水质总大肠菌群和粪大肠菌群(纸片快速法)检测方法确认表

方法名称水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定（纸片快速法）申请人项目负责人员制定原因验证检测方法符合实验室要求、确保数据准确性与有效性方法适用范围适用于地表水、地下水及废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。方法来源HJ755-2015《水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法》仪器、试剂和环境的要求1•仪器和设备1.1高压蒸汽灭菌器1.2培养箱1.3冰箱1.4米样瓶1.5试管1.6水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片2.试剂：2.1硫代硫酸钠2.2乙二胺四乙酸二钠采样和测试过程中，所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。方法描述按MPN法，将定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂（溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮唑即TTC）以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度（37°C或44.5°C）培养24h，当细菌生长繁殖时，产酸使pH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色，同时，产气过程相当的脱氢酶在适宜的pH范围内，催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲（TTF）。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在，再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。

检测结果的判断结果判读：（1）制片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。（2）纸片全片变黄，无红斑或红晕，为阳性。（3）纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。（4）纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围不变黄，为阴性。（5）纸片无变化，为阴性。结果计算：根据不冋接种量的阳性纸片数量，查MPN表得到MPN值，按公式换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数：C=100*M/Q式中：C—水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度（MPN/L）M—查MPN表得到的MPN值（MPN/100ml）Q—实际水样取大接种里（ml）100—为10*10ml,其中，10将MPN值的单位MPN/100ml转换为MPN/L，10ml为MPN表中最大接种量。结果表示：测定结果保留一位有效数字，大于等于100时以科学计数法表示，结果的单位为MPN/L。平均值以几何平均计算。附件说明表1运行说明经验证该方法符合我实验室使用。审批意见技术经理：日期：总经理：日期：表1燧大可能敲（WPN）表（■水样接种豪为5^10ml,5i^fIml.5ffr0.1ml）MPNIOOmlMPN.JOOml1.0mlLmJ0.Iml下覘上凰10mlIm]CMml.下脱门00<2300SI190012<0.57301]]曲004<0.57302IS331003530316004730420005930523010了<0.5■T310112250114]131114454016<0.515312175460]37313206600149314230151.1.215n0204<03]|3201443402161532117546022732mo6600239323240r41.1.342702512325310J06<0.51533017546031Y33■1217630s2933240J311333280341333432035]533536040834021763041g34■124fi720421.1.3斗九0431334332

獰接种iEH性fit懿：MPNi100ml备橫云:禾阳住悅毂MPNdOQml1ftmlImlOJnil下ft!上:H10mlImlDJinl.下區0441?3443604517345犯05G935025S7?051LI35129052I；■RJ5232053153533705417■RJ54410551935545]002<0.S740013nJ31]014■<0.51140]17546]026<0.S1540221763]03811940■325875]041040430]051240536]1G4<0.511410：7546]116<0.5154I121763]12fi119412269袂.]13104I331]141241436]1514斗1542]206<0.51542022了]21&11942]269摊]2210”23422321191]2古1242■"I3S]241542444]251742550]30•、119420279SO]31W22343]331193]3212422加13110]331543345]41742452]3519斗3559#薛按址运耳性曲数MPN-100ml各接址足閉性份做MPN100mllOjrilLml0J11.11下限上Bi10m]IlmLOJml上尿]4QH225440341293]4:1j44J■401J0]421544£471431744*541斗419斗斗46214522斗斗56915Q134504116120]511545]48]521745256]5319斗5364]5斗2245斗7215524455SI2005<0.5135002277020■715013111892029221502431511020312->2350358J9]40204145047624]8D7士05165059521071r5103311932192215114616]2021212328512632115D21314513842620021417514LIO215195151302209221570■49J■]3022■1232852123170222144S4527刑2S220223175231203328D22419524150SS37D225225751804452023012T-285f07925]?D73144S4531HO；1250

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