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仅供个人学习参考仅供个人学习参考体验制备细胞膜的方法教学设计背景资料生物膜的研究发展迅速。要研究生物膜的组成、结构及功能,首先必须分离出纯净的细胞膜。分离得到的哺乳动物的红细胞膜,一般称为“血影” 。哺乳动物成熟的红细胞中没有一般真核细胞所具有的细胞核和细胞器,容易用它制备纯净的细胞膜。此外,哺乳动物的血液也比较容易获得,因而是研究细胞膜的理想材料。□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□,□□□□□,□□□□□ □□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□, □□□□□□□□, □□□□□□□□□□ 第三□□□□□□□□□□□□□□□□□□□ 洗涤,□□□□□□□□□□□□□□□, 最终获得□□□□□□□□□11材料 □□□□□□□□□21用具 □□□,□□□,□□,□□□,□□□,□□□,□□□,□□□□31试剂 □□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□ 019%的NaCl□□□,□□□□清水。41操作要点□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□1mL□□□□,□□□□□□,□□□□□□ 2mL,在 2000r/min□□□□□ 5min。去□□□,□□□□□□□□□□□ 2mL,□□□□□,□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□1)取一个 5mL□□□□,□□□□□□ 213mL。2)用滴管在沉淀的下层吸取一小滴血细胞,滴入小烧杯的生理盐水中,以达到稀释红细胞的目的,以免观察时,由于细胞密度太大,影响观察效果。3)取另一个滴管,在小烧杯中轻轻搅拌,然后吸取少量的血细胞稀释液,在载玻片的中央滴很小的一滴,加盖玻片。4)先在低倍镜下观察红细胞的正常形态,可见其边缘完整发亮。仅供个人学习参考仅供个人学习参考(5)在盖玻片的一侧加一滴蒸馏水或清水,在另一侧非常小心地用吸水纸慢慢地吸引,防止把红细胞全部吸入吸水纸中而影响观察。边加水边观察,注意红细胞的形态变化。红细胞会随着水流向一侧漂移,观察时注意移动玻片。红细胞体积逐渐变大,变得非常鼓胀,在视野中可以找到少数胀破的红细胞,它们已失去完整发亮的边缘,变成弥散状。5.需要注意的几个问题(1)制作临时装片时,红细胞必须稀释,而且取红细胞的量要少。(2)在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴加蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸吸引。上述操作均在载物台上进行,并随时调整镜筒高度,持续观察细胞的变化。在盖玻片一侧滴不要将血吸引。上述操作均在载物台上进行,并随时调整镜筒高度,持续观察细胞的变化。在盖玻片一侧滴不要将血细胞吸走。400倍以上。31400倍以上。41操作中要认真观察才能看到连续的变化过程。具体教学步骤11分析实验原理□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□,□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□,而□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□?□□□□□□□?□□□□□□□□?根据学生的回答,肯定溶血的方法。再进一步提问,如何将细胞膜与细胞其他成分分离开?引导学生了解离心技术的应用。由于细胞膜非常薄,通常要在心多次,才能得到纯净的细胞膜。由于时间和条件的限制,5000r/min及9000r/min条件下反复离我们在课上只用显微镜来观察红细胞溶血前后细胞边界的变化,以此来体验细胞膜的存在,并对细胞膜的制备方法有一个初步的体验。2.明晰实验步骤让学生讨论,设计具体的实施步骤。教师对学生设计的步骤进行补充完善。具体实施步骤参见“操作指南”。关于操作要点和难点,可以提出以下问题引发学生思考。例如,在载玻片上滴加的血细胞多些好还是少些好?在盖玻片另一侧用吸水纸吸引时, 要注意什么?如何把握观察溶血后的红细胞的最好时机?教师针对问题,指出操作要点并讲明原因。3.分组实验学生进行分组实验,教师给予具体的指导和评价。4.展示和讨论实验结果□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□实验反思■本实验中可以考查学生的基本实验技能有:临时装片的制作,显微镜的使用等。21关于实验结果的评价。如果实验成功,可以看到近水部分的部分红细胞体积增大,很快会□□□□□□□□□□□□□,□□□□□31影响实验结果的因素可能有以下几个方面。11红细胞发生溶血的比例与操作是否得当有关。21显微镜使用是否熟练。31是否认真、连续地观察。教学反思□
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