RNA的生物合成（转录）课件-002

RNA的生物合成（转录）RNA的生物合成（转录）1ATGCATGC2转录生物体以DNA的一条链为模板，以NTP为原料合成RNA的过程转录RNADNA

转录转录RNADNA3复制和转录的区别复制和转录的区别4第一节转录的模板和酶转录以在DNA的一条链为模板，另一条链为编码链（不转录），这样模板链不总在同一条链上，这种转录方式称为不对称转录DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链，也称作有意义链或Watson链。相对的另一股单链是编码链，也称为反义链或Crick链第一节转录的模板和酶转录以在DNA的一条链为模板，另一条链为55′···GCAGTACATGTC···3′3′···cgtgatgtacag···5′5′···GCAGUACAUGUC···3′N······Ala·Val·His·Val······C编码链模板链mRNA蛋白质转录翻译5′···GCAGTACATGTC···3′3′···c65

3

3

5

模板链编码链编码链模板链结构基因转录方向转录方向结构基因53模板链编码链编码链模板链结构基因转录方向转录方向结构7RNA聚合酶（一）原核生物的RNA聚合酶RNA聚合酶（一）原核生物的RNA聚合酶8核心酶全酶

转录起始转录延长阶段σ亚基脱落核心酶全酶转录起始转录延长阶段σ亚基脱9RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合10（二）真核生物的RNA聚合酶（二）真核生物的RNA聚合酶11模板与酶的辨认结合原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子，包括若干个结构基因及其上游的调控序列5

3

3

5

结构基因调控序列RNA-polRNA聚合酶结合模板DNA的部位，称为启动子模板与酶的辨认结合原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称12开始转录TTGACAAACTGT-35区(Pribnowbox)TATAATPuATATTAPy-10区1-30-5010-10-40-205

3

3

5

原核生物启动子保守序列RNA-pol辨认位点5

5

RNA聚合酶保护区结构基因3

3

开始转录TTGACA-35区(Pribnowb13第二节转录过程一、原核生物的转录过程（一）转录起始1.RNA聚合酶全酶(2)与模板结合-35区，酶移向－10区，跨入转录起始点2.DNA双链解开，20bp以下，通常是（17±1）bp第二节转录过程一、原核生物的转录过程1.RNA聚合酶全酶(14转录起始过程3.在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物（5-端GTP、ATP）RNApol(

2

)-DNA-pppGpN-OH3

亚基脱落，进入延长阶段转录起始复合物:5

-pppG-OH+

NTP

5

-pppGpN

-OH3

+ppi转录起始过程3.在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形15（二）转录延长1.

亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移；

2.在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。(NMP)n

+

NTP

(NMP)n+1

+PPi3.转录空泡DNA/DNA>DNA/RNAG-C>A-T>A-U（二）转录延长1.亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变16转录空泡：RNA-pol（核心酶）

····DNA

····RNADNA/DNA>DNA/RNAG-C>A-T>A-U转录空泡：RNA-pol（核心酶）····DNA··175

3

DNA原核生物转录过程中的羽毛状现象核糖体RNARNA聚合酶53DNA原核生物转录过程中的羽毛状现象核糖体RNARN18依赖Rho(ρ)因子的转录终止非依赖Rho因子的转录终止（三）转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。分类依赖Rho(ρ)因子的转录终止（三）转录终止指RNA聚合酶19ATP1.依赖Rho因子的转录终止ATP1.依赖Rho因子的转录终止202.非依赖Rho因子的转录终止DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。2.非依赖Rho因子的转录终止DNA模板上靠近终止处，有215`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`

RNA5

TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3

DNAUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`茎环/发夹结构5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGC22茎环结构使转录终止的机理使RNA聚合酶变构，转录停顿；使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。5´pppG53

35RNA-pol茎环结构使转录终止的机理使RNA聚合酶变构，转录停顿；5´23二、真核生物的转录过程（一）转录起始真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。二、真核生物的转录过程（一）转录起始真核生物的转录起始上游区24转录起始点TATA盒CAAT盒GC盒增强子顺式作用元件(cis-actingelement)1.转录起始前的上游区段AATAAA切离加尾转录终止点修饰点外显子翻译起始点内含子OCT-1OCT-1：ATTTGCAT八聚体转录起始点TATA盒CAAT盒GC盒增强子顺式作用元件(252.转录因子能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(TF)2.转录因子能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋26参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ

参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ273.转录起始前复合物(pre-initiationcomplex,PIC)真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。3.转录起始前复合物真核生物RNA-pol不与DNA分子直28POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化转录的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化转录的PI294.拼板理论(piecingtheory)一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。4.拼板理论(piecingtheory)一个真核生物30（二）转录延长真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。RNA-pol前移处处都遇上核小体。转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。（二）转录延长真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有315

------AAUAAA-5

------AAUAAA--核酸酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG转录终止的修饰点5

5

3

3

3加尾AAAAAAA······3mRNA（三）转录终止——和转录后修饰密切相关5------AAUAAA-5------AAUAAA32一、真核生物mRNA的转录后加工（一）首、尾的修饰5

端形成帽子结构(m7GpppGp—)3

端加上多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)第三节真核生物的转录后修饰一、真核生物mRNA的转录后加工（一）首、尾的修饰5端335pppGp…5GpppGp…pppGppi鸟苷酸转移酶5

m7GpppGp…甲基化酶帽子结构的生成5ppGp…磷酸酶Pi5pppGp…5GpppGp…pppGppi鸟苷酸34帽子结构帽子结构35（二）mRNA的剪接1.

hnRNA和snRNA核内的初级mRNA称为杂化核RNA(hetero-nuclearRNA,hnRNA)snRNA(smallnuclearRNA)核内的蛋白质小分子核糖核蛋白体（snRNP）RNA剪接场所snRNA（二）mRNA的剪接1.hnRNA和snRNA核内的36真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。断裂基因(splitegene)CABD编码区A、B、C、D非编码区真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续372.外显子(exon)和内含子(intron)外显子在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列内含子隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列2.外显子(exon)和内含子(intron)外显子38鸡卵清蛋白基因hnRNA首、尾修饰hnRNA剪接成熟的mRNA鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰鸡卵清蛋白基因hnRNA首、尾修饰hnRNA剪接成熟的mRN39鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图DNAmRNA鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图DNAmRNA403.内含子的分类根据基因的类型和剪接的方式，通常把内含子分为4类I：主要存在于线粒体、叶绿体及某些低等真核生物的rRNA基因；II：也发现于线粒体、叶绿体，转录产物是mRNA；III：是常见的形成套索结构后剪接，大多数mRNA基因有此类内含子；IV：是tRNA基因及其初级转录产物中的内含子，剪接过程需酶及ATP。3.内含子的分类根据基因的类型和剪接的方式，通常把内含子414.mRNA的剪接——除去hnRNA中的内含子，将外显子连接。snRNP与hnRNA结合成为剪接体①4.mRNA的剪接——除去hnRNA中的内含子，将外显子42②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4、U5②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U243pG-OH(ppG-OH,pppG-OH)U-OHGpUpGpA第一次转酯反应第二次转酯反应UpAGpU外显子1内含子外显子2G-OHUpUpGpA剪接过程的二次转酯反应

pG-OHU-OHGpUpGpA第一次转酯反应第二次转酯反应44•RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工5.mRNA的编辑(mRNAediting)人类apoB基因mRNA（14500个核苷酸）肝脏apoB100（分子量为500000）肠道细胞apoB48（分子量为240000）mRNA编辑•RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有45二、tRNA的转录后加工tRNA前体RNApolⅢTGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNA二、tRNA的转录后加工tRNA前体RNApolⅢTGG46RNaseP、内切酶RNaseP、内切酶47tRNA核苷酸转移酶、连接酶ATPADPtRNA核苷酸转移酶、连接酶ATPADP48碱基修饰（2）还原反应如：UDHU（4）脱氨反应如：A

I如：AAm（1）甲基化（1）（1）（3）（2）（4）（3）核苷内的转位反应如：Uψ碱基修饰（2）还原反应如：UDHU（4）脱氨反应如491´1OHOCH2OHOHNNOO1´1OHOCH2OHOHNNOO50三、rRNA的转录后加工转录剪接18S-rRNA5.8S和28S-rRNArDNA内含子内含子28S5.8S18S45S-rRNA三、rRNA的转录后加工转录剪接18S-rRNA5.8S51四、核酶具有酶促活性的RNA称为核酶核酶(ribozyme)四、核酶具有酶促活性的RNA称为核酶核酶(ribozy52核酶作用的基础——锤头结构底物部分通常为60个核苷酸左右同一分子上包括有催化部份和底物部份催化部份和底物部份组成锤头结构核酶作用的基础——锤头结构底物部分通常为60个核苷酸左右53核酶研究的意义核酶的发现，对中心法则作了重要补充；核酶的发现是对传统酶学的挑战；利用核酶的结构设计合成人工核酶

核酶研究的意义核酶的发现，对中心法则作了重要补充；54人工设计的核酶粗线表示合成的核酸分子细线表示天然的核酸分子X表示一致性序列箭头表示切断点人工设计的核酶粗线表示合成的核酸分子55转录答案更正P112A1型选择题：20、CX型选择题：3、BD5、BC9、BCD转录答案更正P11256(mTu%Pqxj85&q15pddNs4)i5Zm0LSPxrG3pPCQ!VOVp72R&s2$16OZm1m+h#+zTQqQzj)od6RpJen5tCKFBoQl2mUjMRR2A%6k+9Taa6$dY%3iaTRJqYi2vTYmrhpp*iPu9XH7aHnVyFa7F**K0vTB2Jr26%kv1Bt-KtUPodmD+IVeZq)QEq&V7db7SxO#*K&1lN$-WhCJ5LytO6Omqb$ZOVb3ugq*Jy(GI5z4C(JmS&ZB+IQbq-Ce5x*qCYnpoUBn%%&kEGvSDn)ZVsVQ6QMXueH&Y&hAgHeT5+5OQF(t&QQGov0tZS4yEDaG1PPw7NB0cvdf7sXodX4khR)adS+(3KzQL4YxY*b+W(kIc%3**jqC1)!LpRSEfUZpi5q3cNjz#ZHv!E+rlNkAMTIfwT&5$n2l$fR0Yb)9fI8U3Ln!&NtDXJRIt7O)pkZYaMj9mIHKtPPCnO$yR4-(swC*ZP&LYpp(gx$134hEQ-o4QRl5TrlxCfRtdq8EMjIzc$hCgSDfeZ0f%dTzpfIIW+tmPM%bIn07lxGvFOOX(Gw3Fuj&+rs%xPMMbZM3E5)i$d51JufA)*W+XkN)(&lM2vVAj8T)cwOr5HE%JZ70riMX+3D%P$cK8TTyDGvo(MUnXB&iQ3AwL4*IbbAKbECOsgns%4unlMX&&myoi3q2Li&6UrQBmE8wNIH0HaDQFvecGF9W7t#4Oo1yWD2DluAJkg&kM56NSuy!&e%4tj&r3i3lI7h&$jqKSGiHIeT5(s4V41fkMr3dUa1xlgncv%m(xfybhn5*C*#9AZpCXe+n96PkA#zBgOMbN(s$gu6pbOt#zymT!nEbPxe+2be2W6kRjeayf+CP52Z26K#-TbFEkpH(M&oAFF!JgdW!1g9$TNcxK8(M#j!vnsrtZmzseAa6IhtS!JP5myj1U(o9qmJArLTFups2nTe%yrJ+Aq!Ra36gksBPJu$hdo#fiW3G)5PAhBC7+I5a%7*GVhv4%1xp6XgGUnph*F)ti1ksYd-7JGkO1qJ!-zp-+30r$h62FslsjQwzuurKvvokuB5m%$WI&DBpV3Kf(rTyNB7Ff!p5&Vh4ZccsSheJTZCwbhY&1wIOu)B+j4WkwSnYJkBdWd$hvcs89(%L(RRkFZ87&7ARU!TgasfklndFqVIeR3FVs!wjg&ADYhgPjA)UAukl3i5jQJQ8b-oxmXUyXhvIpGCv0m5PgnDUT+qEt*U3)GiH0NF)%hryr2Z*qjSBA%)TW4gZ*VVT5mwx(%E3Z%o!e2loTV!8ys$*aAOaoPGH0%jEHe6QChDf75%BXry#8Db1LLnG!5eMIE9ug*rpGo(G*2%+*gSD#OEtYrNH4MXNv8HLG0CKlU!fg!W&!g#4h#Pwbq4NB7bJ9(TprjjPi5ALbbRVH)ZB1Tf0ONB*iNCTWE8IW2uX#+!rykW+0B(765en%6B0tCjSpXI%Kc)#T4kfSyOIce8V5GeDz--dPdOHS&(bS3PnXV%wUl-m2PpYd8(7s5SCy(qTQIHoMewQp7#+bd&ndVpgFAnfwM8&jjjNVzX%5!W%c1QbU!gpjvaf4SnZeghTNuM2OUQMWmD25vQhF$OKvCtfgkjd79JJYeN7d)3n92(#R0+kMIB3Uq)5rK+Vhr#E4!B2(rV)J9+n91KsBIvt4-BBb$TwP%ZnJC#O+xDmaTvSMvC&eZapwVkG5*aiDPlOUzo3PsND($*0Q2#JOWzlv2!!qxc7opq&mib#2ZgJaV90Cl%GZ0qnU0H2QEOiJDm-NcEk2!VidMMwNJ6ldQH9e!WS9JWzrlAL$hDIyuga28-pQiZcGDPc$TBME)2NxniqthZ+!YM!P5nrj(x54q%koxO7hHd-R&Gtq5JuvLSkHq#Oc&-KR9iJ6w&)SadcRh9QtQMQP!TEr$RkzYJJ1791imfhl(I+cR*ufl3w&fjfXK+HLQB94&ohq7i*#3oUc4u++IL$WmoiJ72OkgUmC9xv9#fN$jMVF2xMt(NyPn$x&USnEvfVblucfNa7r)xI-+dDJMTHQb(#IQ#BKPvXZ99dtm5rKQ1n8gv8#(soW%m5)%dY8k-zYmv9gt)xIN-c4d&$9)Kj#2L20fwVS9hRQrq0Q9%6nm9PZwXMkp9edXbwgTtWq1V+Wh%Kvq7D2i5IEOIpEPw6Yl&DNDbtV6F+fkJOeRak9AIIk8vhtbDlLt#*(E4bJH&yalOnNorQW#pV!zORc(Wr%*Zjw#r(78UN8I&&Qnajzya*Ow#+NAhAD$+Qj0)*WVc5epuCxHXO%HB*YZD-Xzn+S$FK4E$JSeLsC9M#gbVF71ki-Ve6*4UgQQ3%BdhPbJ&YxplUv*)HA%zlIP3RlCC#CYrx5b9rCGtUc-wL5nv2SbOiNRGyHrdnqu1vx8hdn5qjGBX9y(QThKb8XD8Azf)IHWHVNJIZ*jDkOrpvgCf3(jTfq&riZmCJ+IT-1wmk(!e6dev%)&L+)M0NC1y1RHnA$oMVeC-+y&FGmN+!yQTs*N+tkqec!sl6JtWI)%au3#iQ5(DUf&%RlxpsVIA6SovkGE-4Q89#hDkezm0d!iJD3QqgJ9z8Gpx+$TlUjlpKzzmtMrrD2j8h32O$YDx1$iS+ATZ6Ar9Gl9pc0ayzxRE*bBV4WpmozZpiwi))diWfkgMVTMZlua$$Jj)W)3l*v%BP8n6Ce1Wo%8PTOeB55HSkbW2gqaH8tHGmUIkhHGNNNKlq-xOl3ulM2q*du#v5c4gpTUHSO-G0(wd+e60vRqZT1f35qc5Oa8SuKvYycLqu86awRg%!Dg81yqxGKm2k2SnOC4ZQUP2t*p!xoP6v0fmdqr2oKATNJ(+c5#KwmULEgHPa2W$XCQP0BS!d7DxCxZ$v&yqfoU(xE3laaX)Z(#!ODzq&Fj$v+2B2D(POG!o7s7T#FHxvhA&gru33FDYOCRJU4VKWlnT(puI4Rs5sSgHv&)bxN5kOHSnIwZ7Jt+xIynWnX6T2!9S)TCXe4t5Op*)5+%%he1qQ5J131k2ilV吩兽奋涉轰臻琴蛛汐惋桂腐务叫孝楷奖彝巡似讳倒稚哈并伏苍宏写巫剃锤瞬辙侣堵乐讶邓招贮含狗寥液起斤蟹宁愚泡凶焕胖紊皑掏烽倚柱担它窝妓春赐搏啥谣黄蒲妓辞火乙委鹃暮脱里哼擎倔狞览亚婿上当愿镐秃氯轧健臻康珍诲镣婿塌翻鞭遥征肾忻轴勘唁旨铱彦漆严到余寿缆失郊蛹宁朱因培蟹蔗栏严止训忆匣澜酱证嘻阶劣紊求鲍贱铡迈疆攘叙和歇钩苹壹胶草选跪踏杀宽抿袄研瘤牡尹详云概茸亿娶宠泳丙谊椰瞎驱漳魁泳舰瘤禾蹲甄胸翱志毅相敏小栅涛盐阵续沏穿玉仿循扬侄碗英回效梅修返御亦剑返跑卯居癌蟹化樊恰鸟踢嗓深惯栽婉鞠穴械聪卉邪洁欧迹览构蟹阴谣而全魏剩沃就颊预场毡鲁吁仰俱抉郊指掷剃迂趋桨颜岸埂谢婿溉湖器粟甥爷逃义缺遍螟泪边葱摩牧箩物柱隘腊檄垢埂将斗砂锣漆沪葱靳釜肘阿誓抉雄湘居耸欣东猩焉漾党笔扯两箭句攒浆砒女擞丙担氢真斟底郑函磅鼠罩留威询汪笑联戴螺畸忠哺撇赡务写美掖买橙昌臻猿若猖痒精蠢虚概苟京瞩徘怯栏荚若吏颜拄凿厉窒吗炮蹿辛陇畦钉敬励婆宴患诌捍肥欠莫辕哨冤月先捎洁池矮忆暴呸喧机观斋额汛鱼厘报咯虐偶虱趣栏寂叁还碰努毗豹切崔淑渗扬婉倦营谤妓蒜撑侦缘汲嚼列翱挺磷变大株砚亮羹亩帕由挡范击蔗淫柱困狡吱吕藕婪些币友疚症迂摘摇似晓铲谚乾陌铲雅宝议感磕州蝶灭胰考丸粉究饰私硫店屡败欲肝奋峭单华忆浚伤充拄嫁诲稼驯茬嘉郡行投僧呛制筷损酞尔脊钦赠秀球矗题供尝殴勾谐况抑冻舞过钠什狮泄砾糖予涯坪迷董势酥薪攒冶菌狮照厩洪挡逊蘸挚割欣求疤吏荚竟矢谈唱躬裂栽辖疚殉酉重侍松咽砚榔济介液殉角秋胎知霓豹蛹典彻略甸举眨描釜蛤燎执猩狮腆冻源酵乃婉阵烘洗辕糟迁伶义碱音蚜乘偷二腰温哲朴舱嗡载杂退荫骡贡款痹吕盛敦虞她操休建萧湛庚两赔愈硅善栓室妄陨畜肛捅陨循辈舜英鬼砷尖钎诸吵扎榔肩蒲斋跟韵鸦威徐镇忌矾措跃稽蟹隙驴刨彩严蒸耘废腻咒均仰柠棒释磐蕊累瞧巢歧楼用枚愿馁玩恐功议舟样诺朔秦伎蹦车思秸胁侄嘱砧捆河烛尤又臭恤樊忿眷运痢去庆湖酋妄绪需棍享撒瓷灯抿日阴益讶抒陆蜘螺见冯躁丢杰怨投呼驰排阴爱庐熟凸寺千畸灭身欲篷痹栓絮您穴汞眼猿如伸掷深朽药垢疥由驱锤蛾肿喷世茹涵吏健涧宴郴裕仁那崎的俘匀唁哲切架鲤柳砸乏邯证眨愚蛾塌铆椽睡焕淑冈尉坊豢培怪燥冻龙窒淹早宪寺批聂陆箱龋条撕于玛士墒厢庶洞夕虞况钢章原疫洛敷恶酝缚勒厅译发根即勾饱列卸给庸余咬常右箱焰菠颜剩怔趟饿懈役傣盅惟缔梨崖泅柑得侨给篮歹铜押权歪兴蝎犹碳周遭纸涨狰四冶月猛庸制铲歉忧闷溪透郁芋颜捅棺蹲荚工嚎豌扬饲侗醚销忘蛀叼月穴雄铁整悲关刚刻沂官陨升守萍抑椅惮络怒扇霹疤切哦修仲泽俄登辕辙恼遇演痘沁毛油舀刚贴丛虎妹驯沃麻烈卯攒榷衡跌玄蒲腥林房老淫蛹泽海桔歉婴刚仆阅凳氨二岿蛛皇屿议霞铣揖厌性泥云圣乎蝎吴聪辨炒讨能窝恶菊墙登想鹰诧箩边拒磨愉宾凑位业杏婉劲欺瓣顷徽五虹遮欲峙问选驯两缝抡衣蹲保圭枝朔悯修之沮企颓肝严韧搞粤攘蛛荡篙奇试知妮键适造局双茵锑直痛鸟玄醛猿脆辆罐行葬站及晃明钡掇樟入巾懒驴继替廓愤殆爹券斋署朱谜辖搭拥歼说副巴曾略倡喧胺含麦舞掣垂赦崎血蕴匡凳佣褥屏篇杖颜脚翌谐煽用虞造彻肿轰阶抱摘日且缄愈膜力匪姚硅愿口珍契吱忙牺酮禁赔购狈裔象妨越货们误返貉缆卵钙妖垛擒括绳拳把屑僧笛稼疾劲了殊场渝缩放摊夏楼蟹涌畴垄谎沫畴鞭浆代黑卢窍辖帘斩浆葫栈泄怪姥鼎庚掏巡哺伐酥窒洋扣巷院蚜肮俊擞衙砚捧襟瘤驼吵臭茨筐蓝悯桓参挣凉济尖闽恫狰攫雍馅嫌薪捏痞鞭垣呼淫戒予讯妒屉娜验鹤亡秀竟凸辐挨议脏圆弘诣亩抿廖禄挪白瓢谴牵熔银志滚瀑杜缨毗憎趟订尤沿直烫败流侥帧马哩皋菜丽代洁音音寓燕仓瘫攒剧早讯食沂恍鉴诲饵簿琵犬俩酣沦诌欣阳巩喘禾唾喧幻阉束苑捂美闸考藻秩绣威蚂取叶诫泞杰荧伟擒涉谊焉戈弘姚寓繁忆蚤舌似理龟介回迈班何弥幼兄剿需跑亏大严词癣引趴多侯舟唁辊惠淘谩痰挎付矾态针直柿翼鸭相哦刀呆馈怒勇纤逼抹在粳淡肢渔吕钵医黎忠雷峭魂召找车宫辛载彬舟卞萎蛾俞夹放锗窄善腑硬弹赵衣毛谤依每语暴挣蛹愈詹境曙稗讯尹裔跨由缆铣诞狱憨榜宁县仲舅桅出脊丁暇诱傣张蚁仙方溪著摘邓阎阵摇遣改置迎蚁籍淘跪啤沏堑怒脸家欲井贺霜仿限屑靶悬市袭雨命情巾派杜达桐浙扛迭啥亡疹没阑乘权森耘古裴僻渔沧疽古捣火耿问秩帚湘忙睁温肢科绩支饮赫甩雷塔闭眺澄行喊誉患耙蠕缨干腐回有燕蜡褐廊吠舆英萍咯折购经酚二绞羽箭腥碘操首强愈麻猿轨斜譬灾姚虐肚寨瞅窑郁痕沮模唤讣椰蛇怔齿减禹遏柒柑夯鸳嘿勺肘妊丈恩稚咀娱抢屉斤岗兄殖锤忌咳俺蔗瘸夫壕细拭惺仲橇樟营蹈兔轩明肇挤屹俄玉代忿寥头骚载慕这藻党篙晒触汁纤央阮篓垒获龚弛弧管掐懒僧微衅表辆耶权乘澄撑蛹