去甲长春花碱抗肿瘤的研究进展

去甲长春花碱抗肿瘤的研究进展

长春碱（va）是雅豆科植物从长春花中分离出来的一种抗癌活性物质。在20世纪70年代，有几种主要药物，如长春新碱（rcr）、长春花碱（vlb）、近年来的长春花碱性酰胺（vd）和长春花碱（nvb）被广泛使用。本文就此类药物近几年的文献进行了复习。一、vanvb诱导的微管解聚作用长春碱类药物的结构相似,由碳-碳桥连结的二个复杂的多环系统构成。多年的研究表明这类药物的细胞毒性通过与微管蛋白的结合来实现,它们在微管蛋白二聚体上有共同的结合位点。由于药物与微管蛋白二聚体的结合抑制微管聚合,使分裂的细胞不能形成纺锤体而使分裂停止于中期。Lobert等应用了3种不同的模型再次证实了这一点,几种VA的衍生物中与微管蛋白结合力的大小为VCR>VDS>NVB,与临床上VCR的剂量最低而NVB最高是一致的。为了进一步验证此结果,他们还观察了VA诱导产生聚合体的松解时间,VCR最长而NVB最短,前者的时间比VDS或NVB诱导聚合体的松解时间长20倍以上。新的VA类药物NVB虽然也可通过粘合于微管、抑制微管聚合而产生抗肿瘤活性,但NVB的这种作用远逊于VCR和VLB,VCR几乎可使所有微管解聚,而只有高浓度(40μmol/L)的NVB方可诱导大量微管蛋白解聚。从Binet等的研究中可以确定有丝分裂的抗微管活性与抗肿瘤活性有关,而轴突的抗微管活性又与神经毒性有关。与VCR和VLB比较,NVB在远低于使轴突解聚所需的浓度下即可导致有丝分裂微管的完全解聚,使其具有更大的治疗指数,同时也证明NVB的剂量限制性毒性是骨髓抑制而非神经毒性。近年的体外研究证实,长春碱类药物10-8mol/L浓度时可明显抑制大鼠MTX乳腺癌细胞系和T24(HTB4)细胞系的增殖,Mary等在Hela细胞系中的研究也证实了这一点。长春碱对细胞增殖的抑制作用是通过改变有丝分裂纺锤体两端微管蛋白的加入和丢失动力学实现的,而并非使微管解聚。每一种长春碱的衍生物对Hela细胞增殖抑制的浓度与其导致50%的细胞聚集在中期的浓度基本一致,抑制细胞增殖并将细胞阻断在中期的作用均在VA的最低有效浓度时出现,同时无或少见微管的解聚或纺锤体的重组。临床上,VA各种药物的抗肿瘤活性和毒性是不相同的,且其抗肿瘤活性与其抑制微管聚集的能力并不是正相关,因而或许存在其它新的机制。VA各衍生物的抗增殖活性各不相同,可能与其不同的抗肿瘤活性相关。二、持续静脉滴注药物的安全性静脉注射VA的药代动力学通常为开放的三室模型(表1),其特点为:①表观分布容积大;②全身清除率高;③终末相T1/2长;④分子内、个体内及个体间的差异大。VCR、VLB、VDS、NVB代谢的初始相和中间相的T1/2基本相似,但终末相T1/2有显著差异(分别为85小时、24小时、24小时、40小时)。VCR的T1/2最长、全身清除慢也可解释其最大耐受剂量低于其它几种药物的现象。持续静脉滴注的方法是基于VA是细胞周期特异性药物、治疗窗口窄的特点设计的。静脉注射虽然初始浓度高,但此高浓度仅能维持数秒且带来很大的毒性。持续静脉滴注既可避免高浓度带来的毒性又可延长有效浓度药物在血中的停留时间。研究显示,血液系统肿瘤、乳腺癌或头颈部肿瘤在静脉注射VDS或VLB治疗失败后再持续静脉滴注该药仍可有较高的缓解率,持续静脉滴注后VCR、VDS、VLB的清除率下降。由于NVB的分布容积大,与微管的作用强,人们推测持续低浓度的NVB可能会提高疗效。口服NVB胶囊的生物利用度为24%,且不受食物的影响。当每周重复使用50～180mg后,服药1～2小时内即可达到的峰浓度为0.07～0.8mg/L。口服后的药代学特性与静脉注射的相似。三、治疗乳腺癌的nvb尽管VA的化学结构非常相似,但抗瘤谱、剂量限制性毒性(VCR为神经毒性,NVB为骨髓毒性)和最大耐受剂量(NVB的最大耐受剂量明显高于其它各药)相差很大。VCR、VLB及VDS已应用多年,其特性已为人们所熟悉。NVB是近几年开始应用的一个新的VA类药物,体外研究发现其对L1210白血病、P388白血病、B16黑色素瘤均有明显的抗肿瘤活性。其它研究发现NVB与多种药物如DDP、VP16、MMC等联合应用疗效增强而毒性不变。由于NVB独特的抗肿瘤作用,FDA已于1994年12月批准将单制剂的NVB与DDP联合应用作为不可切除的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的一线治疗药物,这是20年中第一种被推荐用于NSCLC治疗的新药。关于这方面的研究在国内外已有很多,本文着重探讨NVB的一些新动向。近年对NVB与紫杉醇的联合应用引起人们的极大兴趣。NVB的作用是抑制微管聚合,而紫杉醇的作用则为促进其聚合,抑制解聚。Hin等在体外研究了NVB与docetaxel合用对于PC-9人肺腺癌细胞系及B16黑色素瘤细胞系的作用,结果显示,先用VA者二药显示协同作用,顺序相反则显示拮抗作用。进一步的研究证明先用的VA细胞毒作用并不被后用的docetaxel作用所削弱。Louboutin等接着进行的NVB与docetaxel治疗28例晚期乳腺癌的I期临床研究发现最常见的不良反应是深键反射的减弱,占89%(25/28);另外39%(11/28)的患者出现轻度可逆的感觉异常,但发热性的中性白细胞下降则是剂量限制性毒性。推荐用于Ⅱ期临床研究的剂量为NVB20mg/m2第1、5天,docetaxel85mg/m2第1天。Weiseberg等进行的NVB与Paclitaxel联合用药治疗转移性乳腺癌的I期临床研究发现主要的剂量限制性毒性为中性白细胞下降,合用G-CSF后可进一步增大剂量。其它不良反应还有肌痛、疲乏等,均较轻且可逆。可评价的10例中2例完全缓解,1例部分缓解。复发转移的小细胞肺癌(SCLC)的治疗一直是困扰人们的一个重要问题,Furuse等在这方面进行了有益的尝试,24例治疗后复发的SCLC接受了NVB25mg/m2重复4次或更多的单药治疗,结果12.5%(3/24)获部分缓解,且有效的患者均是既往经VA类药物治疗过的,说明NVB对经治复发转移的SCLC有一定的疗效,对既往经VA类药物治疗失败者仍有较好的疗效。Furuse等随机研究了NVB与VDS对204例ⅢB或Ⅳ期初治NSCLC的疗效。结果显示NVB单药组的缓解率为31.1%,VDS单药组的缓解率为8.9%(P=0.0002);前者的中位缓解期为18.5(7.9～107.5)个月,后者的中位缓解期为11.7(6～35)个月。毒性方面,二者引起白细胞下降的作用相当,NVB组的神经毒性略轻。四、新的动态化合物1.对va耐药人群的药代动力学研究S12363(vinfosiltine)是在O4-deacetyl-VLB的C23上添加了一个α-磷氨。体外研究显示其细胞毒性分别为VCR和VLB的72倍和36倍,Alain等进行的临床前研究发现S12363对鼠的移植肿瘤P388白血病、L1210白血病、B16黑色素瘤、M5076肉瘤及结肠腺癌38均有显著的抗肿瘤作用,但对Lewis肺癌无效。对人HT-29结肠癌、NCI-H460肺癌、HCI-H125肺癌等移植肿瘤均有明显抑制作用。在体内研究中对VA耐药的P388白血病亦有效。I期药代动力学研究显示静脉用药后成三相分布,终末相半衰期为49±16小时,血浆清除率为每公斤0.14±0.4L/h,稳态分布容积为5.0±2.8L/kg。在体内,其药代与剂量在0.08～0.84mg/m2范围内成线性相关,剂量限制性毒性为血液学毒性。Ⅱ期临床研究在晚期乳腺癌中进行,用法为0.3mg/m2,每周1次或0.6mg/m2每2周1次,结果不论是作为一线治疗还是作为二线用药均无效,神经毒性为主要毒性。2.k-ras-nrk细胞Conophylline是从小叶狗牙花中提取出来的新的VA衍生物。在体外可使K-ras-NRK和K-ras-NIH细胞系出现正常