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文档简介
尿酸度蛋白糖化学检查酸碱度蛋白质(protein,Pro)葡萄糖(glucose,Glu)酮体(ketonebody,Ket)胆红素(bilirubin,Bil)尿胆原(urobilinogen,Uro)血红蛋白(hemoglobin,Hb)亚硝酸盐(nitrite,Nit)
指示剂法
pH试带法
滴定法
pH计法
尿液酸碱度测定筛检方法,试带易变质。繁琐,少用。准确度高,需特殊仪器。结果粗略,易受干扰。三.临床意义1.酸碱平衡状态的观察指标尿pH降低:代谢性酸中毒、痛风、糖尿病尿pH增高:代谢性碱中毒、肾小管酸中毒2.作为尿液其它检查项目的质控指标二.参考值pH5.5~6.5随机尿正常尿液中只含有极微量的蛋白质(30~130
mg/24h),用常规化学定性的方法不能检测出。所以正常人尿蛋白定性为阴性。当尿中蛋白排出量>150
mg/24h、或尿中蛋白浓度>100
mg/L时,常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿(proteinuria)。尿蛋白定性试验干化学试带法加热乙酸法磺基水杨酸法一.原理加热可使蛋白质变性,加酸可使蛋白质接近等电点,促进变性的蛋白质沉淀并消除因加热造成的碱性盐类结晶。二.试剂法热乙酸加三.方法加热→加酸→再加热→观察结果5%乙酸溶液,加热上1/3段至沸腾,观察有无浑浊。2.加乙酸溶液2~4滴,再煮沸后立即观察。阴性(-):清晰透明
微量(±):轻微浑浊
弱阳性(+):白色浑浊无颗粒
阳性(++):浑浊,有明显颗粒
强阳性(+++):大量絮片状沉淀
最强阳性(++++):出现凝块
四.结果判断法热乙酸加五.注意事项1.加酸过多或过少可致阳性减弱或假阴性。
2.无盐或低盐饮食病人可致假阴性。
法热乙酸加解决方法:先滴加饱和氯化钠液1~2滴
3.试验完立即判断结果,否则阳性增强。
一.原理酸性环境下,磺基水杨酸的磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合成不溶性蛋白盐沉淀。二.试剂三.方法清晰尿液1ml,加磺基水杨酸溶液2滴,轻轻混匀,1分钟内观察结果。磺法水杨酸基200g/L磺基水杨酸溶液四.结果判断五.注意事项2.一些药物可呈假阳性。
3.尿中含高浓度尿酸盐可呈假阳性。
4.尿液可致假阴性。
磺法水杨酸基同加热乙酸法1.及时判断结果。
蛋白质与指示剂的离子结合生成复合物,引起指示剂发生颜色变化。颜色的深浅与蛋白质含量成正比。一.原理指示剂的蛋白质误差:二.方法三.结果判断四.注意事项1.试带应干燥、避光保存;注意有效期。2.pH>9可致假阳性;pH<3可致假阴性。干法学试带化3.尿色异常影响结果的观察。4.对球蛋白的敏感性差。加热乙酸法:操作较烦琐;结果可靠;敏感度150mg/L;电解质少时可致假阴性。确证试验。
磺基水杨酸法:操作简便;敏感度50~100mg/L;
易产生假阳性。用于蛋白尿的筛查。干化学试带法:操作简便、快速;对球蛋白敏感度较差;试纸易失效。用于健康普查及肾病的筛查。方法学评价病理性蛋白尿肾性
蛋白尿溢出性蛋白尿假性
蛋白尿组织性蛋白尿蛋白尿形成的原因和机制生理性蛋白尿功能性蛋白尿摄入性蛋白尿体位性蛋白尿蛋白定性≤(+),g/24h
机体在剧烈运动、寒冷、发热、精神紧张等情况下出现的一种暂时性蛋白尿。
直立时出现,卧床休息后消失。
静脉输注蛋白制剂或进食过多蛋白。
生理性蛋白尿肾小球性蛋白尿常大于1g/24h,以白蛋白为主。肾小管性蛋白尿常小于1g/24h,多为β2微球蛋白、溶菌酶。混合性蛋白尿肾小球和肾小管都有病变。肾性蛋白尿病理性蛋白尿溢出性蛋白尿血浆中低分子量蛋白质明显增加,使原尿中的蛋白质超过肾小管的重吸收能力而大量出现于尿中。组织性蛋白尿假性蛋白尿(偶然性蛋白尿)
尿中混入多量血、脓、粘液或生殖系统排泄物而导致蛋白质定性试验阳性。在尿液形成过程中,肾小管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白质以及由于炎症和药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质。尿的蛋白质液分类检验尿中本-周蛋白(BJP)定性检查BJP是免疫球蛋白的轻链。时,加热至56℃时沉淀,继续加热至90~100℃时沉淀溶解,温度降到56℃时恢复凝固。故又称凝溶蛋白。检测方法:热沉淀-溶解法对甲苯磺酸法免疫法不灵敏过筛试验确证试验临床意义:辅助诊断多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等疾病尿的蛋白质液分类检验尿液白蛋白(Alb)定量测定正常情况下不易通过肾小球滤过膜,而且在肾小管被重吸收,所以正常人尿中含量极少。检测方法:免疫分析法化学定量法临床意义:反映早期肾小球功能的损害尿的蛋白质液分类检验机体有核细胞产生的单链球蛋白,可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收,故尿中含量极少。尿β微球蛋白(βMG)定量测定22检测方法:免疫分析法临床意义:肾小管疾病的早期诊断指标正常人尿液中只含有微量的葡萄糖(50~150mg/L),用常规化学定性的方法不能检测出。所以正常人尿糖定性为阴性。糖定性试验呈阳性的尿液称为糖尿(diabeticurine)。是否出现糖尿主要取决于:血糖浓度;肾血流量;肾小管重吸收糖的能力***尿糖定性试验(Glu)葡萄糖氧化酶试纸法班氏法(Benedict法)一.原理二.方法与结果判断葡萄糖葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2
H2O2过氧化物酶H2O
+[O][O]供氢体色素原
氧化显色葡萄糖氧化酶试纸法(无色邻甲苯胺或邻联甲苯胺)2.容器含氧化性物质可致假阳性;1.标本放置过久可致假阴性;(被分解)
3.尿中含高浓度VitC等还原性物质可致假阴性;三.注意事项4.高浓度酮体可致假阴性;解决方法:先将尿液煮沸几分钟再测5.反应时间延长或室温升高可使灵敏度增高。一.原理糖的还原性醛基在热碱性溶液中可将蓝色硫酸铜还原,生成棕红色的氧化亚铜沉淀。二.试剂班氏法(Benedict法)班氏试剂甲液:乙液:冷后将乙液缓缓加入甲液中,边加边混合,冷后过滤。柠檬酸钠、无水碳酸钠、蒸馏水加热五水硫酸铜、蒸馏水加热ml,煮沸,如不变色或无沉淀方可使用。(ml),
混匀,煮沸1~2min,自然冷却后观察结果。三.方法四.结果判断结果反应所见尿中含糖量(mmol/L)-仍为透明蓝色蓝绿色半透明,但无沉淀翠绿色不透明,有少量黄绿色沉淀(绿为主)黄绿色浑浊,有较多黄绿色沉淀(黄为主)+++
土黄色浑浊,有大量土黄色沉淀++++大量砖红色沉淀±+++班氏法尿糖定性结果判断表<5.65.6~11.2<2828~5656~112>1121.标本应新鲜,放置过久可假阴性;2.试剂与尿液比例应为10:1;3.试剂应先煮沸检查是否失效;5.高浓度尿蛋白可致假阴性,故应除去蛋白后再测;6.非糖还原物质如青霉素、水杨酸、
VitC等可致假阳性。4.容器含氧化性物质可致假阴性;班氏法:稳定,mmol/L。但缺乏特异性,其它糖和一些非糖还原物质也可呈阳性;操作复杂。
试带法:
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