坏死增生、鳞状化生、合胞体气管炎肺部潮红（ICAM-I）差异性六、诊断病毒分离细胞接种---BHK-21，Vero细胞鸡胚接种---羊膜腔，绒毛尿囊膜血清学检查鉴别诊断七、预防控制无SeV鼠群---建立封闭群，新引入动物须严格检验。有SeV鼠群---（1）剖腹产或引种重建（2）清除所有新生乳鼠、断乳小鼠和妊娠鼠，仅保留成年鼠。八、对实验研究的干扰（1）干扰免疫系统（2）致肿瘤细胞凋亡，干扰移植瘤建立(YasufumiKaneda.BMBreports,2011)妊娠4-5天感染---胚胎吸收11-12天感染---妊娠期延长对着床前受精卵及早期胚胎有亲嗜性--胚胎死亡（3）影响胚胎发育，对鼠类生殖繁育造成影响八、应用潜能（一）药物递送载体Zhang,Q*.,Xu,X.,Yuan,Y.,etal.IPS-1playsadualfunctiontodirectlyinduceapoptosisinmurinemelanomacellsbyinactivatedSendaivirus.Int.J.Cancer,2014，134:

224–234ZHANGQ*,YUANWF,ZHAIGQ,etal.InactivatedSendaivirussuppressesmurinemelanomagrowthbyinducinghostimmuneresponsesanddown-regulatingβ-cateninexpression.BiomedicalandEnvironmentalSciences,2012,25(5):509-516.ZhangQ*,WangZ,YuanY,etal.ImmunoadjuvanteffectsofhemagglutinatingvirusofJapanenvelope(HVJ-E)ontheinactivatedH9subtypeavianinfluenzavirusvaccine.Vet.

Immunol.

Immunopathol,2011,141(1):116-123.DaiZ,ZhangQ,WangZ,etal.HemagglutinatingVirusofJapanEnvelope(HVJ-E)CanEnhancetheImmuneResponsesofSwineImmunizedWithKilledPRRSVVaccine.BBRC.415(1):1-5,2011.GaoHui,XuXiaoShuang,ChenZeDong,ZhangQuan.InactivatedSendaiVirusInducesApoptosisinMurineMelanomaCellsbyIGF-1RDown-regulation.2013,26(12):998-1002（二）治疗肿瘤1、仙台病毒诱生IFN-β干扰SCID小鼠黑色素瘤模型建立的分子机制．2014-2016，国家自然科学青年基金（31302042）．2、HVJ-E包裹CpG新型免疫佐剂的研制与应用．2010.1-2011.12.江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室（KF0901）．3、HVJ致小鼠黑色素瘤细胞凋亡的分子机制．2014.7-2015.6．江苏省自然科学基金（BK20130445）．4、灭活仙台病毒激活DC细胞的分子机制，扬州大学创新培育基金，2012-2013.人（儿童）副流感病毒疫苗。基于仙台病毒的重组病毒疫苗。（三）疫苗开发第三节鼠痘病毒感染

（mousepoxvirusinfection）临床表现以四肢、尾、和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征，故又称脱脚病。一、概况痘病毒科，正痘病毒属,DNA病毒。Hampstead(低毒力)；Moscow（高毒力）。在鸡胚绒毛尿囊膜上生长良好。二、病原三、流行病学传染途径：直接接触（皮肤伤口）易感性(“NO”)C3H、BALB/c、DBA/2品系易感；C57BL/6和C57BL/10有较强抵抗力；症状：脚部肿胀，痘痕，精神沉郁，突然死亡四、病理学皮肤→局部皮肤、淋巴结→肝、脾→肢体末端感染持续数月，排毒约3周清除仅依赖于CD8+T细胞五、诊断

1.临床症状2.病理检查3.病毒分离4.动物接种5.血清学检查6.鉴别诊断六、预防和控制IFN-r受体类似物七、对实验的干扰IL-18结合蛋白类似物毒株毒力因子×IFN-r，NK信号通路第四节小鼠肝螺杆菌感染一、发现1994，fox2008，高正琴二、病原H.Hepaticus呈螺杆状G-，微需氧，厌氧营养要求苛刻三、流行病学感染大鼠、小鼠、仓鼠等啮齿动物

易感性,♂＞♀粪-口途径BALB/c、SCID等品系的小鼠易感

四、临床症状五、病理变化A：对照，B、C：肝细胞脂肪变性，D：肝细胞坏死，中性粒细胞浸润；E：淤血；F：肝组织中坏死灶周围炎性细胞崩解碎片。A：对照组胃，未见病变；B：胃粘膜上皮坏死脱落。伴有淋巴细胞浸润A：对照组盲肠，未见病变；B：盲肠固有层大量淋巴细胞浸润。六、诊断PCR（粪便，组织）七、对研究的干扰影响肿瘤学研究血清酶活改变（谷草）改变DC细胞表型及免疫学研究加剧细胞分化及凋亡（♂）第五节仔鼠流行性腹泻一、病原轮状病毒A型。主要发生于第1胎的哺乳小鼠，特别是14日龄以内的小鼠。EPIZOOTICDIARRHEAOFINFANTMICE(EDIM)二、流行病学粪-口，直接接触，气溶胶。10-14日龄的小鼠最为易感。C3H，易感C57BL，不易感三、临床症状腹泻、脱水、生长发育不良、腹部膨大。胃中充满乳汁，后期阻塞肛门。四、病理A：空泡B：核不明显，粉红色蛋白体五、诊断及防控病史、组化，PCR及ELISA对发病鼠群，应彻底淘汰全部小鼠及其亲代母鼠，在彻底消毒的基础上，重新引种，建立新种群。六、对研究的干扰对其他病原更易感；肠生理改变（氧化应激和抗氧化应激）；减少肠道对氨基酸的吸收，干扰营养学研究。第六节、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒Lymphocyticchoriomeningitisvirus(LCMV)一、流行病学

1.自然感染LCMV的小鼠不常见。2.传播途径

在接受肿瘤移植时，可经粘膜和破损皮肤而感染，并经尿液、唾液、奶汁甚至怀孕传播。子宫和卵巢传播仅发生于小鼠。3.易感动物

小鼠、仓鼠。人对LCMV易感。取决因素宿主因素（品系、年龄）病毒毒株接种途径接种剂量典型症状表现为持续性耐受感染---经子宫和新生鼠感染。主要表现为生长迟缓，免疫复合型肾球肾炎，伴随毛乱、消瘦、弓背、蛋白尿和腹水。二、临床症状三、病理（A）持续性耐受感染，CD8+T细胞耗竭，病毒血症，终身排毒，T细胞活性消失。免疫耐受崩溃，导致慢性疾病，形成淋巴细胞浸润和血管炎。血管炎慢性肾小球肾病（B）非耐受性感染，新生儿后期急性感染，产生病毒血症，但不排毒，感染鼠死亡或清除病毒（无症状）。（C）成年鼠感染，引发坏死性肝炎，普遍性淋巴细胞耗竭。淋巴细胞性脉络丛脑膜炎只见于脑内接种鼠。四、诊断血清学方法PCR诊断（肾脏、脾脏）五、防控a.清除感染鼠群。b.移植瘤实验前，检测移植瘤细胞。六、对实验研究的干扰在小鼠胰岛β细胞内长期存在，产生类似于2型糖尿病的代谢和病理变化。改变神经突触可塑性，影响其认知水平。中止乙肝病毒感染；引起肝炎。导致骨髓发育不良、溶血性贫血并影响行为学。改变免疫应答活性，影响细胞因子表达。抑制多瘤病毒致瘤，延缓同种异体皮肤及肿瘤移植物的排斥反应。对其他病原、内毒素、辐照更易感，改变自然发生糖尿病的时间进程。第七节、小鼠呼肠孤病毒3型感染一、概况小鼠感染Reo-3以油性被毛效应和脂肪性下痢为临床特征。病理变化主要表现肝炎、脑炎和胰腺炎。Reovirus-3(REO-3)二、病原属呼肠孤病毒科，呼肠病毒属，dsRNA。哺乳动物Reo有3个血清型，Reo-1、2、3。对乙醚、氯仿等抵抗力强。三、流行病学Reo-3宿主范围广。急性病例主要见于新生/断乳小鼠，慢性病例则见于28日龄以上小鼠。NIH小鼠易感。消化道和呼吸道水平传播。蚊子传播Reo-3可能是其呈全球性感染的原因。四、临床症状第一胎小鼠感染：表现脂肪性下痢、黄疸、消瘦、脱毛、结膜炎、油样毛皮、运动失调。五、病理变化膀胱增大、磨损肝坏死黄色肾脏六、预防控制屏障系统有助于预防感染蔓延。剖腹产是净化鼠群Reo-3感染的重要措施。Reo-3可经蚊子传播，要严格采取隔离措施，保持房舍清洁卫生。防止人传染Reo-3给小鼠。七、对实验的干扰Reo-3自然感染可使腹水移植瘤消退。Reo-3实验感染，可降低肺部对葡萄球菌的清除。抑制细胞DNA合成，诱发细胞凋亡，抑制肺癌形成。引起肺嗜中性粒细胞聚集，提高趋化因子mRNA表达水平，引发急性心肌炎。与化学治疗剂协同排除肿瘤，提高肿瘤特异性免疫力。胰淀粉酶、脂肪酶活性降低，胰蛋白酶活性升高，破坏胰岛β细胞。第八节小鼠巨细胞病毒感染

MouseCytomegalovirus（MCMV）一、概况MCMV可引起持续性感染。大鼠、小鼠、豚鼠和仓鼠均可感染。可引起胚胎感染。二、流行病学与唾液、泪液、尿液直接接触，垂直传播。BALB/c，A/J易感；C57BL10和CBA不易感。新生鼠及免疫缺陷鼠易感。三、临床症状自然感染多无症状。人工感染只出现一过性呆滞、弓背、被毛逆立等症状。成年小鼠急性感染出现血小板减少症。四、诊断血清学检查PCR病理学六、对实验的干扰改变许多生理功能（Ab，IFN，MHCI/II，NK）。神经元迁移降低，加剧同种异系皮肤移植排斥。促进造血新生细胞凋亡，形成骨髓抑制性。BALB/c小鼠血小板减少，加速心血管系统石灰化，形成抗心血管系统自身抗体。对其他病原更加易感（如静止期弓形虫成活动期）。改变胆固醇形成与人动脉易损斑块形成一致。具有超抗原特性。。封闭乙肝病毒复制，提高IFN-γ,IL-1α，IL-6，10，12的产生。第二章仓鼠疾病

一、病原第一节泰泽氏菌病

毛发样芽孢杆菌丝状G-形成孢子内壁二、流行病学仓鼠、小鼠和豚鼠。粪---口途径传播，持续数月。可经胎盘传播吗？YES：miceandguineapigsNo：hamsters三、临床症状取决于易感性，应激可加重；突然死亡，潮湿，黄色泻粪；肝脏有坏死，肠道鼓气膨胀。四、对实验研究的干扰改变杀鼠灵和甲氧苄氨嘧啶的药动学；提高肝脏乙醛酸转氨酶活性，血清IL-6，IL-12水平；仓鼠自然感染，心血管、肝肠循环、甚至淋巴网状内皮系统出现改变；对药理学产生影响；产生毒素，影响更加复杂。五、诊断防控诊断染色；鸡胚接种，血清学分析，PCR注意泰泽氏菌不能在人工培养基上生长防控细菌，抗生素？？NO严格的卫生管理减少应激清除感染鼠第二节、细胞内罗松菌

一、病原增生性回肠炎（lawsoniaintracellularis）的病原。History应激？弯曲杆菌？大肠杆菌？G-，弯曲，胞内寄生菌感染多种动物（人除外）不同宿主间病原差异极小活细胞生长二、流行病学罗松菌感染导致高致病率和死亡率。粪---口途径。胎盘传播尚未深入研究。三、临床症状广泛分布，回肠增生。水样腹泻、厌食、发育不良、瘦弱、脱水、昏睡及被毛粗乱。四、病理变化粘膜过度肥大---肠隐窝及绒毛细胞增生、融合和坏死、出血、脓肿。浆膜结节、腹膜纤维性渗出。五、对实验研究的干扰罗松菌侵袭胃肠，进入宿主细胞刺激肠上皮细胞坏死。回肠的功能?营养学研究---影响营养吸收，生长不良。对机体免疫功能产生影响。六、诊断防控PCR（肠道）染色诊断防控无有效抗生素高卫生标准较少应激过滤系统Note：有些情况下，个体会自动清除病原，但依赖于此不科学。第三节、葡萄球菌感染一、病原二、流行病学

哺乳动物隐性感染普遍，机会感染。G+，凝固酵素阳性，溶血素三、临床症状皮肤脓肿，少部分内脏器官脓肿仓鼠---皮肤破损（手术、咬伤、笼具损伤）四、病理学头部损伤常见。抵抗葡萄球菌依赖于中性粒细胞释放杀微生物制剂。巨噬细胞、抗体、细胞免疫等也起清除作用。肺巨噬细胞清除葡萄球菌的动力学不一致，仓鼠肺巨噬细胞需调理化，杀灭效率低于人和兔。黏液素加重葡萄球菌性肺炎。五、对实验的干扰释放肠毒素---超抗原。促进利什曼原虫感染早期形成病灶与类黄酮避孕药（炔雌烯醇）一起改变实验肿瘤的生长动力学。非MHC限制无严格抗原特异性极低抗原可刺激大量T细胞六、诊断防控细菌培养诊断防控抗生素消除症状，不能清除病原高卫生标准减少应激和皮肤损伤个人卫生第四节、蠕形螨一、病原

D.criceti

D.aurati

二、流行病学叙利亚仓鼠---混合感染金黄色地鼠蠕形螨有致病性---脂肪腺，毛囊直接接触，母亲至幼仔雄性比雌性易侵入三、临床症状中等痒、脱毛、碎甲四、病理学表皮发生改变；肾淀粉样病变；螨作为其他病原（皮肤真菌）的载体五、对实验的干扰生物素缺乏，可降低得病率；螨虫和糖尿病改变T淋巴细胞分化。表皮淋巴循环系统肾脏系统寿命研究营养参数研究六、诊断防控检查病灶周围毛发，镜检。诊断防控除螨剂，保持笼具清洁。防止交叉感染。10%NaOH第五节、蛲虫一、病原鼠管状线虫---最常见二、流行病学与其在自然宿主中一样。三、临床症状极少出现。四、病理学浆细胞固有膜增厚。第四章、豚鼠疾病

Guineapigdiseases第一节、支气管博代氏菌一、病原G-，β溶血不形成芽孢棒状、杆状呼吸道定居二、流行病学直接接触呼吸道气溶胶污染物幼年发病率高三、临床症状隐性感染---20%，许多豚鼠可自发清除。饮食更换、VC缺乏、温度变化、拥挤是诱因。急性潜伏期5-7天，随后发病死亡。肺炎、厌食、消瘦、被毛粗乱、体重减轻，偶见流产死产。四、病理学上呼吸道及中耳鼓泡室出现黏脓性或卡他性渗出物，腹腔前部固化，胸膜炎。化脓性支气管肺炎，失去正常细胞结构，大量纤维性渗出物。五、对实验的干扰产生坏死毒素,激活肝星状细胞形成张力纤维丝。影响外周血管。对组胺反应性增高，增加血管渗透性。调节宿主免疫反应；诱导细胞凋亡；抑制NF-kB的激活。对心血管、淋巴网状内皮、神经、生殖、呼吸和泌尿系统均有直接的影响。六、诊断防控临床症状，细菌培养。ELISA，PCR诊断防控剔除患鼠或紧急治疗。饲养管理MacConKey’sagar上呼吸道中耳鞭毛蛋白序列为引物第三节、肺炎链球菌一、病原

G+，双球菌，可形成短链状，有荚膜Sero-19最易感α-溶血链球菌抗原构造模式图核蛋白Ag荚膜蛋白质Ag多糖Ag肽聚糖二、流行病学气溶胶，感染自人类。呼吸道繁殖，与SeV混合感染，加重病情。在小鼠和大鼠也可发生感染。三、临床症状表现无精神、衰弱、脱水、神经症状、不同程度死亡；怀孕、年幼或受应激豚鼠更加易感。四、病理学纤维素性化脓或脓肿形成。肺炎球菌溶血素对耳蜗形成超微损伤。心包脓肿肺炎腹膜炎胸膜炎中耳炎肺匀浆S.pneumoniaeβ-肾上腺素能受体数量慢支主要依赖于体液免疫While,inotherhosts,C-reactiveprotein,TNF-α,pulmonarysurfactantalsoappeartoplayroles.IL-10attenuatestheresponsewithinthelungs,hamperingeffectiveclearanceoftheinfectionandshorteningsurvival.五、对科学研究的干扰可改变许多生理功能。中耳局部脂质过氧化，对耳蜗产生损伤。对心血管、肝肠、神经和呼吸系统产生损伤。六、诊断控制脓性渗出物涂片—革兰氏染色；鼻拭子---分离培养；ELISA，PCR指纹分析；中耳炎用X光照射；抗生素治疗最好清除所有感染动物。耐药严重青霉素结合蛋白2a第三节、隐孢子虫一、病原二、流行病学潜伏期4天，粪口途径感染条件致病感染数量逐渐增加三、临床表现幼年豚鼠易发病；大肠杆菌感染能加重本病；临床表现腹泻—体重减轻—衰弱—死亡。四、病理学水壶状腹部，肠道充盈液体。肠隐窝上皮细胞增生，黏膜固有层水肿。绒毛端坏死，脱落，空、回、盲肠病变更严重。营养吸收不良。前列腺素分泌减少，引起肠道损伤。p.i.3w，产生细胞免疫。五、对科研的干扰加重其他病原感染的病情。抑制对疫苗及绵羊红细胞的抗体应答。体外---引起上皮细胞凋亡，体内---永久生长受阻。激活肠磷酸酶。自然感染对肝肠、淋巴网状内皮和肠神经系统产生改变。六、诊断控制肠道刮片观察寄生虫HE染色PCR诊断重新建群第四节、豚鼠艾美尔球虫一、病原寄生于豚鼠的唯一球虫。二、流行病学易在幼鼠中流行；粪口传播；高死亡率；潜伏期11-12天；体外形成孢子，具有感染力。三、临床表现幼鼠多见（Vc缺乏鼠，或运输刺激）春季多发腹泻、脱水、厌食、弓背、体重减轻和死亡四、病理学结肠水肿、黏膜充血、点状出血，形成结节。结肠恶臭，充盈水样液体。上皮细胞充血、脱落。引起细胞免疫应答。五、对实验的干扰影响盲肠细菌和淋巴细胞群。改变葡萄糖吸收。加大应激反应。对肝肠等多个系统产生影响。六、诊断防控粪便查卵加强卫生措施重新引种第四节、维生素C缺乏一、病因学豚鼠缺乏（少）微粒体酶L-葡糖内酯氧化酶。防止葡萄糖转化为抗坏血酸下降胶原合成受损VC结构皮肤易损伤，牙齿易松动，毛细血管破裂，创伤不易愈合，关节肿大跛行。

二、临床症状第四章、兔的传染性疾病一、病原嵌杯病毒科，单链RNA病毒；成熟粒子呈球形颗粒，无囊膜第一节兔病毒性出血症（兔瘟）二、流行病学青年、成年兔发病和死亡率最高。所有毒株所造成的流行特征，临床症状，病灶基本相似。水平传播（气溶胶、直接接触、污染物、尸体）。节肢动物（苍蝇、蚊子、跳蚤）可传播。三、临床症状抽搐、四肢划动肛门周围胶冻状分泌物最急性型：突然死亡。

急性型：体温升高至41℃以上，食欲废绝，饮欲增加。死前突然兴奋，尖叫几声便倒地死亡。

慢性型：精神不振，不吃食，喜凉水，消瘦。病程2天以上，成为带毒者。四、病理学病毒在肝、小肠、脾脏复制，多器官系统衰竭和病变。典型特征是急性肝坏死。血栓、出血。膀胱积液肺脏出血肝、肾、脾重大气管至肺脏充血、潮红大量出血取代原有脾脏结构肾小管内可见玻璃样圆柱五、对研究的干扰淋巴细胞减少，血小板减少。血管内皮单核细胞凋亡。对肝肠循环、骨骼肌、造血、呼吸和繁殖系统产生影响。六、诊断防控血清学诊断（ELISA、免疫印迹、HI）诊断防控灭活苗。PCR诊断（肝脏）隔离和扑杀。双股RNA病毒呼肠孤病毒3型第二节兔轮状病毒感染一、病原二、流行病学野兔和实验兔。病毒传染性强，主要通过粪口途径传播。断奶兔易发。感染多呈亚临床。三、临床症状与宿主年龄、暴露史和其他微生物感染有关。主要是断乳仔兔。严重腹泻、厌食、脱水和高死亡率。四、病理学病毒在小肠成熟肠上皮细胞中复制。结肠明显充血、肿大和坏死。小肠充血伴随黏膜出血，盲肠充满液体。肠长绒毛变短和融合，上皮细胞功能减弱。与大肠杆菌共感染，断乳仔兔腹泻非常严重。五、对研究的干扰损害肠刷状边缘，黏膜细胞损害，离子交换功能丧失。感染具有自限性，主要依赖体液免疫。对肝肠系统和营养学研究产生干扰。六、诊断防控临床症状、病理变化、粪中检出病毒诊断防控隔离。病毒分离，抗体检测疫苗。电镜第三节兔梭菌性下痢一、病原梭状芽孢杆菌---G+内孢子兔肠毒血症的病原诸多病原血清型兔---A型二、流行病学常与其他细菌/病毒混合感染。通过粪口途径感染。断乳仔兔尤其易感。运输、抗生素治疗、饮食更换（高能、低纤维）刺激发病。破坏正常菌群三、临床症状典型特征---水样腹泻，伴随厌食和死亡。亚临床没有征兆。慢性出现厌食和体重减轻。四、病理学盲肠浆膜表面淤血块。盲肠充满液体和气体。黏膜有坏死灶和炎症，形成磨损和溃疡。产生毒素。五、对科研的干扰3-8周龄兔感染，挥发性脂肪酸产量下降。对肝肠循环产生干扰。造成人、财和物力的浪费。六、诊断防控诊断（Yonushonisandcoworkers）防控减少应激疫苗？？？玻片上鉴定出G+卷曲菌；盲肠大体或病理病变明显；厌氧条件下分离和鉴定；证实由病菌引发的盲肠、结肠毒素第四节土拉杆菌一、病原土拉杆菌，G-引起败血症宿主广致病性极强抵抗力较强（水、土壤、湿草）感染兔等多种动物二、流行病学野兔感染常见，实验兔较少、传播途径多样气溶胶食物、水苍蝇、蚊子其他三、临床症状四、病理学点状凝固坏死，肝、脾、骨髓充血。支气管肺炎，肝、脾、淋巴结出现脓肿肉芽肿病变。内毒素造成损伤。强毒株对腹腔巨噬细胞有致死性。细胞免疫。五、对科学实验的干扰血清痕量金属元素、中性脂肪、碱性磷酸酶等活性改变。呈现显著早期白血病症状。合成急性球蛋白。改变血酮---脂解。抑制肿瘤生长，减少3,4苯并芘引起的基因组失常，提高辐射抵抗力。六、诊断防控诊断（病理学、免疫组化和病原分离）防控彻底清除感染兔。血清学诊断意义不大第五节肝性球虫一、病原

---兔斯氏艾美耳球虫。二、流行病学1～3月龄兔易感且病情严重，死亡率高；成年兔？？？食入孢子化卵囊（饲料、饮水；饲养员、工具、苍蝇）。发病多在春暖多雨期。三、临床症状轻度感染---多不呈临床症状严重感染---四个阶段球虫分裂生殖导致肝损伤；胆汁郁积；代谢功能紊乱；抑制免疫反应；最终形成厌食、黄疸、腹泻或便秘，体重减轻。四、病理学肝、胆囊、管扩张，肝脏布满黄色结节。胆管增生、纤维化、淋巴细胞浸润，肝脏萎缩性坏死。轻微感染激发体液免疫和细胞免疫的产生。免疫抑制是最终致病效应。五、对科学研究的干扰提高血清β/γ球蛋白，β脂蛋白，琥珀酸脱氢酶，山梨醇脱氢酶，血红素，天冬氨酸转氨酶水平。降低血清α脂蛋白、葡萄糖、肝碱性磷酸酶活性。白蛋白/球蛋白比例下降。感染后，药动学、肝生物转化功能，胆管和泌尿系统分泌磺溴酞钠受到影响。代偿性酸中毒。用于模仿胆管硬化形成的肝病模型。六、诊断防控诊断（组化学、检查胆汁）防控卫生是关键。Note：与肠道球虫区别。第六节粘液瘤病毒感染一、病原双股DNA病毒，痘病毒科。二、流行病学野兔广泛存在，实验兔相对较少。可借助节肢动物（蚊、蚤）传播。三、临床症状取决于毒株（致瘤性；强、弱毒）和宿主。新西兰大白兔极其易感。急性病例呈现耳聋，42℃，眼睑水肿，2天死亡。5～7天眼睑水肿、下垂，肛门、生殖器及口、鼻周围发炎、水肿。狮子头形状，耳朵剧烈肿胀而下垂。后期皮肤出血，鼻炎和肺炎。后期良性经过，只在体表发生分散孤立的粘液瘤结节，萎缩破溃。四、病理学皮肤、心脏、胃肠浆膜水肿、出血。肺、肝、脾、肾、淋巴结和睾丸萎缩。病毒在皮肤DC和T淋巴细胞中繁殖。五、对科学研究的干扰免疫抑制。产生一系列蛋白：丝氨酸蛋白酶抑制因子，改善慢性炎症。IL-1β抑制因子---酶的转化。M11L（受体样表面蛋白）---调节凋亡。MT1（趋化因子结合蛋白）---阻抑急性感染期单核细胞聚集。MT2---CD4+淋巴细胞凋亡抑制剂。MT4（感染淋巴细胞的毒力因子）被保留在内质网中。MT7，改变淋巴细胞迁移，抑制IFN-γ活性，与趋化因子家族肝磷脂结合区结合，减少血管内膜增生。下调MHCI和CD4+分子介导的病毒抗原提呈，进一步证明了免疫抑制功能。病毒间存在相互作用。对心血管、表皮、繁殖、呼吸和泌尿系统产生影响。六、诊断防控（临床和病理变化，强毒株）（ELISA，IFA，CF，弱毒株）防控淘汰，引种诊断第五章犬的疾病一、病原犬腺病毒（无囊膜、双股DNA病毒）；CAV-1、CAV-2第一节犬传染性肝炎二、流行病学CAV-1和CAV-2都具有极强的传染性。CAV-1---尿液和其他体液。CAV-2---呼吸道分泌物。三、临床症状CAV-1

全身性或呼吸道症状---取决于感染途径。最早期出现短期高热。全身症状包括畏光、血性腹泻、厌食、消瘦、口渴及皮肤瘀斑。腹部因肝炎和肝肿大而柔软。在剑状软骨处最为明显，随后在头颈皮下出现水肿。一周后，症状消失，其后出现“蓝眼”患犬出现症状后数小时死亡。胚胎死亡，或幼仔出生后数小时死亡。有时也会出现咳嗽。阿富汗犬极其易感。CAV-2咳嗽眼鼻异常发热亦可见腹泻四、病理学感染后，CAV-1在扁桃体复制，随后分布到各器官（肝）。首选目标是肝细胞和血管上皮细胞。多组织器官出现细胞病变倾向。病理变化包括扁桃体炎、白细胞减少症、脑炎、肠炎、眼色素层炎、全身性充血和出血、脾脏和膀胱扩张。有害病变为肝炎、肾炎（IV型）、虹膜睫状体炎。凝血因子和血小板减少,出血和凝血不良。肝和上皮细胞出现考德里A型包涵体。抗体应答的后遗症是肾小球免疫复合物沉积。坏死性支气管炎，支气管上皮细胞增生。CAV-2感染不会产生明显的病毒血症。CAV-2的病变主要在上呼吸道（咽炎、扁桃体炎、气管支气管炎）。可在肠道复制，在呼吸道中持续存在1个月以上。五、对科学研究的干扰CAV-1引发免疫抑制（白血球、血小板减少、凝集异常、肝脏酶活提高）。心血管、表皮、肝肠、神经、繁殖等受到了严重影响。CAV-2改变肺的结构，提高组胺活性。六、诊断防控根据临床症状，病毒分离、血清滴度、PCR防控CAV-1可经尿排毒1年以上。CAV-1，CAV-2有交叉保护性，常用CAV-2免疫。第二节犬瘟热一、病原有囊膜、单股负链RNA病毒，副粘病毒，麻疹病毒属。二、流行病学野生动物常见。吸入或直接与眼鼻分泌物、尿、粪接触。可经胎盘传播。冬、春季发病较高。食肉动物易感。三、临床症状双相热，眼鼻分泌物。脱水、呕吐、呼吸道症状、腹泻。产仔数减少、牙齿变色、皮疹、足垫。痉挛、神经症状。四、临床症状CDV在支气管淋巴结和扁桃体的T淋巴细胞和巨噬细胞中复制。随后出现病毒血症，病毒扩散到全身。继发感染常出现（胃肠）。支气管肺炎、脑炎、牙齿发育不良、心肌炎、副甲状腺恶化、关节炎、胸膜炎、视神经炎、结膜炎、胃肠炎、角质化。造成脱髓鞘炎。子宫内感染，造成胚胎死亡，或终身免疫抑制。五、对科学研究的干扰淋巴结坏死，免疫抑制。白血球和血小板减少，诱发细胞因子产生。MHCII表达升高。胸腺增生，贫血。副甲状腺损害，低血钙。低丙种球蛋白血(症)，对其他病原易感性增加。诱导细胞凋亡，空泡样恶化，坏死，形成合胞体。六、诊断防控临床症状。实验室诊断（病原分离、RT-PCR）防控免疫。消毒。第三节犬细小病毒一、病原DNA病毒；与K病毒和微小病毒相似；CPV2，2a，2b，2c二、流行病学病毒可随粪便、尿液、呕吐物及唾液排出体外，污染食物、饮水、垫料及周围环境。消化道是主要的传播途径。断奶前后幼犬易感性最高，以窝发为特征。3～4周龄呈急性致死性心肌炎，8～10周龄的犬以出血性肠炎为主。罗特韦尔犬和德国短尾猎犬最为易感。三、临床症状出血性肠炎型和急性心肌炎型。出血性肠炎型多见于青年犬。呈番茄汁样粪便，腥臭。病犬脱水、消瘦。四、病理学病毒在胸腺、扁桃体、肠系膜淋巴结、脾脏、骨髓和其他器官复制。1周内，感染整个肠粘膜。病毒在细胞S期复制。粪便中3-12天可检测病毒（4-7天为高峰）。肠道变薄、出血，肠淋巴结透明出血。心肌出现白色条纹，伴有肺水肿。病犬常因水、电解质平衡失调和酸中毒，于腹泻后2～3d死亡。白细胞总数明显减少。病犬空肠、回肠粘膜坏死、脱落，绒毛萎缩，肠腔扩张。内容物水样，混有血液和粘液。肠上皮细胞内有核内包涵体。五、对科学研究的干扰诱生白血病和细胞因子，抑制肿瘤生长。加速细胞凋亡，对其他病原更易感。肝肠、心血管、呼吸系统等都会受到影响。营养学研究受到严重影响。六、诊断防控根据临床症状。实验室诊断（病原分离、PCR）防控免疫。消毒。第四节狂犬病由狂犬病毒引起的人和所有温血动物共患的一种急性直接接触性传染病。临床表现极度兴奋、狂燥、流涎和意识丧失，终因局部或全身麻痹而死。典型的病理变化为非化脓性脑炎，在神经细胞浆内可见内基氏小体（NegriBodies）。建国以来全国狂犬病报告发病情况一、病原弹状病毒科狂犬病毒属未分段的单股负链RNA包膜病毒子弹头形状:180nm

75nm对神经组织有亲嗜性，在易感动物及人的大脑海马沟回的锥体细胞增殖，在胞浆内形成嗜酸性包涵体—内基小体（Negribody），有诊断价值RNA基因组编码5种蛋白:N,NS,M,G和L蛋白有一层磷脂层包被，包膜上镶嵌有10-nm长的糖蛋白形成钉状突起。对脂溶剂、乙醇、甲醛、碘制剂以及季胺类化合物、酸（pH4以下），碱（pH10以上）敏感，容易被杀灭；对紫外线和热敏感，病毒悬液经56℃30～60分钟或100℃2分钟即失去活力，易被巴氏消毒法消毒；不易被酚或来苏尔溶液杀灭；对干燥、反复冻融有一定抵抗力。二、流行病学区域 主要宿主

亚洲 狗，狼，猫，猫鼬，非洲 狗，豺，猫鼬，狐狸拉丁美洲 狗，蝙蝠北美洲 臭鼬，浣熊，狐狸，蝙蝠加勒比海地区 猫鼬西欧 狐狸，蝙蝠东欧 狐狸，狗几乎所有的温血动物都可以感染狂犬病。亚洲和非洲：狗是主要的传染源，猫也可以传染狂犬病。欧美发达国家野生动物是主要的传染源。动物狂犬病

1-

野生动物

2-家畜动物

人类狂犬病野生食肉动物翼手目动物

狐狸臭鼬獾狼吸血蝙蝠食果类C.S.食虫类

家畜型食肉动物家畜型

食草动物狗猫

奇蹄动物牛绵羊

山羊人类

人类

三、临床症状潜伏期：1-3月（1w-数年）前驱期：发热、不安、乏力、流泪、流涎、伤口“蚁走感”兴奋期（3-5天）：兴奋性增高，狂躁不安，吞咽及饮水时，喉肌痉挛，又称恐水病。麻痹期：麻痹、昏迷、呼吸循环衰竭死亡（100%）。首先在伤口局部肌肉细胞内增殖沿感觉神经神经轴索上行中枢神经系统增殖并引起损伤沿传出神经扩散至唾液腺及其它组织四、病理学五、对科学研究的干扰人畜共患病。神经系统。六、诊断防控防控免疫。扑杀。脑组织标本抗狂犬病毒荧光抗体染色阳性Negri小体分离到病毒第六章实验用猴常见疾病第一节B病毒感染一、病原---DNA病毒，猕猴疱疹病毒1型，属疱疹病毒科，α疱疹病毒亚科，单纯疱疹病毒属。---α、β和γ型。二、流行病学猕猴疱疹病毒1型可感染红面猴、台湾猴、食蟹猴、恒河猴、冠毛猕猴。新生猴感染率低，性成熟后大幅提高。体液传播（血液、唾液、精液）。口腔和生殖腺分泌物排毒。三、临床症状口腔、生殖腔出现脓疱、溃疡;肌痛、发热、头痛；迅速发展的上行性麻痹；感觉异常，复视、运动失调、潴尿、抽搐、吞咽困难，直至死亡。四、病理学上皮细胞凝固坏死，出现嗜酸性包涵体。肝、脾、肺、脑、子宫、肾上腺和淋巴结弥漫性出血坏死。抗体产生后可消除临床症状，但携带病毒。五、对实验的干扰限制了猕猴的应用，并对人类产生潜在威胁。感染B病毒后，不能应用于表皮、内分泌、肠肝循环、神经、繁殖和呼吸系统研究。