2型糖尿病患者抗氧化指标的变化

2型糖尿病患者抗氧化指标的变化

自由反应和非酶糖基化可能是糖尿病及其并发症的重要因素。所有需氧生物体内均可产生自由基/活性氧,她们在机体内执行许多正常的生理功能。另一方,过多的自由基攻击重要的生物大分子,导致机体损伤。所以需氧生物体内都有清除自由基的防御体系,SOD、GSH-PX,它们的改变或变化对机体的生长、发育、成熟、衰老和死亡起着不可低估的生理或病理性的调控作用。脂质过氧化物被认为是由自由基产生,它参与糖尿病并发症的发生。一种测定脂质过氧化物方便而敏感的方法是定量测定他们的代谢终末产物—MDA。糖尿病患者体内自由基生成增加而清除自由基系统明显受损。在1型糖尿病人的非糖尿病亲属中其机体的氧化还原状态存在异常。2型糖尿病与抗氧化剂与自由基之间的平衡失调有关。目前测定糖尿病患者血清、红细胞中的SOD、GSH-PX、MDA、T-AOS水平,各研究结果极不一致,有升高,降低,及无变化。其相关因素的研究结果也极不一致。为了去除红细胞膜胆固醇,脂肪酸浓度的影响,本研究测定患者血清中SOD活性,GSH-PX活性,MDA,T-AOS水平,抗氧化比值AOR=SOD/MDA。1对象和方法1.1患者酮症或不良反应2型糖尿病患者168名(WHO1999年糖尿病诊断分型标准)。所有患者均除外下列疾病:急性心肌梗塞,急、慢性心力衰竭,急、慢性心律失常,不稳定心绞痛,脑梗塞、脑出血急性期,肝、肾功能不全,急、慢性感染,肿瘤,结缔组织病。除12名新诊2型糖尿病患者以反复酮症收住入院外,其他患者均无酮症。酮症患者在酮症纠正3日后取血。1.2患者的血常规定受检者隔夜空腹取静脉血测定胰岛功能,血清脂质、糖化血红蛋白HbA1c、纤维蛋白元FIB、SOD、MDA、T-ROC、GSH-PX,测定血压,留取24小时尿液放免测定尿微量白蛋白定量(UMA)。诊断糖尿病不到一年患者为新诊糖尿病组(n=52),病程大于等于一年患者为长期糖尿病组(n=116)。新诊糖尿病患者根据有无酮症分为酮症组(n=12)和非酮症组(n=40)。正常对照组(n=42)来自某高校教师,血压<130/80mmHg,血脂正常,无心、脑血管疾病。SOD、MDA、T-ROC、GSH-PX试剂盒购自南京建成,严格按照说明书进行操作。取血分离血清后立即测定。计算抗氧化比值AOR=SOD(NU/ml)/MDA(nmol/ml)。1.3实验室数据的均数评定所有资料均输入微机,使用SPSS10.0统计软件处理。实验室数据以均数±标准差表示,两组以上比较采用ANOVA,组间比较用q检验。两组间比较用独立t检验法。P<0.05被认为有统计学差异。2gsh-px与病理变化指标的相关关系见表1糖尿病组和正常对照组在年龄,性别上均有可比性。2型糖尿病人SOD与病程(r=-0.604),年龄(r=-0.226),UMA(r=-0.411)负相关(P<0.01),与收缩压(r=-0.154)负相关(P<0.05)。MDA与年龄(r=0.252),病程(r=0.403),收缩压(r=0.208),FPG(r=0.273),GHO(r=0.396),LDL(r=0.419),HbA1c(r=0.327)正相关(P<0.01),与UMA(r=0.173)正相关(P<0.05)。MDA与SOD(r=-0.261)负相关(P<0.01),GSH-PX与病程(r=-0.710),年龄(r=-0.508)负相关(P<0.01),与SOD(r=0.530)正相关(P<0.01),与MDA(r=-0.467)负相关(P<0.01)。T-AOS与年龄(r=-0.339),病程(r=-0.544),FPG(r=-0.459),服75g葡萄糖2小时后血糖(r=0.232),服75g葡萄糖2小时后血清胰岛素水平(r=0.241),HbA1c(r=0.535),UMA(r=0.259)负相关(P<0.01),与SOD(r=0.520),GSH-PX(r=0.475)正相关负相关(P<0.01),与MDA(r=0.536)负相关(P<0.01)。抗氧化比值SOD/MDA与病程(r=-0.644),年龄(r=-0.273),FPG(r=-0.311),UMA(r=-0.398)负相关(P<0.01),与收缩压(r=-0.183),HbA1c(r=-0.194)负相关(P<0.05),与SOD(r=0.949),GSH-PX(r=0.600),T-AOS(r=0.614)正相关(P<0.01),与MDA(r=-0.541)负相关(P<0.01)。正常对照组,新发糖尿病组,长期糖尿病组,T-AOS,SOD/MDA逐渐降低,MDA逐渐升高,差异有显著性(P<0.01),但正常对照组,新发糖尿病组之间SOD值差异无显著性(P>0.05),两组又高于长期糖尿病组(P<0.01),甚至新发糖尿病组GSH-PX高于正常对照组,两组又高于长期糖尿病组(P<0.01)。见表1。新发2型糖尿病患者,酮症组服75g葡萄糖2小时后血糖和HbA1c高于非酮症组(P<0.05)。胰岛素和C肽低于非酮症组(P<0.05),SOD和GSH-PX高于非酮症组(P<0.05),MDA、T-AOS、SOD/MDA值两组无差异。见表2。3糖尿病患者中sod的变化情况2型糖尿病与抗氧化剂与自由基之间的平衡失调有关。人体内促氧化剂和抗氧化剂是处在一种动态平衡之中。若促氧化剂作用增大或抗氧化剂作用下降,机体便处于氧化应激状态。糖尿病患者体内自由基生成增加而清除自由基系统明显受损。本研究发现2型糖尿病人SOD与病程,年龄,FPG,UMA、收缩压负相关;MDA与年龄,病程,收缩压,FPG,CHO,LDL,HbAlc正相关,与UMA负相关,MDA与SOD负相关。GSH-PX与病程,年龄负相关,与SOD正相关,与MDA负相关;T-AOS与年龄,病程,FPG,服75g葡萄糖2小时后血糖,胰岛素,HbAlc,UMA负相关,与SOD,GSH-PX正相关,与MDA负相关;抗氧化比值SOD/MDA与病程,年龄,FPG,HbAlc,UMA、收缩压负相关,与SOD,GSH-PX,T-AOS正相关,与MDA负相关。正常对照组,新发糖尿病组,长期糖尿病组,T-AOS,SOD/MDA逐渐降低,MDA逐渐升高,但新发糖尿病组与正常对照组之间SOD值差异无显著性,两组均高于长期糖尿病组,甚至新发糖尿病组GSH-PX高于正常对照组,两组又高于长期糖尿病组。新发2型糖尿病患者,酮症组服75g葡萄糖2小时后血糖和HbAlc高于非酮症组,胰岛素和C肽低于非酮症组,SOD和GSH-PX高于非酮症组,MDA、T-AOS、SOD/MDA值两组无差异。有研究发现,血管内皮细胞暴露于非致死浓度的氢过氧化物中,引起SOD表达增加,提示一种适应现象。在酮症这种急性疾病状态下,引起氧化应激,可能会改变抗氧化剂表达水平。而随着糖尿病病程进展,Cu,Zn-SOD的非酶糖基化会导致它裂解并且降低它的活性。这可能是众多关于血清SOD与糖尿病关系研究相矛盾的原因。SODs是金属酶,是超氧阴离子转变为H2O2和O2所必需的。因为超氧阴离子能与H2O2反应产生单线态氧和羟自由基,它比超氧阴离子或H2O2活性更大,更具毒性。因此SODs是细胞防御氧毒性的重要基本成分。哺乳动物组织中存在3种SODs。Cu,Zn-SOD位于胞浆,Cu,Zn-SOD的两个lysine残基lys-122和lys-128是基本的糖基化位点,位于分子的表面。这些位点同时位于活性基团,是酶活性的重要成分。高血糖状态下,Cu,Zn-SOD被糖基化灭活,也是导致糖尿病并发症的重要原因。第二种同工酶Mn-SOD的表达位于线粒体基质,其调节方式很复杂,IL-1,IL-6,TNF,LPS等刺激它的表达。这种酶可能在炎症反应中参与损伤的防御机制。第三种同工酶:细胞外SOD是高度糖基化的,对硫酸肝素有很大的亲和力,其肝素结合区域的错义突变明显增加这种酶的血清水平。它清除血浆中的超氧化物。2型糖尿病患者体内SOD代谢失常,抗过氧化能力减弱,致肾小球遭受长期慢性的过氧化损伤,可能是糖尿病肾病形成及其发展机制中的中心环节。通过对转基因糖尿病大鼠的研究发现,Cu,Zn-SOD过度表达可以通过几种不同的机制防止糖尿病肾病的发生。慢性血管并发症是糖尿病人的重要死亡原因,ROS(氧化应激)可能起重要作用。许多生化途径与高血糖有关,如:葡萄糖自氧化,蛋白糖基化等,它们增加超氧阴离子,猝灭NO,后者是有力的内皮依赖的血管舒张因子,参与血管功能的调节。抗氧化治疗可以逆转内皮功能失调。高血糖激活血管细胞PKC,通过PKC依赖的NAD(P)H氧化酶的激活,产生ROS。ROS能引起动脉的损伤。这种酶还参与血管紧张素Ⅱ诱导的高血压和血管平滑肌增生。胰岛素抵抗与动脉粥样硬化之间的一个重要联系是升高的血浆游离脂肪酸(FFAs),升高的FFAs也是通过这种途径引起损伤的。离体研究通过使Mn和Cu,Zn-SOD基因转导到糖尿病动物的动脉上,使得SOD