TGDFS 14-2022 木姜叶柯甜茶质量检测技术规程

ICS67.050CCSX04GDFS广 东 省 林 学 会 团 体 标 准T/GDFS14—2022木姜叶柯甜茶质量检测技术规程CodeofpracticeonqualitydeterminationofLithocarpuslitseifolius（发布稿）2022-06-06发布 2022-06-06实施广东省林学会  发布T/GDFS14—2022T/GDFS14—2022II前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由广东省林学会团体标准化技术委员会提出并归口。本文件起草单位：广东省林业科学研究院。本文件主要起草人：曾雷、王颂、徐巧林、王志宏、黄俊彬、陈颖乐、黄文妍、余玉娟。T/GDFS14—2022T/GDFS14—2022PAGEPAGE1木姜叶柯甜茶质量检测技术规程范围本文件规定了木姜叶柯(Hance)Chun）甜茶检测指标、检测方法等技术要求。本文件适用于木姜叶柯甜茶的质量测定。规范性引用文件（包括所有的修改单适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法《中华人民共和国药典（2020年版）》附录薄层色谱法《中华人民共和国药典（2020年版）》附录高效液相色谱法《中华人民共和国药典（2020年版）《中华人民共和国药典（2020年版）《中华人民共和国药典（2020年版）》附录浸出物测定法术语和定义下列术语和定义适用于本文件。木姜叶柯甜茶Chun)干燥的叶。原材料主要产地为湖南、江西、重庆、四川、广西、广东等省（区）。三叶苷trilobatinCHO，分子量4364。根皮苷phlorizinCHO，分子量4364。检测指标外观指标木姜叶柯甜茶外观指标见表1。表1 木姜叶柯甜茶外观指标项目指标颜色叶片两面同色或叶背带苍灰色，叶片主要颜色可分为绿色与紫色。无霉变现象。气味气味甘，嫩叶有甜味。形状大多数呈椭圆形、倒卵状椭圆形或卵形，很少为狭长椭圆形，长8cm～18cm，宽3cm～8cm，顶部渐尖或短突尖，基部楔形至宽楔形，全缘，中脉在叶面凸起，支脉纤细。质地叶无毛，纸质至近革质。理化指标木姜叶柯甜茶理化指标见表2。表2 木姜叶柯甜茶理化指标项目指标水分含水率（%）总灰分总灰分的含量（%）醇溶性浸出物醇溶性浸出物的含量（%）主要特征成分TLC法：荧光斑点HPLC法:保留时间、峰面积检测方法外观检测理化检测执行《中国药典》（2020年版）附录水分测定法规定的第一法测定。总灰分执行《中国药典》（2020年版）附录灰分测定法规定的总灰分测定法测定。醇溶性浸出物（2020年版95%乙醇作为溶剂。主要特征成分TLC取本品粉末1.0g，加入60%乙醇溶液30mL超声处理30min，过滤，滤液蒸干，加入10mL二级水使其溶解，过滤，加入20mL饱和正丁醇溶液振摇提取，用20mL二级水洗涤转移全部正丁醇提取液到旋转1.0mL1.0g，同法制成对照药材溶液。参照《中华人民共和国药典》（2020年版）附录—薄层色谱法，吸取上述两种溶液各10G为展开剂进行展开，取出并晾干，喷以2365nm)下检视。供试品TLC色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显示相同颜色的荧光斑点。结果图片见附录图A.1。HPLC色谱参考条件色谱柱：InetSutainC8(250mm4.6mm，5μm)；流动相：乙腈（A）-.04%甲酸（B）梯度洗脱（表2）；流速：0.8mL·mi；柱温：40℃；进样量：5.0μL。检测波长：根皮苷（85n）三叶苷（285nm）。混合标准品色谱图见图B.1。表3 梯度洗脱流动相比例时间（min）A(%)B(%)0.01287214.00287230.00406035.00287235.0159540.0059540.01287245.002872标准品溶液制备精确称取真空干燥至恒定质量的根皮苷对照品20.0mg、三叶苷19.0mg，分别置于10mL容量瓶中，加入70%乙醇溶解并定容，摇匀，即得根皮苷和三叶苷单一标准品母液。精密吸取两种单一标准品母液0.15mL，置于10mL容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，摇匀，得混合标准品溶液。供试品溶液制备将样品干燥、粉碎、研磨，样品过65目筛，备用。称取木姜叶柯样品粉末0.25g，置于25.0mL具塞锥形瓶中，加入70%乙醇10mL，100W、40kHz条件下超声提取30min，取出、放冷、定容、摇匀、离心，取上清液1mL置于10mL70%乙醇定容，摇匀，用0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液供测试。木姜叶柯样品HPLC图见图C.1。标准曲线绘制依次精密量取采取5.2.4.2.2方法配制的混合标准溶液0.005mL、0.01mL、0.025mL、0.05mL、0.1mL、0.25mL、0.5mL和1.0mL置于1.0mL容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，得系列质量浓度溶液。取各个浓度的标准品溶液各5μL注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以样品浓度XY为0.9999，线性范围0.15μg/mL–29.40μg/mL；三叶苷Y＝1.5891X-0.8743，为0.9998，线性范围0.14μg/mL–27.93μg/mL。同法逐级稀释，分别以信噪比S/N＝3和S/N＝10的进样浓度确定检测限和定量限。样品测定分别取木姜叶柯粗粉，按5.2.4.2.3的方法每份样品平行制备3份供试品溶液，按5.2.4.2.1的色谱条件进行测定，利用5.2.4.2.4的方法建立的标准曲线，计算各供试品中根皮苷、三叶苷成分的含量。建档附 录 A（资料性）TLCA-紫外灯（365nm）；DY为大叶甜茶；DZ为甜茶对照品；SYG为三叶苷标准品；GPG为根皮苷标准品；ZY为紫叶甜茶；JY为尖叶甜茶图A.1木姜叶柯薄层层析