非发酵菌特征及鉴定思路

非发酵阴性杆菌特征

及鉴定思路1整理ppt内容非发酵细菌分类主要非发酵细菌特征非发酵细菌耐药特征临床最常分离非发酵细菌鉴定2整理ppt非法酵革兰阴性杆菌感染特点引起临床各科室人体各部位感染鉴定比肠杆菌科复杂耐药谱广临床治疗困难3整理ppt非发酵菌的分类和生物学特性不发酵葡萄糖有氧方式代谢

包括不同的科、属、种缺乏糖酵解酶类代谢必须在有氧环境中进行

非发酵菌

NonfermentativeBacilli不是细菌分类的正式名称是对一大群细菌的统称4整理ppt非发酵菌的分类和命名

与肠杆菌科不同，非发酵菌不能简单地归于具有明显特征的某一菌科，且很多非发酵菌的正确分类问题仍未解决主要的非发酵菌分为6个科1分类不明其余不属于以上菌科的非发酵菌暂时归类于分类学尚未明确的细菌5整理ppt非发酵细菌原分类:

假单孢菌科奈瑟菌科未分科6整理ppt非发酵细菌现代分类假单孢菌科产碱杆菌科甲基球菌科根瘤菌科黄杆菌科莫拉菌科未定7整理ppt

临床常见非发酵菌的分类

科名

属名

假单胞菌科假单胞菌属寡氧（窄食）单胞菌属伯克菌属甲基球菌科甲基杆菌属产碱杆菌科产碱杆菌属鲍特菌属根瘤菌科土壤杆菌属黄杆菌科黄杆菌属金色杆菌属稳杆菌属威克菌属伯杰菌属无色杆菌属莫拉菌科莫拉菌属不动杆菌属分类不明玫瑰单胞菌属人苍白杆菌鞘氨醇菌属8整理ppt与鉴定方法相关的分组第一组有动力,极鞭毛:

假单胞菌科rRNA群I~V

第二组有动力,周鞭毛:

产碱杆菌科产碱杆菌属

第三组无动力,OXI(+):

黄杆菌科黄杆菌属华丽杆菌属稳杆菌属第四组

无动力,OXI（-）不动杆菌属9整理ppt非发酵菌的分类假单胞菌科

rRNAI群rRNAIII群

rRNAV群rRNAIV群rRNAII群假单胞菌属伯克菌属丛毛单胞菌属短波单胞菌属寡养（窄食）单胞菌属有动力极鞭毛第一组10整理ppt假单孢菌科根据rRNA-DNA同源性

研究分为5组

rRNA-I:假单孢菌属铜绿荧光恶臭门多萨产碱斯氏类产碱11整理ppt假单胞菌属生物学特性G-杆菌直或微弯一根或多根极鞭毛氧化利用葡萄糖氧化酶阳性12整理pptrRNAII伯克菌属:类鼻疽;葱头;唐菖蒲;皮氏;13整理ppt伯克菌属生物学特性所有rRNAII群的细菌归入一个新的菌属伯克菌属包括13个种其中假鼻疽伯克菌葱头、唐昌蒲、皮氏伯克菌均以前称为假单胞菌14整理ppt伯克菌属生物学特性葱头伯克菌

G-杆菌多根极鞭毛氧化利用葡萄糖氧化酶阳性弱阳15整理ppt伯克菌属生物学特性葱头伯克菌黄色菌落赖氨生长无特殊要求SXT敏感常用药物氨基糖甙类天然耐药酸阳性植物病原菌葱头腐烂和人类的坏疽水源和潮湿表面16整理ppt唐菖蒲伯克菌伯克菌属生物学特性黄色无荧光菌落氧化酶阴性不分解麦芽糖ONPG阳性尿酶阳性17整理ppt伯克菌属生物学特性皮氏伯克菌生长缓慢3个生物型1~2根鞭毛针尖样菌落18整理ppt伯克菌属生物学特性类鼻疽伯克菌人和动物类鼻疽病生长有特定区域存在于赤道南北纬20度之间的土壤和不流动的水中，主要泰国和越南。大多数感染无症状，只能通过血清学诊断刺激性泥土味生长无特殊要求19整理pptrRNAIII丛毛菌科:丛毛单胞菌属食酸菌属20整理ppt丛毛单胞菌科生物学特性具有特征性的长极丛鞭毛

食酸丛毛单胞菌最常分离

通过OF果糖甘露醇乙酰胺阳性与其它菌相鉴别唯一橘黄色吲哚反应

OF葡萄糖培养基上不产酸21整理ppt丛毛单胞菌属生物学特性丛毛单胞菌属土生单胞菌不是人类致病菌食酸丛毛单胞菌机会感染菌唯一橘黄色吲哚反应睾酮丛毛单胞菌属

极为少见22整理ppt食酸菌属食酸菌属生物学特性敏捷食酸菌中泛食酸菌德氏食酸菌氧化酶阳性有动力氧化利用糖类临床意义不明23整理pptrRNAIV短波单胞菌属缺陷短波单胞菌泡囊短波单胞菌24整理ppt短波单胞菌属生物学特性短波单胞菌属氧化酶阳性不分解糖醇或反应很弱短波紧密螺旋单极鞭毛生长缓慢48h可见菌落深黄到橘黄色素七液苷阳性区别于其他产碱假单胞菌临床少见体弱免疫力低下患者感染

菌血症25整理pptrRNAV寡养单胞菌属或窄食单胞菌属嗜麦芽寡氧单胞菌26整理ppt嗜麦芽寡养单胞菌名称变化寡养单胞菌属生物学特性1961年嗜麦芽假单胞菌

1983年嗜麦芽黄单胞菌1993年嗜麦芽寡养（窄食）单胞菌寡养(窄食)单胞菌属27整理ppt寡养单胞菌属生物学特性无溶血呈淡绿色或浅绿色有氨水味血平板菌落粗糙菌落特点28整理ppt氧化酶阴性葡萄糖氧化缓慢麦芽糖快速氧化赖氨酸DNA阳性寡养单胞菌属生物学特性生化反应29整理ppt耐药特点寡养单胞菌属生物学特性天然耐药泰能SXT敏感氨基糖甙类30整理ppt不定菌属的非发酵菌金色单胞菌属黄色单胞菌属（浅黄假单胞菌）浅金黄单胞菌栖稻黄色单胞菌（栖稻黄色假单胞菌）31整理ppt不定菌属的非发酵细菌鞘氨醇希瓦菌属希瓦16个种深海羽田少动鞘氨醇菌有意义单胞菌属32整理ppt鞘氨醇单胞菌:16个少动鞘氨醇有意义希瓦菌:希瓦深海33整理ppt非发酵菌的分类第二组有动力周鞭毛土壤杆菌属医学上唯一有意义的菌属根瘤菌科产碱杆菌科产碱杆菌属鲍特菌属34整理ppt非发酵菌的分类条件致病菌院内感染产碱杆菌属木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种脱硝亚种粪产碱杆菌皮氏产碱杆菌35整理ppt非发酵菌的分类产碱杆菌的主要生物学特性菌种硝酸盐丙二木糖葡萄糖粪产碱-+--木糖氧化亚种++++脱硝亚种++--皮氏产碱杆菌----36整理ppt产碱杆菌属生物学特性产碱杆菌属粪产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种

脱硝亚种皮氏产碱杆菌（1986年描述）37整理ppt产碱杆菌属生物学特性粪产碱杆菌临床标本中最常见菌落细小边缘不规则在碳水化合物培养基上强烈碱性反应还原亚硝酸盐不还原硝酸盐38整理ppt黄杆菌科黄杆菌属金色杆菌属稳杆菌属威克菌属伯杰菌属非发酵菌的分类第三组无动力氧化酶阳性分类学不明鞘氨醇菌属寡源菌属莫拉菌属华丽杆菌属39整理ppt最新分类变动很大金色杆菌属粘黄杆菌产吲哚黄杆菌大比目鱼黄杆菌脑膜败血黄杆菌大菱鲆黄杆菌黄杆菌科生物学特性40整理ppt被重新分为短稳杆菌归为新的属—Myroides，水生约翰食果胶嗜冷嗜糖琥珀黄杆菌

黄杆菌属吲哚都是阴性芳香黄杆菌短黄杆菌在人类临床标本中尚未发现黄杆菌科生物学特性41整理ppt嗜醇鞘氨醇杆菌黄杆菌科分类及生物学特性临床标本中遇到的已有新的归属的种脑膜败血金色杆菌IIb黄杆菌（伯杰手册归入金粉黄杆菌）短稳黄杆菌多食鞘氨醇杆菌42整理ppt第IV组

无动力氧化酶阴性

不动杆菌属43整理ppt不动杆菌的分类主要生物学特性新一版伯杰手册醋酸钙不动杆菌开始被归于奈瑟菌科但最近又被归于莫拉菌科DNA-DNA杂交营养特征17个基因种利用生化特征生长试验可区分其中16个基因种7个基因种有菌名44整理ppt不动杆菌的分类主要生物学特性只有7个基因种有菌名：基因种1——醋酸钙基因种2——鲍曼基因种4——溶血基因种5——琼氏基因种7——约翰逊基因种8——洛菲不动杆菌其余基因种未命名45整理ppt不动杆菌的分类主要生物学特性生物学特性血琼脂菌落圆形光滑边缘整齐灰白色一般无色素有的产生黄褐色色素

G-球杆菌常成对排列不易脱色常染成假阳性拉丝试验容易成假阴性有的种产生ß溶血46整理ppt不动杆菌的主要生物学特性氧化酶阴性触酶反应不定吲哚H2S甲基红VP反应均阴性不产生赖、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶有的种能产生苯丙氨酸脱氨酶所有种不能还原硝酸盐大多数能利用枸橼酸盐无动力，硝酸盐还原阴性47整理ppt非发酵菌的生物学特性G-杆菌球杆菌氧化酶大多阳性少数阴性多数菌属有动力少数无动力极生周生鞭毛无鞭毛OF糖大多氧化型少数产碱或不利用48整理ppt非发酵菌的鉴定临床标本中最常见铜绿鲍曼不动嗜麦芽窄食单胞菌选择少数关键性试验便可容易鉴定快速为临床医生提供信息

简便法49整理ppt非发酵菌的鉴定

分组法非铜绿鲍曼不动嗜麦芽必须增加其他试验进行种的鉴定根据动力和氧化酶将各种临床上重要的非发酵菌分为四个部分50整理ppt非法酵革兰阴性杆菌的共同特点在中国兰或麦康开选择培养基上呈不发酵乳糖的菌落(中国兰上粉红色)氧化酶大多阳性有鞭毛或无鞭毛革兰阴性杆菌或球杆菌不能发酵糖色素51整理ppt鉴定非发酵革兰阴性杆菌的

基本步骤初始菌落识别:在中国兰或麦康开培养基上呈不分解乳糖的菌落氧化酶革兰染色色素确认非发酵细菌O/F鞭毛染色选择鉴定系统API20NEATBVIEK2Compact等52整理ppt临床常见非发酵革兰阴性细菌的耐药特征铜绿假单孢菌不动杆菌嗜麦芽窄食单孢菌53整理ppt绿脓杆菌耐药机制膜蛋白缺失使通透性下降高产ampC酶;产ESBL;产金属酶泵出机制54整理ppt铜绿假单孢菌铜绿假单胞菌的细胞外膜上没有大多数革兰阴性细菌所具有的典型的高渗透性孔蛋白，它的孔蛋白通道对小分子物质的渗透速度仅为典型孔蛋白通道的1%。

55整理ppt产KPC酶国内：已在肠杆菌科的多个菌属中有报道。肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、产酸克雷伯菌、沙门菌属、弗劳地柠檬酸杆菌和铜绿假单胞菌等。该类酶除阴沟肠杆菌可有染色体介导外，其他各类细菌均可为质粒介导，已成为临床治疗难题56整理ppt如何检测?产KPC酶的菌株用常规药敏试验不容易检出。CLSI关于碳青霉烯类的判断标准：厄他培南≤2μg/ml

亚胺培南、美罗培南≤4μg/ml因此，MIC2μg/ml或4μg/ml的菌株仍可判断为敏感的警惕：在常规药敏中如遇第三、第四代头孢菌素以及其他的β-内酰胺类耐药的菌株均应该进行稀释法测定碳青霉烯类的对这些菌株的MIC。57整理ppt检测KPC酶的最佳底物厄他培南是检测KPC酶的最佳底物。建议1：可将该药列为常规药敏试验的品种建议2：对所有具有ESBLs/AmpC酶样表型（即对第三、第四代头孢菌素耐药）的肠杆菌科细菌采用纸片法或MIC法（E-试验）进行厄他培南（和其他碳青霉烯类）的测定。如MIC为2或4μg/ml应视作有产KPC酶和其他碳青酶霉烯酶的可能。这时应与临床医师联系，并将该菌株送往参考试验室作进一步的研究。58整理ppt改良的Hodge试验0.5麦氏浊度单位大肠埃希菌

ATCC25922涂布MH平板中间贴亚胺培南（10μg）纸片接种待检菌的无菌接种环自纸片外缘向平板边缘划线35℃过夜培养结果判断：亚胺培南抑菌圈内出现待检菌矢状生长者为产碳青霉烯酶菌株PCR扩增试验、DNA测序证实为某种KPC酶EcoliATCC25922KPC+？KPC-KPC+？59整理ppt不动杆菌的耐药机制对多种窄谱－内酰胺酶耐药由于TEM－1和CARB型－内酰胺酶对新型三代头孢菌素耐药是因为产大量染色体头孢菌素酶和超广谱的TEM酶60整理ppt

不动杆中最主要的碳青霉烯酶是D类酶

OXA-23、24、25、26、27、40、49、51、54、55、58、60该酶能水解亚胺培南、青霉素，但不水解三代头孢菌素.不动杆菌主要耐药机制61整理ppt不动杆菌中还产IMP或VIM型金属酶，该酶水解底物范围广，包括碳青霉烯类、青霉素类和头孢菌素抗生素，不被克拉维酸等酶抑制剂抑制，但能被EDTA、2-巯基丙酸