动物血液学检查-交叉配血

交叉验血交叉验血，又叫血型匹配检查，主要是检测供血者和受血者的血清学是否兼容。跟血型比，这个主要是识别红细胞膜表面的抗原，交叉验血主要是检查血浆中是否存在抗体。交叉验血主验项具有重要的临床意义，是检查异体患者血清抗体对抗捐献者红细胞的现象。次验项主要是看：异体捐血者的血浆（血清）对抗患者的红细胞。这是一个次要考虑的因素，因为捐赠者的血浆量很少，特别是包装好的RBC产品。在受血者体内被大量稀释。经常使用试管交叉验血，抗体表现的反应随后为继发性溶血或者是血细胞凝集反应。新型凝胶柱技术开始用于猫和狗的交叉验血检查。显示检查血液的捐赠者和受血者保证血液的兼容性。机体评价溶血，免疫样品收集分别收集捐血者和受血者的血液利用EDTA抗凝和红色管子（获得血清），每管1-2毫升；利用贮存捐赠者的细胞常使用柠檬酸磷酸葡萄糖或者柠檬酸磷酸右旋糖苷-1抗凝，加入防腐剂。在冰箱内可以短期贮存（一般采集血液后直接做交叉配血实验）。稳定性整个血液在EDTA中：在收集血液后48～72h内进行交叉配血实验（尽快)；合适的贮存捐赠者的血液：收集血液后在4度冰箱内可以保存，4-5周。实验步骤采集血液后直接分装在紫色（EDTA康抗凝）和红色（非抗凝血）将血液1000g-2500g离心5分钟。利用移液枪去除血浆；吸取捐血和受血者的血清转移到干净的试管中，标记做备用。抗凝管中红细胞用生理盐水清洗3次：将0.25毫升的红细胞重悬在2-4毫升的生理盐水中。离心1分钟，移除上清。然后重复2次后，去上清。重悬0.1-0.25毫升红细胞洗液，获得3%-5%的红细胞悬液。对每一个血液捐献者，准备3管主测，副测，和受血对照。交叉验血检测项目Majorcrossmatch1dropDONORRBCsuspension2dropsPATIENTserumMinorcrossmatch1dropPATIENTRBCsuspension2dropsDONORserumPatientauto-control(shouldbenegative)1dropPATIENTRBCsuspension2dropsPATIENTserumDonorauto-control(shouldbenegative)1dropDONORRBCsuspension2dropsDONORserumIncubatethemixturesfor15–30minutesat37∘C.显微镜检查MacroscopicexaminationLookforhemolysis.Iftheanimalshavecompatiblebloodtypes,nohemolysiswillbeobserved.Ifhemolysisisseen,thedonorandpatientarenotcompatibleandthetransfusionshouldnotbeperformed.Microscopicexamination

Mixthesampleandplaceadropontoaslide.Noagglutinationwillbeseenifanimalshavecompatiblebloodtypes.Anincompatiblesamplewillhaveagglutination(Figure2.21b).每管加入2滴（50微升）血清和一滴（25微升）红细胞悬液：主测：受血者血清＋捐血者红细胞次测：捐血者血清＋受血者红细胞对照：受血者血清＋受血者红细胞

捐血者血清+卷捐血者红细胞用显微镜检查前，先混匀样品，然后放一滴到载玻片上，然后盖上盖玻片，利用显微镜进行检查。如果没看到宏观的凝集，检测一滴重悬红细胞悬液利用显微镜，检测凝集（100×，200×或者400×）。如果对照组也出现阳性反应，显示自身抗性，那样是结果就变得更加复杂。结果交叉验血兼容：没有出现溶血，或者血液凝集。不兼容：出现溶血或者出现血凝块。狗如果发生免疫介导的溶血性反应，对照组可能出现阳性反应，出现溶血或者凝血块。如果发生上图中的现象，为发生凝集。图中为非凝集图中为非凝集物种差异狗：第一次接受输血的时候不需要交叉验血，因为狗一般不会发生异体抗体反应，如果两条狗从来没有接受过输血，在进行交叉验血的时候是兼容的。猫：第一次接受输血的时候就需要交叉验血，因为