我国球虫耐药性现状与防治

我国球虫耐药性现状与防治

鸡虫病是由鸡肠的不同部位产生的一种肠肠细胞内寄生虫引起的疾病。该病死亡率20%~30%,严重时高达80%,病愈的雏鸡生长受阻,长期不能恢复,给养鸡业造成巨大的经济损失。自20世纪40年代以来,一直使用有效药物预防球虫病,但这些药物的长期使用,不可避免地导致了耐药虫株的产生。迄今为止,几乎所有的抗球虫药均有耐药虫株的出现,且表现出对与该药同类或作用机理相同的其他药物产生一定程度的交叉耐药性。球虫的耐药性使抗球虫药的使用年限大为缩短,防治效果降低甚至失效,有时即使增加药物浓度,防治效果仍然不佳,导致临床或亚临床球虫病的发生。加之人们对肉蛋中药物残留的日渐关注,解决球虫耐药性的问题已刻不容缓。1其他抗球虫药自Levine发现磺胺类药物对鸡球虫病有疗效,Grumbles首先用磺胺喹噁啉药预防鸡球虫病以来,又陆续发现其他药物如呋喃类、生物碱类、离子载体类等药物都能用来防治球虫病。已报道的抗球虫药达50余种,其中一些药物由于毒性太大或疗效不佳而被淘汰。目前仍在应用的抗球虫药有20余种,大致可分为两大类。1.1碱金属离子检测主要有莫能霉素、盐霉素、拉沙里菌素、马杜拉霉素以及海南霉素等。这类药物具有相似的作用机制,能与碱金属离子相互作用,促进虫体细胞膜两边的离子转运,导致生物膜两侧K+,Na+,Ca2+,Mg2+等阳离子梯度的变化,引起虫体细胞膜功能失调而起抗虫作用。不仅抗球虫谱广,且能促进增重,是目前应用最广泛的抗球虫药。1.2其他方面的药物主要有磺胺喹噁啉、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺间氧嘧啶、氯羟吡啶、氯苯呱、尼卡巴嗪、氨丙啉、地克珠利、妥曲珠利(百球清)、常山酮、球痢灵等。其中有些药物如尼卡巴嗪、氯羟吡啶、磺胺类药物已被列入了出口禽肉禁用的药物。这类药物的作用机制较复杂,如磺胺类通过阻断叶酸合成途径抑制球虫的生长发育。氨丙啉通过竞争性地抑制虫体硫胺摄取而导致硫胺缺乏,阻碍虫体的糖代谢过程而抑制球虫的发育。地克珠利则通过影响嘧啶代谢,使DNA合成受阻而杀死球虫。2鸡球虫的耐药性在国内,田间球虫分离株的耐药性十分普遍,耐药谱广,多重耐药或交叉耐药性明显,尤其在养鸡发达地区更加严重。孔繁瑶等检测了我国12个省市的15株柔嫩艾美耳球虫对5种抗球虫药的敏感性,发现只有杀球灵(Diclazuril,当时尚未在国内广泛应用)具有普遍敏感性,莫能霉素、氨丙啉、克球粉、氯苯胍均具有不同程度的耐药性。汪明等从北京、天津、山东和广东4省市10个鸡场分离的10株柔嫩艾美耳球虫进行了调查,发现30%虫株对马杜拉霉素和百球清有耐药性,40%虫株对拉沙里菌素有耐药性,70%虫株对盐霉素有耐药性,80%虫株对两种或两种以上的药物有耐药性。韩谦等和刘群等证实山东聊城、诸城及潍坊地区的鸡混合球虫对盐霉素、拉沙里菌素、莫能霉素、马杜拉霉素、常山酮均存在不同程度的耐药性,而对氯嗪苯乙氰无耐药性。曾明华等报道,柔嫩艾美耳球虫合肥野外株对盐霉素、莫能菌素和拉沙菌素的抗球虫指数全部低于160。1997年以来,广东省农业科学院兽医研究所寄生虫病研究室对广东省柔嫩艾美耳球虫耐药性进行了系统跟踪调查,发现球净对野外分离株的耐药比例最低(13.6%),其次为氯苯胍(75%)、地克珠利(82.2%)、球痢灵(88.8%)、马杜拉霉素(95.2%),对氯羟吡啶、氨丙啉、盐霉素、拉沙霉素和森杜拉霉素的耐药虫株比例为100%。黄兵等采自上海市9个县区10个鸡场的球虫对6种抗球虫药的耐药程度进行了调查,发现莫能霉素、氯羟吡啶、氨丙啉的效果较差,出现完全耐药的比例高达67%~80%,马杜拉霉素中度耐药和完全耐药的比例为50%,相比之下,氯苯胍和地克珠利效果较好。顾有方等比较了柔嫩艾美耳球虫南京株、凤阳株、扬州株、宣城株和蒙城株对地克珠利、马杜拉霉素、氯羟吡啶、氯苯胍的耐药性。结果发现,凤阳株、扬州株和蒙城株分别仅对马杜拉霉素、氯苯胍和地克珠利敏感,而南京株和宣城株对4种药物均已产生不同程度的耐药性。林青等试验表明,柔嫩艾美耳球虫杨凌株对地克珠利氯苯胍合剂轻度耐药,对三九球痢灵和地克珠利完全耐药,对氯苯呱无耐药性。李佩国等的调查表明,柔嫩艾美耳球虫秦皇岛株对力克球中度耐药,对球敌轻度耐药,而对氨丙啉则无耐药性。综上所述,鸡球虫耐药性在我国已是一个非常严重的问题,由于我国地域的差别,用药习惯的不同,各地的耐药谱也不尽相同。为指导养鸡生产、合理选择抗球虫药物,应加强球虫耐药性的研究和检测工作,以克服用药的盲目性。3抗癫痫药物3.1球虫药使用寿命延长由于新药研制的高昂费用,加上耐药性问题导致抗球虫药使用寿命缩短,因而风险极高。进入20世纪90年代几乎没有新抗球虫药上市。如何合理利用现有药物、尽量延缓耐药性的产生就成了当务之急。3.1.1马杜拉素、克球粉、地克珠利、氨丙啉也称配合用药,即在同一饲养周期内,同时采用两种或两种以上的抗球虫药,以扩大抗虫谱,增强药效,减少药物用量和降低药物的毒副作用。其成功的先例有美国的氨丙啉与乙氧酰胺苯甲酯合剂以及英国的氨丙啉与磺胺喹噁啉配合。在国内,史晓丽等、杨茂生等以及赵振生等分别试验马杜拉霉素+尼卡巴嗪、克球粉+莫能霉素、地克珠利+氨丙啉,以及马杜拉霉素+地克珠利联合使用,其效果均优于各药单独使用。樊生超等报道,聚醚类抗生素与作用于球虫生活史后期的化学合成药联合应用后,既可达到抗球虫增效和促进增重的双重目的,同时大大降低单一药物的用药剂量。试验证明,对常山酮、球痢灵、尼卡巴嗪、马杜拉霉素和拉沙菌素等已产生严重耐药的地方虫株,复合药物对该虫株仍具有良好的抗球虫效力。从而说明,通过联合用药可恢复耐药虫株对药物的敏感性。于咏兰等经过10次传代,诱导出柔嫩艾美耳球虫对复方抗球虫制剂的耐药性,与单一用药相比,耐药性产生速度相对较慢,表明联合用药在一定程度上能延缓耐药性的产生,但长期用药致使球虫产生耐药性仍难以避免。3.1.2常规机械药药即在同一饲养周期内,换用两种或两种以上不同性质的抗球虫药,其目的是减少某种药物的接触时间,以减少耐药性的产生。目前,饲料厂一般用药模式为离子载体类/化学合成类的穿梭用药程序。在国外应用于穿梭的药物较多,如莫能霉素/Diclazurial,盐霉素/Diclazurial,拉萨霉素/Lerbek等。张龙现等设计了以Diclazurial为中心的穿梭用药程序,经田间试验表明,球虫病得到100%控制。在养鸡生产中,应有计划地更换穿梭用药方案,以避免虫株对所使用药物同时产生耐药性。3.1.3球虫耐药性较多的用药策略季节性地或定期更换用药,一般每隔3个月或半年改换一种抗球虫药,以避免耐药虫株的产生或恢复对原来药物的敏感性。但不要改换作用机理和作用峰期相同的药物,以免产生交叉耐药性或变换用药后效果不明显的现象。在球虫耐药性严重的地区,宜采取结合药敏试验结果、以轮换用药为主的用药策略。遗憾的是,至今还没有设计出一种令人满意的方法测定一种抗球虫药在使用多长时间会产生耐药虫株,以指导临床合理轮换用药。3.1.4再使用离子载体类抗球虫药据认为,在一个球虫群中,在5年或更长时间内不接触有关药物的情况下,耐药性是可以恢复的。如Vertommen报道,在使用地克珠利一段时间后再使用离子载体类抗球虫药,可使以前不能用以防治球虫病爆发的这类药物重新获得抗球虫效力。Chapman也报道了在用过球虫苗的鸡群中,对莫能霉素耐受的虫株其敏感性得到了恢复。3.2中草药抗球虫病的作用中草药具有毒副作用小和抑杀球虫、增强机体免疫功能及促生长等优点,尤其是鸡球虫对其不易产生耐药性和无残留,因而有广阔的发展前景。目前,中草药防治鸡球虫病已运用到生产实际,如寥世鹏等以常山、柴胡、苦参、青蒿、地榆炭、白茅根配合而成的“驱球散”抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果优于克球粉和SMZ与青霉素合用。杨再昌以土大黄30%,黄柏30%,黄芩40%的比例配制的中药添加剂,抗球虫指数高达194.3。聂奎等用白头翁、苦参、大黄、白芍、无倍子、陈皮等配制的球康2号,按饲料量的0.5%添加,其保护率高达100%,抗球虫指数为186.68。郑明学等用青蒿、使君子、大黄、当归和地榆等14味中药组方,抗球虫指数达188.3,优于克球粉。目前,中草药防治鸡球虫病仍处于较低的水平,多数停留在田间试验或与某种西药的疗效对比试验上,对其抗球虫病的作用机理尚处于探索阶段。马海利等认为,中药是通过抑制孢子化卵囊的成熟,杀灭孢子化卵囊,提高外周血液淋巴细胞,尤其是T淋巴细胞的数量,提高免疫器官中T、B淋巴细胞的数量和活性来达到抗球虫的目的。彭光辉认为,中药复方制剂以驱虫解毒为主,辅以健胃燥湿、止痢止血等药物使之相互协调,从而达到抗虫的效果。虽然临床上有不少中草药抗球虫病高效的报道,但许多试验有待于进一步验证。由于中草药成分十分复杂,如大黄中已知化学成分有50余种,青蒿则高达90余种,如果是复方制剂其化学成分就更为复杂。因此,今后在分析、整理临床经验的同时,应对中草药驱虫的有效成分、药理和毒理及体内代谢等进行探讨,以寻求低毒、高效、方便、廉价的驱虫新药。3.3日粮对艾美耳球虫感染鸡的影响球虫因改变了鸡的肠道功能而降低鸡对营养成分的吸收,同时日粮的成分也影响球虫发育及致病性。因此,可以通过在日粮中添加某些营养物质或改变日粮成分以提高机体的免疫力,达到减轻或控制鸡球虫所造成的危害,从而减少因抗球虫药带来的耐药性及药物残留问题。研究发现,高蛋白日粮可以提高柔嫩艾美耳球虫感染鸡的死亡率和增加堆型艾美耳球虫感染鸡的球虫卵囊产量,而低蛋白日粮可降低球虫感染率。高能量饲料增加球虫病的发生,而低纤维日粮可降低艾美耳球虫感染鸡的死亡率。日粮中添加维生素E、维生素A和硒可提高感染球虫鸡的增重,降低死亡率。饲喂富含n-3FA的鱼油和亚麻籽油可显著减轻盲肠的球虫病变,并保持增重,但对巨型艾美耳球虫感染无明显影响。应用甜菜碱可增强各种抗球虫药的活性,尤其是甜菜碱与盐霉素合用,可更好地促进球虫感染鸡的增重和饲料转化率,减轻肠道病变,降低死亡率。3.4抗球虫疫苗的研发利用鸡球虫疫苗预防鸡球虫病是解决鸡球虫耐药性最为理想的方法。世界上已注册的球虫苗有两大类,第一类为中熟系球虫苗,如美国先灵葆雅公司生产的强毒活苗Coccivac和加拿大生产的强毒活苗Immucox;第二类为早熟系球虫苗,如英国生产的弱毒活苗Paracox和捷克生产的弱毒活苗Livacox。国内的鸡球虫病疫苗研究起步较晚,但也取得了一定的成果。继研制出中熟系球虫苗和早熟系球虫苗后,1996年索勋又推出晚熟系球虫苗Eimeriva和早、中、晚系联合球虫苗EimerivaPlus,并获得了较为确切的免疫保护力。目前已有多家科研院所研制出可在生产使用的中试产品。虽然活球虫疫苗的使用取得了良好的田间预防效果,但这类疫苗存在诸如散毒和致病风险、生产成本高等缺陷,限制了其推广应用。随着分子生物学、生物技术理论和方法的研究进展,尤其是球虫基因组计划的实施,人们把目光转向基因工程疫苗。其优越性在于可避免虫体对机体的损害,而又保持其抗原活性。国内外科技