广东省潮州市重点中学2023届高三下学期第二次月考生物试题理试题含解析

广东省潮州市重点中学2023届高三下学期第二次月考生物试题[理]试题注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．如图为人体某致病基因控制异常蛋白质合成过程的示意图。据图分析错误的是（）A．过程①表示转录，以一条链为模板，以脱氧核苷酸为原料B．过程②表示翻译，图中核糖体的移动方向是自右向左C．异常多肽中丝氨酸的反密码子为AGA，则物质a模板链相应碱基为AGAD．图中基因控制合成的蛋白质，可能导致膜功能的改变2．下图为初级精母细胞减数分裂时的一对同源染色体示意图，图中1~8表示基因。不考虑突变的情况下，下列叙述正确的是（）A．1与2、3、4互为等位基因，与6、7、8互为非等位基因B．同一个体的精原细胞有丝分裂前期也应含有基因1~8C．1与2在减数第一次分裂分离，1与3在减数第二次分裂分离D．1分别与6、7、8组合都能形成重组型的配子3．下列生物学相关实验的描述中，不正确的是（）A．苹果和梨的果肉组织都含有大量的果糖且近于白色，可用于还原糖的鉴定B．用新鲜的红色花瓣细胞与叶肉细胞做质壁分离的实验材料，有利于观察到明显的实验现象C．探究温度对酶活性的影响时，将酶与底物溶液在室温下混合后了不同温度下保温D．“观察DNA和RNA在细胞的分布”实验中，8%的盐酸作用后要用蒸馏水冲洗涂片4．下列关于孟德尔两对相对性状杂交实验的叙述，正确的是（）A．从F1母本植株上选取一朵或几朵花，在花粉未成熟时将花瓣掰开去雄B．F2中出现的4种表现型，有3种是不同于亲本表现型的新组合C．F1产生配子时非等位基因自由组合，含双显性基因的配子数量最多D．F1产生的雌、雄配子各有4种，受精时配子的结合存在16种组合方式5．如图是质膜的流动镶嵌模型，①~④表示构成质膜的物质，下列叙述正确的是（）A．这是电镜下面观察到的质膜流动镶嵌的结构B．②的尾部和③一起存在于脂双层的内部C．质膜中都存在③，③的存在使得质膜比较“坚实”D．质膜具有选择透性是由④体现出来的6．若除酶外所有试剂均已预保温，则在测定酶活力的试验中，下列操作顺序合理的是A．加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量B．加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量C．加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量D．加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量二、综合题：本大题共4小题7．（9分）已知果蝇的长翅和短翅、红眼和棕眼分别由两对独立遗传的等位基因（A和a、B和b）控制，这两对基因不在Y染色体上。为了确定这两对相对性状的显隐性关系，以及这两对等位基因的位置，研究小组让一只雌性长翅红眼果蝇与一只雄性长翅棕眼果蝇杂交，所得F1的表现型及比例为长翅红眼：长翅棕眼：短翅红眼：短翅棕眼=3:3:1:1。请回答：（1）翅形和眼色这两对基因的遗传遵循________________定律。（2）分析上述结果，可以得出的结论是________________。对性状的显隐性关系以及基因的位置还可作出________________种合理的假设，若理论上分析F1代长翅红眼果蝇中雌性个体所占的比例为0，F1代短翅红眼果蝇中雄性个体所占的比例为1，则所作的假设为________________。（3）用带荧光标记的B、b基因共有的特有序列作探针，与亲代雄果蝇细胞装片中各细胞内染色体上的B、b基因杂交，通过观察荧光点的个数可以判断眼色基因的位置。在一个处于有丝分裂后期的细胞中，若观察到________________个荧光点，则眼色基因位于常染色体上；若观察到________________个荧光点，则眼色基因位于X染色体上。（4）果蝇一种突变体的X染色体上存在ClD区段（用XClD表示）：D基因表现显性棒眼性状，l基因的纯合子在胚胎期死亡（即XClDXClD与XClDY不能存活），正常果蝇的X染色体无ClD区段（用X+表示）。让突变体雌果蝇与正常眼雄果蝇杂交，F1代棒眼果蝇所占的比例为________________，写出遗传图解________________。8．（10分）2019年9月17日，袁隆平被授予“共和国勋章”，以表彰他在杂交水稻研究领域作出的杰出贡献。请根据所学知识，回答杂交育种相关的问题。（1）杂交育种常用到人工授粉的方法，人工授粉的步骤是：去雄→______________→_____→______，该育种方法应用了_________________原理。（2）为了培育出杂交水稻，袁隆平跋山涉水，找到了一种雄性不育的水稻。请简要分析这种水稻对培育杂交水稻的意义。________________9．（10分）某二倍体植物茎的高矮有高茎、中等高茎、矮茎三种情况，由基因A和a控制，a基因能表达某种物质抑制赤霉素合成，基因型中有一个a表现为中等高茎，有两个及以上a表现为矮茎。该植物花色有白色、红色、紫色三种，其花色合成途径如下图，其中B基因的存在能够抑制b基因的表达：（1）选取某纯合白花和纯合紫花植株杂交，F1花色表现为______________________________，F1自交，若F2代表现型有两种，则亲代白花基因型为___________________；若F2代表现型有三种，其表现型及比值为_________________。（2）某纯合紫花高茎植株与纯合红花矮茎植株杂交，F1中出现了矮茎植株，究其原因可能有以下三种情况：①该植株A基因发生了基因突变②外界环境影响导致性状发生了改变③该植株可能是Aaa的三体，为了确定该植株形成的原因，使该植株与亲代纯合红花矮茎植株杂交：若F2代__________________________，则该植株可能是基因突变引起；若F2代___________________，则该植株可能是外界环境影响引起；若F2代____________________，则该植株可能是Aaa的三体。10．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。11．（15分）农业生产中，水淹会使农作物生长受到影响，产量下降。回答下列问题。（1）水淹后土壤含氧量降低，根部细胞_下降，导致根系对矿质元素的吸收能力下降。同时_增强，积累_，根部细胞会受到损伤。（2）根部因缺氧产生信号物质_（植物激素），传递到植株地上部分，一方面导致叶片气孔关闭，直接影响光合作用的_阶段，另一方面该物质也导致叶片提前出现衰老现象。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、A【解题分析】

分析题图：图示为人体某致病基因控制异常蛋白质合成的过程示意图，其中①表示转录过程；②表示翻译过程；a表示DNA分子，b表示mRNA分子。【题目详解】A、图中①为转录过程，以DNA的一条链为模板，需以四种游离的核糖核苷酸为原料，还需要能与基因结合的RNA聚合酶进行催化，A错误；

B、过程②表示翻译，根据两条肽链的长度可知，图中异常多肽链的合成方向是从右至左，B正确；

C、异常多肽中丝氨酸的反密码子为AGA，则其mRNA上的密码子与反密码配对，mRNA上的密码子为UCU，而物质aDNA模板链与mRNA上的密码子配对，故相应碱基为AGA，C正确；D、图中基因控制合成的蛋白质是构成细胞膜的成分，其异常后可能导致膜功能的改变，D正确。故选A。2、B【解题分析】

由图可知，图中为一对同源染色体，1与2、5与6、3与4、7与8为相同基因，1(或2)与3（或4）可能是等位基因，5(或6)与7（或8）可能是等位基因。【题目详解】A、根据以上分析可知，1与2为相同基因，1与3、4可能为等位基因，1与6、7、8互为非等位基因，A错误；B、精原细胞有丝分裂前期与其进行减数分裂时形成的初级精母细胞含有的染色体的数目和基因种类、数目均相同，均含有基因1~8，B正确；C、在不考虑交叉互换的情况下，1与2在减数第二次分裂分离，1与3在减数第一次分裂分离，C错误；D、根据以上分析已知，6与5相同，因此1与6形成的不是重组类型的配子，D错误。故选B。3、C【解题分析】

观察细胞中DNA和RNA的分布的原理DNA主要分布在细胞核内，RNA大部分存在于细胞质中。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进人细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验步骤：取口腔上皮细胞制片→水解→冲洗涂片→染色→观察.在三大有机物质鉴定的实验中选材时应主要选择鉴定物质含量高，且为白色或近乎白色的组织为材料，以保证观察的现象更加明显。【题目详解】A、苹果和梨的果肉组织都含有大量的果糖且近于白色，因此，可用于还原糖的鉴定，A正确；B、用新鲜的红色花瓣细胞与叶肉细胞做质壁分离的实验材料，都有利于观察到明显的实验现象，B正确；C、探究温度对酶活性的影响时，应将酶与底物溶液分别在各自温度梯度下保温，然后再混合，相应温度梯度下保温一段时间后进行检测，C错误；D、“观察DNA和RNA在细胞的分布”实验中，8%的盐酸作用后要用蒸馏水的缓水流冲洗涂片，D正确。故选C。4、D【解题分析】

基因的自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；在减数分裂的过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。【题目详解】A、子一代F1是自交，不需要母本去雄，A错误；B、F2中出现的4种表现型，有2种是不同于亲本表现型的新组合，B错误；C、F1产生配子时非等位基因自由组合，产生的四种配子的比例是相等的，C错误；D、F1产生的雌、雄配子各有4种，受精时雌雄配子随机结合，存在4×4=16种组合方式，D正确。故选D。5、B【解题分析】

细胞膜主要由脂质和蛋白质组成，还有少量的糖类。

细胞膜的功能：1.将细胞与外界环境分开；2.控制物质进出细胞；3.进行细胞间的物质交流。

细胞膜的结构特点是流动性，功能特性是选择透过性。

据图分析，①为糖蛋白，②为磷脂分子，③为胆固醇，④为蛋白质。【题目详解】A、这是质膜的流动镶嵌模型，不是电镜下看到的结构，A错误；B、③胆固醇的作用是与②磷脂的非极性尾部一起存在于脂双层内部，使质膜具有一定的流动性，又比较坚实，B正确；C、并不是所有质膜都有胆固醇，胆固醇是动物细胞膜的重要成分，C错误；D、细胞膜的选择透性与构成膜的磷脂分子和④蛋白质分子都有关，D错误。故选B。【题目点拨】易错点：胆固醇存在于动物细胞和少数植物细胞质膜上，在调节膜的流动性，增加膜的稳定性以及降低水溶性物质的通透性等方面都起着重要作用。6、C【解题分析】

依题意可知，该实验的pH为无关变量，为了排除无关变量的干扰，应控制相同且适宜，而缓冲液能够起到维持反应液的pH恒定的作用，因此需最先加入；酶具有高效性，所以在控制pH恒定的条件下，应先加底物后加酶，让酶促反应在适宜的温度条件下进行，一定时间后检测产物的量。根据题干信息“除酶外所有试剂均已预保温”，所以合理的操作顺序是在调整pH值后，加入酶，即加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量，故选C。【题目点拨】获取题干信息“除酶外所有试剂均已预保温”，根据实验设计中无关变量要保持适宜且相同，科学设计实验程序。二、综合题：本大题共4小题7、自由组合长翅对短翅显性6种翅形基因位于常染色体上；眼色基因位于X染色体上，棕眼对红眼显性421/3【解题分析】

一只雌性长翅红眼果蝇与一只雄性长翅棕眼果蝇杂交，所得F1的表现型及比例为长翅红眼：长翅棕眼：短翅红眼：短翅棕眼=3:3:1:1，F1长翅∶短翅=3∶1，红眼∶棕眼=1∶1，可知长翅和短翅的基因（A和a）位于常染色体上，且长翅为显性，红眼和棕眼的显隐性及基因（B和b）的位置未知，可能有6种情况，亲本的基因型为（关于红眼和棕眼）：①翅形常染色体、眼色X染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（AaXBXb）×长翅棕眼雄性（AaXbY）；②翅形常染色体、眼色X染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（AaXbXb）×长翅棕眼雄性（AaXBY）；③翅形X染色体、眼色常染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（BbXAXa）×长翅棕眼雄性（bbXAY）；④翅形X染色体、眼色常染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（bbXAXa）×长翅棕眼雄性（BbXAY）；⑤翅形常染色体、眼色常染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（AaBb）×长翅棕眼雄性（Aabb）；⑥翅形常染色体、眼色常染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（Aabb）×长翅棕眼雄性（AaBb）。【题目详解】（1）果蝇的长翅和短翅、红眼和棕眼分别由两对独立遗传的等位基因（A和a、B和b）控制，因此翅形和眼色这两对基因的遗传遵循自由组合定律。（2）亲本均为长翅，F1出现短翅，长翅为显性，短翅为隐性。对性状的显隐性关系以及基因的位置还可作出6种合理的假设。若理论上分析F1代长翅红眼果蝇中雌性个体所占的比例为0，则控制红眼和棕眼的基因位于X染色体上，且棕眼为显性，亲本的基因型为：长翅红眼（AaXbXb）×长翅棕眼（AaXBY），F1代短翅红眼果蝇中雄性个体（aaXbY）所占的比例为1。（3）用带荧光标记的B、b基因共有的特有序列作探针，与亲代雄果蝇细胞装片中各细胞内染色体上的B、b基因杂交，亲代棕眼雄果蝇细胞的基因型为XBY或XbY或Bb或bb，有丝分裂后期细胞中的基因数量是体细胞的两倍，若眼色基因位于常染色体上，则观察到4个荧光点（BBbb或bbbb），则；若眼色基因位于X染色体上，则复制后会观察到2个荧光点。（4）让突变体雌果蝇（XClDX+）与正常眼雄果蝇（X+Y）杂交，F1代果蝇为：XClDX+（棒眼雌性）、XClDY（致死）、X+X+（正常眼雌性）、X+Y（正常眼雄性），棒眼果蝇所占的比例为1/3。遗传图解如下，注意表现型中要有性别，各种符号需正确。【题目点拨】熟悉显隐性的判断及基因位置的判断，要学会从子代的表现型推测亲本的基因型，还有注意遗传中的致死问题。8、套袋人工传粉套袋基因重组水稻的花是两性花，进行杂交时要对母本进行去雄，而水稻的花很多且比较小，人工去雄非常困难。如果用雄性不育的水稻作母本，就可以省掉去雄的操作，提高了杂交育种的效率【解题分析】

杂交育种的一般程序为：去雄→套袋→人工授粉→再套袋；若有雄性不育水稻，则可用作母本，省去去雄环节。【题目详解】（1）人工传粉的一般步骤是：在雌花成熟之前去雄，防止自花传粉，然后套袋，待雌蕊成熟时，采集父本的花粉，撒在去雄花的雌蕊的柱头上，再套上纸袋；杂交育种的基本原理是基因重组。（2）水稻是雌雄同花的作物，自花授粉，难以一朵一朵地去掉雄蕊杂交，若有一个雄性不育的稻株，就可以解决这个问题，所以袁隆平历尽千辛万苦在稻田中寻找这样的水稻，并最终找到了，从而使水稻的杂交育种成为可能。【题目点拨】本题的基础是杂交育种的程序，此外需结合题干信息分析雄性不育植株的作用，结合题意分析作答。9、白花BBDD白花：红花：紫花=12∶1∶3全为矮茎中等高茎∶矮茎=1∶1中等高茎∶矮茎=1∶5【解题分析】

孟德尔在做两对杂交实验的时候，发现F2的分离比为9∶3∶3∶1。提出性状是由基因控制的，并且两对等位基因独立遗传。F1在形成配子时，等位基因分离，非等位基因自由组合，产生四种不同的配子，进而雌雄配子结合得到F2分离比9∶3∶3∶1。本题花色遗传是自由组合定律的变式应用，即两对等位基因决定同一种性状，如白花（B_D_、B_dd）、紫花（bbD_）、红花（1bbdd）。生物的表型通常是由基因型决定的，但是也受环境的影响。鉴定植株的基因型，通常采用测交法，即与隐性植株进行杂交，测交可以检测待测个体产生配子的类型及比例。若矮茎植株为aa，则与矮茎植株测交，表现型为矮茎；若矮茎植株为Aa，则说明其受环境因素影响，测交结果为中等高茎∶矮茎=1∶1；若矮茎植株为Aaa，Aaa产生的配子及比例为A∶aa∶Aa∶a=1∶1∶2∶2，则测交后代表现型及比例为中等高茎（Aa）∶矮茎（aa或aaa或Aaa）=1∶5。【题目详解】（1）纯合白花的基因型为BBDD或BBdd，纯合紫花的基因型为bbDD，让白花和紫花植株杂交，F1基因型为BbDD或BbDd，花色表现为白花。F1自交，若F1的基因型为BbDD,则后代表现型为白花（B_D_）和紫花（bbDD），共两种表现型；若F1的基因型为BbDd,则后代表现型为12白花（9B_D_、3B_dd）、3紫花（3bbD_）、1红花（1bbdd），共三种表现型。（2）某纯合紫花高茎植株（AAbbDD）与纯合红花矮茎植（aabbdd）株杂交，杂交后代为AabbDd（中等高茎紫花），但F1中出现了矮茎植株，说明基因组成中含有aa，使该植株与亲代纯合红花矮茎植株（aabbdd）杂交：若F2代全为矮茎，说明原植株不含A基因，则该植株可能是基因突变引起；若F2代中等高茎∶矮茎=1∶1，说明原F1植株含有A基因（Aa），则该植株可能是外界环境影响引起；若F2代中等高茎（Aa）∶矮茎（aa或aaa或Aaa）=1∶5，则该植株可能是Aaa的三体，因为Aaa产生的配子及比例为A∶aa∶Aa∶a=1∶1∶2∶2。【题目点拨】熟练运用自由组合定律是解答本题的关键，另外，解答本类题目时，审题是关键，题干中会提供很多可用的信息，如矮茎的三种原因分析也可以为解题提供思路。10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解题分析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【题目详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同